Способ получения сорбента для аффинной хроматографии

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 1586 55 В 0 15 0 ерч НИ следовател нтерейной ии роСтурчак, В.Н.Фиатография прес%с Ыпйпд оптег зцг 1 асез о 1 Мамге, 1977, ч. ОРБЕНТАФИИ Изобретение отн ческим сорбентам и м но для выделения рецепторов и антителЦелью изобретен ние сорбционной ем длительности процес та. биоспецифи использовабелковых ится к жет быт чисты гормоновия являекости и тся повыше- сокращение ния сорбенГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИПРИ ГКНТ СССР К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯАФФИННОЙ ХРОМАТОГР П р и м е р 1. 10 г хлопковых волокон обрабатывают водным раствором периодата натрия при отношении иодной кислоты 0,07035 г на 1 г волокон при рН 4,5, модуле 5 и комнатной температуре в течение 24 ч. Получают волокно со степенью окисления 50, Полученное волокно обрабатывают 5-. ным раствором альбумина в забуференном физиологическом растворе при рН 8, модуле 5 в течение 6 ч при 20 С.Волокно промывают водой в течение 1 ч при модуле 10 при 20 С и проводят(57) Изобретение относится к биоспецифическим сорбентам и позволяет повысить сорбционную емкость и сократить длительность процесса получения сорбента. Хлопковые волокна обрабатывают водным раствором периодата натрия до степени окисления 5-10;, затем носитель обрабатывают 5 - 20;ь-ным раствором альбумина в физиологическом растворе при рН 8 - 10 в течение 6 ч. Носитель промывают водой и обрабатывают 2-5;-ным раствором гормона в 70;-ном диоксане в присутствии карбодиимида, Продукт промывают диоксаном, 80 ф,-ным водным этанолом и водой. Получают сорбент с содержанием гормона 15- 25 мг/г. 2 табл. иммобилизацию гидрокортизона обработкой его 20/-ным раствором в 70-ном водном диоксане в присутствии 50 мг1-этил-диметиламинопропил)-карбодиимида. Обработку продолжают 4 ч и добавляют еще 50 мг карбодиимидаМодуль обработки 5. Время 14 ч при 20 С,Промывку целевого продукта проводятдиоксаном в течение 1 ч при модуле 10 ч,800-ным водным этанолом при модуле 51 чи водой при модуле 10 15 мин. Контролькачества промывки проводят спектрофотометрически. Целевой и родукт содержит50 мг/г альбумина и 15 мг/г гемисукцинатагидрокортизона (табл, 1).П р и м е р 2, 10 г хлопковых волоконокисляют по примеру 1, но при отношениииодной кислоты 0,09849 г на 1 г волокна.Получают волокно со степенью окисления7. Полученное волокно обрабатываютКоличествосорбируемых клеток на г Количествосорбируемых антител к гидрокортиэону, мг/г (сорбционнаяемкость Содержаниеальбумина,мг/г Носитель Пример 3,7 10 45 10 60 10 270 360 450 1,0 15 20 25 12 10 50 100 200 120 1 2 3 Известный Целлюлоза Найлон 10-ным раствором альбумина в эабуфе, ренном физиологическом растворе при рН9, модуле 5 в течение 6 ч при 20 С, Волокнопромывают водой и проводят иммобилизацию гидрокортиэона обработкой его 3- 5ным раствором в 70-ном водном диоксанев условиях примера 1. Промывку проводятпо примеру 1, Целевой продукт содержит100 мг альбумина на 1 г носителя и 20 мггемисукцината гидрокортизона на 1 г носителя,П р и м е р 3. Окисление хлопковых,волокон проводят по примеру 1, но при отношении иодной кислоты 0,1407 г на 1 гволокна. Получают волокно со степенью 15окисления 10. Полученное волокно обрабатывают 20 ,-ным раствором альбумина взэбуференном физиологическом растворепри рН 10, модуле 5 в течение 6 ч при 20 С.Волокно промывают. водой и проводят обработку 5;-ным раствором гидрокортиэона в70 %-ном водном диоксане в условиях примера 1, Промывку проводят по примеру 1,Целевой продукт содержит 200 мг альбумина и 25 мл гормона на 1 г носителя. 25П р и м е р 4, 10 г хлопковых волоконобрабатывают по примеру 1 для полученияволокна, содержащего 50 мг/г альбумина,Вместо гемисукцината гидрокортизона к содержащему альбумин волокну добавляют 3027,-ный раствор гемисукцината эстрадиолаи иммобилизацию его проводят по примеру1 для гемисукцината гидрокортизона. Целевой продукт содержит 50 мг/г альбумина и16 мг/г гемисукцината эстрадиола. 35Сорбционные свойства йриведены втабл, 2. П р и м е р 5. 10 г хлопковых волокон обрабатывают по примеру 2, но вместо ге мисукцината гидрокортизона добавляют такое же количество гемисукцината эстрадиола, Промывку проводят по примеру 1, Целевой продукт содержит 100 мг альбу- мина на 1 г носителя и 22 мг гемисукцината 45 эстрадиола на 1 г носителя (табл, 2),П р и м е р 6. Окисление 10 г хлопкового волокна и иммобилизацию на него альбумина проводят по примеру 3. При обработке гормоном вместо гемисукцината гидрокортизона добавляют такое же количество гемисукцината эстрадиола (5-ный раствор в 70-ном диоксане в условиях примера 1), Промывку проводят по примеру 1. Целевой продукт содержит 200 мг альбумина и 27 мг гормона на 1 г носителя (табл, 2).Данные по сорбционной емкости сорбентов, полученных предлагаемым и известным способами, представлены в табл. 1 и 2,Из табл, 1 и 2 видно, что предлагае ы: способ позволяет получить сорбент, содержащий в 10 раза больше иммобилизованного гормона, сорбционной емкостью в 220-370 раэ больше, чем у сорбента, получаемого по известному сг.осе ау, Длительность процесса сокращается с 7, до 40 ч, а получаемый сорбент не требует особых условий хранения и может храниться при атмосферном давлении и комнатной температуре.Формула изобретения Способ получения сорбента для аффинной хроматографии, включающий последовательную обработку текстильного носителя, содержащего альдегидные группы, водным раствором альбумина,и раствором гормона в 70;-ном водном диоксане в присутствии карбодиимида с последующей промывкой полученного сорбента. о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения сорбционной емкости и сокращения длительности процесса, в качестве текстильного носителя используют альдегидсодержащий целлюлоэный материал со степенью окисления 5 - 10;, обработку проводят 5-20-ным раствором альбумина в физиологическом растворе при рН 8 - 10 до содержания альбу- мина 50 - 200 мг/г носителя и затем 2 - 5- ным раствором гормона до содержания 15-25 мг/г носителя и продукт последовательно промывают диоксаном, 80-ным водным раствором этанола и водой.Таблица 11586740 Таблица 2 Составитель Т,ЧиликинаТехред М,Моргентал Корректор Э,Лончакова Редактор И.Шулла Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 1 О 1 Заказ 2382 Тираж 571 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва. Ж, Раушская наб 4/5