Способ оценки реакции гемагглютинации

, 1 7004 а).4 С 01 ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ ЕТЕПЬСТВУ АВТОРСКОМ р. 22.ГЕМАГПП тение относится к микроель изобретения - ускобиологии ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ ССС ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫ(54) СПОСОБ ОЦЕНКИ РЕАКЦИИТИНАЦИИ(57) Изобре рение и повьппение точности способа.Для получения спектра рассеянногосвета используют установку, состоящую из фотооптической части, усилителя и анализатора спектра. Луч отлазера фокусируют линзами на исследуемом объеме. Рассеянный свет регистрируют под углом 1 О . После усиления сигнала он поступает в анализатор спектра. Спектр обрабатываютна ЭВМ и определяют полуширину спектральной функции.Изобретение относится к медицине и может быть использовано для быстро го обнаружения и идентификации микробных и немикробных антигенов, а также антител к ним.Цель изобретения - ускорение и повышение точности способа.Способ осуществляется следующим образом.Для оценки реакции гемагглютинации (РГА) и непрямой гемагглютинации (РНГА) применяют установку для Получения спектра рассеянного света, которая состоит из фотооптической части, усилителя и анализатора спектра. В качестве источника излучения используют лазер ЛГ, луч от которого фокусируют линзами на исследуемом объеме (гелий-неоновый лазер с длиной волны 0,63 мкм). Рассеянныйо свет регистрируют под углом 10 Фотометрической приставкой типа ФМЭЛА После усиления сигнала усилителем типа 1 У 14 он поступает в анализатор спектра СК 4-72 (ширина полосы обзора 50 Гц, ширина полосы пропускания филь тра 0,25 Гц). Затем спектр обрабатывают. на ЭВМ "Электроника ДЗ", при этом с высокой точностью определяют полуширину спектральной Функции Г из формулы 15 20 25 30 АГ1 (В)(Г+ /2)2 + 2 1где 1/2 - полуширина частотной характеристики фильтра анализатора по полувысоте,- центральная частота Фильтра;А и Г - подгоночные параметры,Г - полуширина спектральнойфункции,П р и м е р 1. Обнаружение вирусных антигенов при помощи РГА.В качестве объекта исследованиявзяли аллантоисную жидкость куриного эмбриона, зараженного вирусомгриппа А (Свердловск) 7862/82-НЗИ 2.Реакцию ставили в лунках полистироловых пластин, где вируссодержащийматериал двукратно разводили физиологическим раствором от 1:25 до1 ф 409600 в объеме 0,5 мл, Затем вкаждую лунку добавляли по 0,5 мл 1%ной взвеси куриных эритроцитов. Послеоседания эритроцитов в контроле (через 40,мин) результат реакции учитывали общепринятым визуальным способом. Визуально положительная реакция регистрировалась до разведения 1:800.Измерение параметров спектра методом СОС делали через 10 мин после постановки реакции, для этого брали по О, 1 мл пробы из каждой лунки и разбавляли 2 мл физиологического раствора. В тех образцах, где происходило склеивание эритроцитов, наблюдали сужение спектральных кривых вплоть до разведения 1:204800 (при этом Г Ргд = 4,7 1 0,2), для разведения 1:800 Гр 1-,1 = 33+ 0,2). Для контрольного образца (эритроциты с физиологическим раствором) полуширина спектра была стабильной и составляла Г = 5,1"0,2.П р и м е р 2. Титрование специФических антител при помощи РНГА.В качестве объекта исследования взяли псевдотуберкулезную антисыворотку. К 0,4 мл двукратных разведений сыворотки на физиологическом растворе (с 1:100 до 1:204800) добавляли по О, 1 мл 1%-ной взвеси стандартного эритроцитарного псевдотуберкулезного диагностикума. Реакцию сопровождали контролем сыворотки (сыворотка в начальном разведении и нормальные эритроциты барана) и контролем диагностикума (сенсибилизированные эритроциты и физиологический раствор). Визуальный учет результатов проводили после оседания эритроцитов в контролях (через 1,5-2 ч), а реакцию методом СОС начинали уже спустя 10 мин после постановки реакции. Титр РНГА при визуальном учете составил 1:12800, при учете методом СОС - 1:409600 (Г,г =7,6 ф 0,2). Полу- ширина спектра для контрольных образцов оставалась на уровне Г =8,2+0,2).Как видно из обоих примеров, цель изобретения достигается тем, что чувствительность способа регистрации реакции методом СОС была существенно выше, чем при оценке РГА и РНГА обычным визуальным способом. Кроме того, регистрация предлагаемым способом осуществляется значительно раньше (через 10-15 мин), чем при визуальном способе (через 1-2 ч), Таким образом, регистрация РГА и РНГА по изменению полуширины спектров рассеянного света методом СОС обеспечивает одновременно экспрессность учета и высокую его чувствительность.Составитель В. ФроловаТехред И.Попович Корректор Т. Колб Редактор М. Петрова Заказ 3382/40 Тираж 776 ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Подписное Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4. з1327004Ф о р м у л а и з о б р е т е н и я вышения точности способа, регистрациюосуществляют в пучке когерентного изСпособ оценки реакции гемагглюти- лучения, измеряют полуширину спектра нации путем регистрации образования рассеянного света, при уменьшении ее5гемагглютинатов, о т л н ч а ю щ и й- по сравнению с контролем определяют с я тем, что, с.целью ускорения и по- наличие гемагглютинатов.