Способ получения рацемического 8-изоэстрадиола

1092158 ОН ОН Т) ОСО ОСОСи Изобретение относится к синтезу биологически активных стероидов, конкретно к получению рацемического 8-иэоэстрадиола ( 11, обладающего эстрогенной активностью.5Известен способ рацемического получения 8-изоэстрадиола путем гидрирования 3-меток си, 3, 5 (1 О 1, 8, 1 4- -эстрапентаен-ол (11) водородом в присутствии Рй/СаСО при комнатОЭной температуре продукт реакции обраЦелью изобретения является повышение выхода рацемического 8"изоэстрадиола.Поставленная цель достигается тем что согласно способу получения рацемического 8-изоэстрадиола, в качестве производного ряда эстрана исполье зуют 3-окси3 51,10) 8 14-эстрапен 1 Э .Э 1ЭО таен-он 17-кетогруппу котороговосстанавливают алюмогидридом лития в тетрагидрофуране, продукт реакции ацетилируют уксусным ангидридом в пиридине с образованием 3,17-диацетатаО,НО мСОсО ( ) (Ч) ОП р и м е р, К раствору 10 г 3-окси,3,5(10 1,8,14-эстрапентаен- -она (1 Ч) (здесь и далее все соединения рацемическиев 350 мл тетрагидрофурана добавляют при перемеши вании 80 мл И раствора алюмогидрида лития в тетрагидрофуране, реакционную смесь кипятят в течение 2 ч. После обычной обработки продукт восстановления растворяют в 400 мл пири дина, добавляют 250 мл уксусного ангидрида и оставляют на сутки. После обычной обработки диацетат 1,3,5(101, 8,14-эстрапентаен,17 б-ола кристаллизуют из метилового спирта, Полу чают 0,2 г соединения (Ч) с т.пл. 20-121,5 С, выход 773.50 г стероида (Ч) растворяют в1 л бензола, добавляют 15 г никеля батывают при высокой температуре гидрохлоридом пиридина. Целевое соединение выделяют после хроматограФиина колонне, общий выход 36,5 ь1. Однако данный способ получения характеризуется недостаточно высоким выходом целевого стероида и необходимостью применения хроматограФии для его очистки, что неудобно при клиномасштабном синтезе. 1, 3, 5110 1,8, 14-эстрапентаен-З, 17/3 - диола, гидрированием системы сопряженных двойных связей полученного промежуточного продукта водородом в бензоле в присутствии никеля Ренея при50-70 С и давлении 80-100 атм до поглощения 20-30-ти кратного избытка водорода по сравнению с теоретическирассчитанным и удалением ацетильныхгрупп щелочным гидролизом. Выход целевого продукта составет 46%,(1) МО (1) Ренея, гидрирование проводят при 50-70 С и давлении 80-100 атм. Рео акцию прекращают, когда поглощается 150-200 атм водорода. Катализатор отфильтровывают, растворитель удаляют в вакууме, остаток кристаллизуют из метанола. Получают 34.35 г стероида (Ч 1) с т.пл, 158-161 С, выход 67,2-69,2%.Спектр ПИР, д, м.д.: 0,86(ЗН,с,СН 5 при С), 1,98 и 2,18 (по ЗН,с, аце-тильные группы при Си С) 2,5- 2,9 (м, протоны при Си С),4,63 (1 Н, т,протон при С), 7,09(1 Н,д, 3 =9 Гц-протон при С.Гидролиз диацетата (Ч 1) в обычных условиях в смеси бензол-метанол под действием едкого натра после обычной обработки и кристаллизации3 10921из метанола с водой дает целевоесоединение (1) с т.пл, 188,5-190 Со,( выход на стадии 89 ь ).Найдено,7.; С 79,44; Н 9,06.6 2 Ф 2 5Вычислена,ь, С 79,37; Н 8,88.Таким образом, использование предложенного синтеза приводит к повышению выхода 8-изоэстрадиола примерно с 36 до 46 Е, при его очистке нетребуется хроматография, что упрощает синтез. Более высокий выход рацемического 8-изоэстрадиола обеспечивается большей стереоселектив. т:настью восстановпения кетогруппы приСи использованием сопряженноговосстановления системы двойных связей (при восстановлении на никеле вмягких условиях происходит также игидрирование бензола, конкуренциямежду этими процессами дает в конечном итоге повышение выхода требуемого стереоизомера ).