Мосааки

Номер патента: 1739855

Опубликовано: 07.06.1992

Авторы: Мицие, Мосааки, Юнити, Ясуджи

МПК: C12N 15/28

Метки: активностью, некроза, обладающего, опухоли, полипептида, фактора, человека

...20 мкг/мл,5. Конструирование рекомбинатных.плазмид,6120 мкл раствора олиго(дЦ)-концевой к-ДНК смешивают с равным объемомраствора олиго(дГ)-концевой ДНКрВК 322, инкубируют при 65 С в течение5 мин и при 57 С в течение 120 миндля достижения ренатурации.6, Отбор организмов-хозяев.Полученными плазмидами трансформируют клетки штамма Е.со 1 Х 1776,культивируют при 37 С в 20 мл Ь-бульона (состав: 10 г триптона, 5 г дрожжевого экстракта, 5 г хлористогонатрия и 1 г глюкозына 1 л, рН 7,2),содержащего 100 мкг/мп диаминопимелиновой кислоты и 40 мкг/мл тимидина, дотех пор, пока мутность, измеряемая при600 нм, не достигнет 0,5. Клетки собираюто, центрифугированием при 4, С, промывают10 мл 10 мМ буфера трис-ИС 1 (рН 7,3),содержащего 50 мМ...