Способ разделения рацематов аминокислот на оптические изомеры

ОП ИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз СоветскихСоциалистическихРеспублик(51)М. Кл. С 07 С 99/12 Ьеударствеиай каиитет СССР ав делам изобретеиий и открытий72) Авторы изобретени С. Бочков, В. А. Даванков и А. А. Курган 1) Звявител Ордена Ленина институт элементоорганическ соединений АН СССР 54) СПОСО НААЗДЕЛЕНИЯ РАЦЕМАТОВ АМИНОКИСЛОТПТИЧЕСКИЕ ИЗОМЕРЫ элюент 0,01%; Изобретение относится к усовершенствованию способа разделения оптических иэомероваминокислот.Известен способ разделения рацематов аминокислот, включающий взаимодействие междуполистирольной макросетчатой смолой с асям:метрическими центрами комплексообразоаания,где в качестве насадки используют полисхирольную макросетчатую смолу с фиксированными-оксипролиновыми лигандами, заряженной ионами двухвалентной меди, а в качестве элюеита - раствор гидроокиси. аммония 1),Недостатком известного. способа являетсязависимосп разделения от набухаемости носителя в элюенте, что обуславливают относительно низкую эффективность, лигандрообменногоразделения и длительность анализа, равную под.час нескольким десяткам часов.Цель изобретения - повышение. эффективноети и ускорение разделения.Указанная цель достигается тем, что в способе разделения рацематов в качестве насадки используют силикагель со связанной углеводородной неподвижной жидкой фазой, а в качестве,элюента - раствор следующего состава: ацетат, (сульфат) меди 10 - 10 4 М; . - бензилпро. лин 0,01 - 0,04 вес.%; ацетат аммония (натрия) 0,5 - 2 вес.%; ацетонитрил - вода (80:70 + +40:60) ч.Углеводородную часть насадки насыщают 1:бензилпролином, который образует комплекс с медью, находящейся в элюенте, Разделение рацематов в этих условиях основано. на различной прочности комплексов оптических изомеров аминокислот с описанной насадкой, содержащей асимметрический а-углеродный . атом в молекуле 1. -бензилнролина, Градиентное изменение состава элюента, величины рН и ионной силы раствора позволяют разделить.не только оптические изомеры одной и той же аминокислоты, но и сложные смеси рацематов различных аминокислот.П р и м е р 1, На колонне дчиной 250, мм и внутренним диаметром 4,6 мм, заполненной ЕогЬах 008 фракции 10 мкм проводят разделение оптических изомеров пролила,.Состава; ацетат меди - 10 4 М; 1:бенэилпролинацетат аммония 0,5%; ацетонитрил -89164 вода 30:70, Скорость злюента - 0,25 мл/мин. Ввод пробы осуществляют шприцом МЫ - 10. Объем пробы - 2 мкл, концентрация.пролина (раствор в элюенте) 2 вес.%. Достигнута эффективность 7200 теоретических .тарелок на колон. ну, при селективности.1,4. Каждый из пиков идентифицируют введением в колонну отдельно каждого из оптических изомеров пролина в злюенте. Анализ проводят на хроматографе;Цвет - 300.П р и м е р 2. В условиях, аналогичных примеру 1, проводят разделение при следующемУглеводороднаячасть насадки Амино- кислоты Сэ втэзСвНэ з 3:7 1,6 20 - 50 1,7 4:6 Аргинин Аспарагиноваякислота 1,85 3,5 : 6,5 25 - 60 20 - 80 С,Н,1,62 3: 7 Цистеин СНч( Глутамин онаякислота СэвНээ 1,59 4:б 4:6 20 - 60 1,45 СэвНзт 20 - 60 Сэ вНэ 7 20 - 60 Гистидин 1,41 СэвНээ 20 - 60 20 - 70 20 - 70 20 - 70 Иэолейцин С 1 вНэ 1,52 138 1,42 20 - 70 20 - 70 20 - 80,1.57 20 -75 1,41 20 - 75 20 - 60 20 - 60 1,41 ЛейцинЛизинМетионинФенилаланинПр олинСерииТреонинТриптофанТирозив Сэ вНзэ СэвНзт СэвНзт С 1 вН 37 Сэ вНз 7 Сэ 9 Нзз СэвНз 7 СэвНз 7 1 4рил - вода 40:60, Достигнута эффективность6700 тарелок прн той же селективности.П р и м е р 3, В условиях примера 1проводят разделение оптических изомеров пролина при составе элюента: ацетат меди510 4 М, . 1. - бензнлпролии. 0,03%; ацетат.аммония .1,5%; ацетоннтрил. - вода 35:65.Достигнута эффективность. 7100 тарелок притой же селективности,П р и м е р 4. Аналогично примеру 1проводят разделения ряда аминокислот с изменением углеводородной части насадки и соот.ношения - . ацетонитрил:вода.Данные опытов приведены в таблице,3,5 : 6,5 3,5 : 6,5 3,5 : 6,5 40: 6040: 60 , 40: 6040: 60 40 : 60 35 : 6535: 65 35 : 65 35 : 65Способ разделения рацемвтов. аминокислот, яа оптические изомеры, включающий перемеще. ние элюента,.содержащего оптические изомеры,через слой насадки с асимметрическими цент.рами комплексообразования, о т л и ч а ющ и й с я тем, что, с целью. повышения эффективности и ускорения разделения,.в ка.честве насадки используют силикагель с.хими 4 чески связанной .углеводородной неподвижной жидкой фазой, а в качестве элюента - раствор следующего. состава: ацетат (сульфат) меди Составитель И. АндриановаТехред Ж, Кастелевич Корректор В, Синицкая Редактор Р. Цицика Подписное Заказ 11140/32 Тираж 446ВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д 4 Ф Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул; Проектная, 4 Формула изобретения 891641 Ф10 ф - 10 фМ; 1. - бензилпролнн 0,01 -0,04 вес.%; ацетат аммония,(натрия) 0,5 -2 вес.%;. ацетонитрил, - .вода 30:70+40:60 ч, .Источники ннформапии,принятые во внимание прн экспертизе1. Иаванков.В, А., Золотарев Ю. А., Тевлин А. БЛигандообменная хроматография рацематов УШ. Количественное расщепление аминокислот на полистирольной матрице с груп.пировками Е-оксипролина с целью анализазнантиомерного, состава аминокислот, - "Биоорганическая химия", 4, 1978, У 9, 1164