Способ получения модифицированного макропористого кремнезема

СОЮЗ СО 8 ЕТСНИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКРЕСПУБЛИК 19) (И) 1)4 В 01320 В 01 Р 15/08 с мс а.ссс САНИЕ И НИЯ СКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ А СУДАРСТ 8 ЕКНЫЙ КОМИТЕТ СССРО делАм изОБРетений и ОткРытий(46) 07.10.86. Бюл, У 37 (71) Ленинградский ордена Ленина и ордена Трудового Красного Знамени государственный университет им. А.А,Жданова(56) Авторское свидетельство СССР У 857169, кл. С 08 К 9/04, 1981.Авторское свидетельство СССР 9 1153975, кл. В 01 3 20/10, 1982. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЧ МОДИФЙЦИРОВАННОГО МАКРОПОРИСТОГО КРЕМНЕЗЕМА (57) Изобретение относится к макро- пористым кремнеэемным сорбентам для выделения и очистки биологически активных соединений и позволяет повысить емкость модифицированного крем- неземного сорбента для получения 0-глобулина. 10 г макропористого кремнезема сушат 2 ч в токе сухого инертного газа, а затем обрабатывают 30 мл 107-ного раствора-фенилэтилтрихлорсилана в бензоле при 80 С в течение 2 ч в присутствии 0,23 мл триэтиламина. Продукт промывают сухим хлороформом, гидролиэуют горячей водой и сушат под вакуумом 6 ч приО130 С. Полученный образец заливают метилхлорметиловым эфиром и нагреваьют при 60 С в течение 2 ч в присутст вии каталитических количеств четырех хлористого олова. После экстракции диоксаном в присутствии сухого хлористого водорода образец сушат подовакуумом 5 ч при 130 С. Затем продукт обрабатывают 17-ным раствором имидазола,в этилацетате,2 ч при 77 С промывают этилацетатом, 107-ным . раствором триэтиламина в хлороформе и хлороформом. Целевой продукт содержит 0,14 ммоль/г остатков имидазольных групп.СНгС 1 0 , СНзОСг =0(ОН Цг г -СН ОН 8-0 ОН ОН ОН МСН=СН=ООН 8-(СН2ОН П ваП рова ны сорб при лобу честв графи гамма т Изобретение относится к сорбентам для выделения и очистки биологически активных соединений и может быть использовано в синтезе аффинныхсорбентов для получения гамма-глобулина,Цель изобретения - повышение емкости модифицированного кремнезема.П р и м е р 1, 10 г макропористого кремнезема (К, =12 нм, Бу = =120 м /г), очищенного от ионов железа, сушат 2 ч в токе сухого инертного газа, а затем обрабатывают 30 мл 107-ного раствора 3 -фенилэтилтрио хлорсилана в бензоле при 80 С в течение 2 ч. Перед проведением реакции в реакционную смесь добавляют 0,23 мл триэтиламина. Непрореагировавшие реагенты удаляют с образца сухим хлороформом. После. этого образец гидролизуют горячей водой, а затем сушато под вакуумом 6 ч при130 С. Хлорметилирование проводят в среде метилхлорметилового эфира в присутствии четыреххлористого олова как каталиозатора при 60 С в течение 2 ч. После окончания реакции образец помещают в аппарат Сокслета с диоксаном, в который подают сухой хлористый водород. После удаления четыреххлористи полученный продуктпревосходит известный.е р 2. Полученный модификремнеэем используют в каента для аффинной хроматоочистке плацентарноголина человека от гемопигтого олова образец отмывают от хлористого водорода диоксаном и сушат под вакуумом 5 ч при 130 С. Продукт содержит 0,37 ммоль/г хлорметильных групп. Анализ на хлор проводят модиФицированным методом Фольгарда с использованием предварительной обработо ки пиридином (при 100 С в течение 2 ч).Затем образец обрабатывают 17-ньм раствором имидазола в этилацетате 2 ч при77 С, промывают этилацетао том, 103-ньм раствором триэтиламина в хлороформе, хлороформом. Получен ный образец содержит 0 14 ммоль/г остатков имидазольных групп. Содержание имидазольных групп на поверхности определяют по адсорбции красителя кислотный ярко-оранжевый ЖМ=М Процесс получения модифицирова ого кремнезема можно представитьледующей схемой В хроматографическую колонку 1,5 х 30 см помещают 2 г сорбента, полученного предлагаемым способом, уравновешивают Фосфатным буФером (рН 7, О) и наносят 1 мл 107-ного плацентарного гамма-глобулина, содержащего 6-10 мг гемопигментов.Фракции по 5 мл элюируют из кслонки12 ц 1705 незема в пропущенном через колонкугамма-глобулине появляются римесигемопигментов (1-57.). Формула изобретения Составитель С.СтароверовТехред,А.Кравчук Корректор С.Шекмар Редактор Е.Папп Тираж 527 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Заказ 5286/7 Производственно-полиграфическое предприятие, г.ужгород, ул.Проектная, 4 30 мл фосфатного буфера рН 7,0. Все операции проводят при 4 С. Выход очищенного от гемопигментов гамма- глобулина составляет 807. Гаммаглобулин полностью очищен от гемо пигментов. Гомогенность полученного препарата подтверждают электрофорезом в полиакриламидном гелеРегенерацию носителя проводят при использовании 0,01 н. ИаОН. Регенерированный носитель отмывают водой от БаОН до рН 7,0, уравновешивают фосфатным буфером и используют для очистки новой порции гамма-глобулина. При этом выход гамма-глобулина сос тавляет 807, он полностью очищен от гемапигментов. После пятикратного использования модифицированного кремСпособ получения модифицированного макропористого кремнезема, включающий последовательную обработку .кремнезема кремнийорганическим модификатором, галогенсодержащим соединением и азотсодержащим лигандом, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения емкости продукта, в качестве модификатора используют -фенилэтилтрихлорсилан, в качестве алогенсодержащего соединения - метилхлорметиловый эфир и в качестве лиганда - имидазол.