Рацемический 8-изоэстрадиол (1)исследуют по следующим тестам; контрацептивному ( посткоитальному ), вагинотропному, антигонадотропному,утеротропному. Контрацептивный (посткоитальный ) эффект. Опыты выполняют на половозрелых самках-крысах, которым подсаживают самцов и после обнаружения спермы во влагалищных мазках ежедневно в течение 7 дней вводят п/к масляные растворы исследуемых эстро- З 5 генов в различных дозах (диапазон .использованных доз для эстрадиола 0,00025-0,002 мг/кг в день, для 8- -изоэстрадиола 0,001-0,01 мг/кг в день ). Контрацептивный эффект оп ределяют на 19-20 день после обнаружения спермы. Результаты эксперимента обрабатывают методом 1,дсе 1 еГ 1 е 1 й1 И 1 сохоп (1949) с вычислением ЕД50 дозы, вызвавшей 502-ный контраггептив 45 ный эффект.Эффект вызывания течки (вагинотропный эффект ). Опыты выполняют на половозрелых крысах-самках, которых подвергают овариэктомии. После ус тановления стойкого диэструса эстро 584гены вводят подкожно в течение 5 дней в различных дозах в объеме 0,1 мл подсолнечного масла (диапазон использованных даз для эстрадиола 0,001-0,02 мкг/животное в день, для 8-изоэстрадиола 0,001-0,1 мкг/животное в день ). Одновреггенно следят за состоянием вагипальных мазков, которые берут дважды в течение рабочего дня. Картину вагинальных мазков оценивают по методу В 1 рдег, С 1 агг.п 8. Ъо 14 (1954). Зависимость между величиной дозы и частотой возникновения течки оценивают как в предыдущем .опыте, определяют ЕДа, т,е. поро.говую дозу, которая вызывает учиты- . ,ваемую реакцию у 503 животных.Антигонадотропный эффект, Опыты проводят на неполовозрелых самцах- крысах линии Вистар модифицированным методом Веуег, Ро 1:Св(1957). Результаты обрабатывают методом регрессионного анализа. Диапазон используемых доз для зстрадиола составляет 1-5-10-20 мкг/животное,(суммйрно за 5 днейи для 8-изоэстрадиала 2,5-5-10-20 мкг/животнае (суммарно за 5 дней ).Утератропный эффект, Опыты проводят на неполовозрелых мышах-самках линии БМК, которым в течение 3 днейвводят подкожна масляные растворы эстрогенов и разли гных дозах в объеме 0,1 млДиапазон доз для эстрадиола составляет 0,02-0,08 мкг/животное (суммарно за 3 дня ), дпя 8-изоэстрадиола - 0,8-8 мкг/животное (суммарна за 3 дня ). На 4 день мышей забивают взвешивают матку. С помощью регрессионного анализа для обоих веществ ЕД - дозу, вызываюсщую увеличение веса матки в два раза.Данные экспериментов показьгвают, что дозы, вызывающие течку, не достаточны для стимуляции роста матки, это позволяет рассматривать эффект течки как вагинотропньй.Сравнение контрагептивного (К ), вагинотропного (ВТ ), антиганадотропного ( АГ) и утеротропного ( У ) эффектов эстрадиола и 8-изоэстрадиала представлено в таблице.1092158 Эффективные дозы, мг/кг Соединение 0,00092 2,5 О 1,6 10 ф0,0029 Ь 10 3,6 10 Эстрадиол 8-Изоэстрадиол способ его получения поэволя ет достичь более высокого выхода, чем по известному способу. Составитель Т.ГусароваТехред В.Далекорей Корректор А.Пилипенко Редактор В,Ковтун Заказ 3201/5 Тираж 381 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5филиал ИПП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Таким образом, 8-изоэстрадиол имеет значительное преимуществоперед широко используемым в медицине эстрадиолом, при этом предлагаемый ЕДдо вт дг 2 сту 0,000470,10