Способ определения диклофенака натрия в биологических жидкостях

СОЮЗ СОВЕТСНИХСОЦИАЛИСТИЧЕСНРЕСПУБЛИН 1 И 33/48 ОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕПЬСТ(71) 1-й Московский ордена Ленина и орна Трудового Красного Знамени медицинский институт им. И. М. Сеченова(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ДИКЛОФЕНАКАНАТРИЯ В БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЯХ(57) Изобретение относится к способопределения диклофенака натрия в плазме и моче. Цель изобретения -упрощение способа за счет использования гексана во время экстракции.Производят экстракцию диклофенакагексаном из биологической кидкости.Экстрагент упаривают, Остаток обрабатывают муравьиной кислотой при нагревании до кипения на водяной бане,а затем уксусным ангидридом. Кипятят15-20 мин. Соотношение муравьинойкислоты и уксусного ангидрида 1:3-4.Кислота нейтрализуется насьпценнымраствором гидрокарбоната натрия. Производят экстракцию индолинона гексаном. Раствор вводят в газовый хроматограф и определяют количестводиклофенака натрия.59190 1 П р и м е р 1. В 2 мл плазмы вводят 1 мкг диклофенака натрия в виде спиртового раствора с концентрацией 1 мкг/мл, подкисляют плазму 1 мл 4 Ж-ной фосфорной кислоты до рН 2,0, экстрагируют 8 мл гексана, центрифугируют в течение 0 мин при 2000 об./мин, 5 мл органического слоя учаривают досуха на роторном испарителе, остаток растворяют вмл муравьиной кислоты при нагревании на водяной бане до кипения, через обратный холодильник добавляют 4 мл уксусного ангидрида и ,продолжают нагревание в течение 15 мин. После охлаждения добавляют 5 мл насьпценного раствора натрия гидрокарбоната, экстрагируют 10 мп гексана, органический слой упаривают на роторном испарителе досуха, сухой остаток растворяют в 1 мл гексана и 2-3 мкл раствора вводят в газовый хроматограф. 40 45 50 55 1 12Изобретение относится к областианализа лекарственных средств, вчастности определения диклофенаканатрия в плазме и моче. Диклофенакнатрия - натриевая соль о- И 2,6дихлорфенил)-амино 1 фенил уксуснойкислоты (торговое название Вольтаренприменяется для лечения заболеваний,сопровождающихся воспалительным процессом (ревматизм, ревматоидный артрит и т.д.),Цель изобретения - упрощение способа.Цель достигается путем однократной экстракции биологической жидкости гексаном и сокращения временициклизации при использовании в качестве циклизирующего реагента смеси уксусного ангидрида и муравьинойкислоты.Способ осуществляется путемэкстракции диклофенака из подкисленных образцов биологической жидкостигексаном, упаривания экстрагента,обработки остатка муравьиной кислотой при нагревании на водяной банедо кипения, а затем уксусным ангидридом при соотношении муравьинаякислота - уксусный ангидрид 1:3-4,нагревания 15-20 мин, нейтрализациикислоты насыщенным раствором гидрокарбоната натрия, экстракции образовавшегося летучего производного -индолинона гексаном с последующимгазо-хроматографическим определением. 5 О 15 20 25 30 Э 5 Обнаружено 0,98 мкг диклофенака натрия.П р и м е р 2, В 2 мл мочи вводят 2 мкг диклофенака натрия в виде спиртового раствора с концентрациеймкг/мл, подкисляют мочу 1 мл 47.-ной фосфорной кислоты до рН 2,0, экстрагируют 8 мл гексана, центрифугируют в течение 10 мин при 2000 об/мин 5 мл органического слоя упаривают досуха на роторном испарителе, остаток растворяют в 1 мл муравьиной кислоты при нагревании на водяной бане до кипения, через обратный холодильник добавляют 3,5 мл уксусного ангидрида и продолжают нагревание в течение 17 мин. После охлаждения добавляют 5 мл насьпценного раствора натрия гидрокарбоната, экстрагируют 10 мл гексана, органический слой упаривают на роторном испарителе досуха, сухой остаток растворяют в 1 мл гексана и 2-3 мкл раствора вводят в.газовый хроматограф. Обнаружено 1,96 мкг диклофенака натрия.П р и м е р 3, В 2 мл плазмы вводят 1,5 мкг диклофенака натрия в виде спиртового раствора с концентрацией 1 мкг/мл, подкисляют плазму 1 мл 47.-ной фосфорной кислоты до рН 2,0, экстрагируют 8 мл гексана, центрифугируют в течение 10 мин гри 2000 об/мин, 5 мл органического слоя упаривают досуха на роторном испарителв, остаток растворяют в 1 мл муравьиной кислоты при нагревании на водяной бане до кипения, через обратный холодильник добавляют 3 мл уксусного ангидрида и продолжают нагревать в течение 20 мин. После охлаждения добавляют 5 мл насьпценного раствора натрия гидрокарбоната, экстрагируют 10 мл гексана, органический слой упаривают на роторном испаритвле досуха, сухой остаток растворяют в 1 мл гексана и 2-3 мкл раствора вводят в газовый хроматограф. Обнаруже-. но 1,49 мкг диклофенака натрия. Формула изобретения Способ определения диклофенака натрия в биологических жидкостях пу" тем экстракции органическим растворителем, добавления фосфорной кислоты до рН 2, упаривания органической фазы., обработки циклизирующим реагентом, затем раствором гидрокарбоната натрия, экстракции продукта гвкСа-,Составитель Н. ГуляеваРедактор В. Данко Техред А.Кравчук Корректор А. Обручар Заказ 5116/43 Тираж 778 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д, 4/5 Гроизводственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 3 12 ном, упаривания и гидрохроматографического анализа, о т л и ч а ю - щ и й с я тем, что, с целью упрощения способа, в качестве органйеско-. го растворителя на первой стадии экстракции используют гексан, в каФчестве циклизирующего реагента -59190 4смесь муравьиной кислоты и уксусного ангидрида в соотношении 1:(3-4) по объему, причем вначале к упареннОму экстракту добавляют муравьиную кислоту, доводят смесь до кипения, а затем вносят уксусный ангидрид и кипятят 5-20 мин.