Способ получения тирозина

СОЮЗ СОВЕТСКИС ОЦИАЛИСТИЧЕСКРЕСПУБЛИК 4 С 07 С 101/48 С 07 В 59/00 И(54) (57) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯНА-Н путем воздействиятритием на мишень, о т лщ и й с я тем, что, с целния удельной активностицелевого продукта с задапределением трития в мол.Н,тип) ОСУДАРСТЭЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР .ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ ОПИСАНИЕ ИЗОБР К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТ(56) 1. Авторское свидетельствпо заявке У 1024760/23-04,кл. С 07 В 23/00, 1968.2, Авторское свидетельствопо заявке У 1207180/23-04,кл. С 07 В 23/00, 1968,3. Орлова М.А., Несмеянов А"Радиохимия", В 5, 1978,(прото 80768152 ТИРОЗИ- томарным ич аюью повыше получения ным раскуле, в ка йодтирот.7681Изобретение относится к усовершенствованному способу полученияаминокислот, меченных тритием.Известно несколько способов получения аминокислот, меченных тритием, один из которых заключаетсяв гетерогенном каталитическом обме, не на никелевом катализаторе междугазообразным тритием и аминокислотами 1 1, 1 ОНедостатком этого способа является невысокая удельная активностьполученных аминокислот (5 мки/г).Известен также способ полученияаминокислот, меченных тритием, который заключается в изотопном обмене с газообразным тритием в условиях высокочастотного дугового разряда 2,Наиболее близким к описываемому 2 Оспособу является способ получениятирозина-ЗН бомбардировкой атомарньм тритием твердой замороженноймишени тирозина 3 .Этот простой, достаточно быстрый 25метод, дающий селективную пометкуимеет тат недостаток, чтоудельныеактивности получающихся аминокислот не превышают 1 кл/ммоль.Целью предлагаемого изобретенияявляется повышение удельной активности целевого продукта, а также,получение продукта с заданным распределением трития в молекуле.Поставленная цель достигаетсяэа счет того, что в качестве мишенииспользуют З-йодтирозин.Описывается способ получения тирозина, который заключается в обра-.ботке мишени 3-йодтирозина атомарным.4 Отритием. Мишень можно облучать прикомнатной температуре и при охлаждении жидким азотом. Целевой продуктвыделяют известным способом - хроматотрафически из мишени тирозина-Н.П р и м е р 1. 3-йодтирозин вколичестве О, 1 мг наносят методомлиофилизации на внутреннюю поверхность реакционного сосуда объемом250 см, который затем откачиваютна вакуумной установке до остаточного давления,-10 мм рт.ст. В реак ционный сосуд напускают тритий до-5давления 4 10 мм рт.ст., охлаждаютсосуд жидким азотом и включает на20 с вольфрамовую спираль (2000 С),расположенную в середине реакционного сосуда, на расстоянии 1 см от 52 2мишени. Таким образом достигается условие прямого пролета атомов до мишени. После удаления трития и раэморожения мишени вещество смывают водой и раствор упаривают несколько раэ на роторном испарителе для отделения подвижного трития, после чего методом бумажной хроматографии (бу мага Ватман 2, растворитель Н -бутанол-этанол-вода 12:3:5, время раз" деления 10 ч) или тонкослойной (пластинки "Бд 1 иГо 1",:тот же раство- ритель, 20 мин) йроводят выделение получившегося тирозина-Н беэ носи-теля. Распределение трития в молекуле равномерное. Удельная активность 30 К/ммоль,П р и м е р 2. 1 мг 3-йодтирозина наноСится на внутреннюю поверхность реакционного со .Уда объемом 1000 см . Далее проводятся те же операции, что и в примере 1. Рас" стояние от нити до мишени 5 см. Тритий преимущественно содержится в ароматическом кольце (807). Удельная активность 30 К/ммоль.П р и м е р 3. 0,2 мг 3-йодтирозина наносйтся на внутреннюю поверх" ность реакционного сосуда, который находится отдельно от диссоциатора с вольфрамовой спиралью и соединяется .с ним изогнутой стеклянной трубкой. Расстояние от нити до мише" ни 25 см. Остальные операции аналогичны примеру 1. Время облучения 1 мин, давление трития 6 10ипи 6 10 2 мм рт.ст., температура спира" ли 1700 С. Тритий вводится в боковую цепь тирозина. Удельная активность 30 К/ммоль.П р и м е р 4. Условия аналогичны примеру 3, но охлаждение жидким азотом не применялось, Тритий вводит ся в боковую цепь тирсзина. Удель-ная активность 30 Ки/ммоль.П р и.м е р 5. Условия аналогичны прмеру 3, но операция повторялась 5 раз, причем каждый раз мишень размораживалась и реакционный сосуд откачивался до остаточного давления (10 мм рт.ст,). Распределение трития в молекуле тирозина равномерное. Удельная активность30 Ки/ммоль.П р и м е р 6. Приготовление. мишени аналогично примеру 3, но пос.ле охлаждения системы до 196 фС через ьэе в течение 5 мин прокачивали триРедактор П.Горькова Текред М.Исак КорректорВ. Гирняк Заказ 6644/4 Тираж 383 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 3 7681 тий под давлением 3,510 фмм рт.ст, при включении вольфрамовой спирали (1700 С). Распределение тритияравномерное. Удельная активность 30 К/ммоль.5П р и м е р 7. Условия аналогичны примеру 3, но операция повторялась 5 раз, причем каждый раз ми,шень размораживалась, смывалась 1 мл водьги снова готовилась методом; 1 р лиофилизации (для обновления поверхности), Распределение трития - равномерное, Удельная активность 30 К/ммоль.Главным преимуществом метода яв" 15 аяется возможность введения "метки" 52 4в нужное положение (ароматическоекольцо, боковую цепь или равномерно.,по молекуле) путем изменения условийоблучения. Временные затраты невелики: все операции занимают около2,5 ч. По сути описываемого способаполученный препарат тирозина-Н недолжен содержать носителя и следова-тельно его удельная активность со-ставляет около 30 К/ммоль, что превышает получаемую в прототипе более,чем в 30 раз,,Интерес вызывает возможностьприменения зтого метода для селективной пометки белков, которые передоблучением .можно легко пройодировать.1