Способ определения неэстерифицированных жирных кислот в плазме крови

СООЭ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТКИ ЕСИИХРЕСПУБЛИК 046 01 Ю 33/4, (4 б) 15.06.86, Бюл. Иф 22 (71) Научно-исследовательский институт химии при Горьковском ордена Трудового Красного Знамени государс, твенном университете им. Н.И.Лобачевского(56) Комаров Ф.И., Коровкин Б.Ф Меньшиков В.В. Биохимические методы исследования в клинике. Ленинград, Медицина, 1976, с210 - 211. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ НЕЭСТЕРИФИЦИРОВАННЫХ ЖИРНЫХ КИСЛОТ В ПЛАЗМЕ КРОВИ(57) Изобретение относится к биохимическим исследованиям крови на неэстерифицированные жирные кислоты(НЖК). Цель изобретения - упрощениеспособа, повышение точности и обесав 80 ш 1 237973 А 1 печение раздельного определения высших жирных кислот и суммарного содержания жирных кислот. Цель дос;тигается благодаря использованию при титровании ионселективного электрода с жидкостной мембраной, .Берут нитробензольный раствор солей кристаллического фиолетового и жирных кислот каприновой, лауриновой, пальмитиновой, стеариновой, олеиновой, линолевой, арахиновой, бегеновой при соотношении (2,85-3,15)й(1,9 2,1): (0,95-1,05):(17-19):(5,7-6,3) Е (7,6-8,4):(1,9-2,1):(0,95:1,05). Титрование проводят с использованием смеси хлороформа, ацетона и воды в обьемном соотношении 3:6:100. В качестве титранта используют кристаллический фиолетовый в концентрации (3-5) 1 О " М. По кривой титрования рассчитывают концентрацию. жирныхкислот.1237973где СС,р По кривой титрования определяютточку перегиба и рассчитывают общуюконцентрацию жирных кислот. Общаяконцентрация жирных кислот (высшихи низших) 1,3 10 " М, высппгх жирныхкислот 9 10 ь М,45Хроматографический анализ даетте же результаты.Время анализа составило 11 мин. 1Изобретение относится к биохимическим исследованиям, а именно кклиническому анализу крови на неэстерифицированные жирные кислоты (НЖК),Цель изобретения - упрощение способа, повышение точности и обеспечение раздельного определения высшихжирных кислот и суммарного содержания жирных кислот.П р и м е р 1, Для приготовленияжидкостной мембраны для ионселективного электрода (ИСЭ) берут 5 мл нитробензольного раствора смеси кислот,содержащей каприновую (225 мг/л),лауриновую (150 мг/л, пальмитиновую(600 мг/л), арахиновую (150 мг/л),бегеновую (75 мг/л), что соответствует массовому соотношенпю кислот3:2:1:18:6:8:2:1 (копцентрация каждой кислоты взята с относительнойточностью 57). Затем к полученномураствору добавляют 3 мл (3-5) 10М-3Модного раствора кристаллическогофиолетового (КФ), 10 мл воды, 20 млнитробензола. Добавлением 0,1 М раствора натровой щелочи, рН смеси доводят до 10,5 - 11, После неремешпванияна делительной воронке отделяют орга 30ническую мызу от неорганической.Электрод готовят путем нанесенияэтой органической фазы на пористуюперегородку.В качестве вспомогательного нодйого раствора жидкостного электродаиспользуют 1 10 "молярпый растворнатровых солей тех же кислот прирН 10 - 10,5.Пипеткой отбирают 0,5 мл плазмыкрови первого больного и помещаютв ячейку для титрования. Туда добавляют 0,6 мл хлороформа, 1,2 мл ацетона и 20 мл подь (объемное соотношение 3:6:100). рН смеси доводят,цо10,5. Титрование проводят 3,88 10Мводным раствором кристиллическогофиолетового на иономере универсальном ЭВс использованием ИСЭ сжидкой мембраной, приготовление которой описано вьше. Строят кривые ииз кривой титрования видно, чтоточка перегиба достигается при добавлении 0,37 мл КФ.Концентрацию НЖК в крови определяют по формулеС,ье Чу Зд 88:100 37- 2,87 О М,2- кбнцентрация НЖК крови, М- концентрация кристаллического фиолетового, М;7 - объем пробы плазмы крови, мл;Ч - объем кф, млТаким образом, концентрация НЖК в плазме 2,87110М, время ;определения 9 мин.Контроль проводят хроматографическим методом. Концентрация НЖК крови, полученная двумя способами, совпадает с точностью до 5 Е.Иэ вида кривой титрования можно заключить, что в пробе присутствуют в основном высшие жирные кислоты. Концентрация высших жирньх кислотС и выше составляет порядка 907общей концентрации жирных кислот.П р и и е р 2, Анализируют плазму крови второго больного. Объемпробы и условия определения такие жекак в примере 1.По кригой титрования определяютточку перегиба и рассчитывают общуюконцентрацию жирных кислот. Концентрация жирных кислот (высших и пизших) 17 10 " М, высших жирных кислот9 10 " М, что соответствует 50/,Хроматографнческий анализ подтверждает это количество и дает ту же качественную картину. Время анализа11 мин,П р и м е р 3 . Анализируют плазму крови третьего больного. Объемпробы и условия определения такие же,как в примере 1,Ф о р м у л а изобретения Способ определения неэстерифицированных жирных кислот в плазме крови путем титрования, о т л и ч а ющ и й с. я тем, что, с целью упрощения способа, повышения точности и обеспечения раздельного определения высших жирных кислот и суммарного содержания жирных кислот, для титрования используют ионселективный электСоставитель Н.ГуляеваТехред М.Ходанич Редактор Н.Горват Корректор А,Обручар Заказ 3282/44 Тираж 778 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб д.4/5Производственно-полиграфическое предприятие, г.ужгород, ул.Проектная,4 3.род с жидкостной мембраной, содержащей раствор в нитробензоле солей кристаллического фиолетового и жирных кислот каприновой, лауриновой, пальмитиновой, стеариновой, олеиновой, линолевой, арахиновойи беге- новой при массовом соотношении (2,85 в3,15):(1,9 - 2,1):(0,95 -237973 41,05): (1.7 - 19): (5,7 - 6,3): (7,6 -8,4):(1,9 - 2,1):(0,95 : 1,05),титрование проводят в двухфазнойсистеме, содержащей смесЬ хлороформа ацетона и воды в объемном соотношении 3;6:100, а в качестветитранта используют кристаллическийфйолетовый в концентрации (3-5)10 М.