Ингибитор вирусов

ОПИСАНИЕ 380131ИЗОБРЕТЕН ИЯ Союз Советских Социалистических РеспубликСР СКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ нсимое от авт. свидетельства Ле1629117/31-16) М.Кл. С 12 к яявлено 18.111.197 вкп Лев соединением Гоеударственнын комитет Совета Министров СССР оо делам изооретений н открытий.Еата оп голиковаидя описания 27 Х.1974 Авторы цзооретенц, Андреева, В. И. Вотяков, Л. С. Станишевский, И, Г. Тищенко А, Я, Гузиков и Л. И, Никонович чно-исследовательский институт эпидемиологиииологии и Белорусский государственныйКрасного Знамени университет имени В. И. Ленина Белорусски и и мик рдена Трудовогя Витез ИНГИБИТОР ВИРУ цс, а именестве ингературе редложецо лпиперидо"Сн Изобретение относится к медиц но к вирусологии.Предлагаемое соединение в кач битора вирусов в патентной лцт описано.В качестве ингиоитора вирусов применять З-окси,3-диметил-б-ар ныобщей формуль 1 где Агарильный радикал, содержащий в о-, м- и и-положениях галоид, алкильные и алкоксильные группы.П р и м е р. К раствору 0,3 г-моль метила- мина в 70 мл изопропанола прибавляют 0,13 г-моль 1,2 эпокси-метил-арил-пентен-она. Реакционную смесь встряхивают при комнатной температуре в течение 30 час. Изопропанол отгоняют,при пониженном давлении, а остаток подкисляют 5%-ной соляной кислотой. Кислый раствор экстрагируют эфиром для удаления нейтральных продуктов, а затем подщелачивают поташом. 2Выделившийся продукт отфильтровывают,промывают на фильтре водой, сушат и кристаллизуют из гексана. Получают З-окси,3- диметил-арилпиперидоны(1 - 111) с выходом до 84 Ъ: 1 (Аг=СвН;), т, пл. 53 С, хлоргцдрат, т. нл. 124 С; 11 (Аг=п-РСБН 5), т. пл.87 С, хлоргидрат, т. пл, 113"С; П 1 (Аг=п-СН;ОС 6 Н 4), т. пл, 95 С, хлоргпдрат, т. пл.165 С.о Хлоргпдраты З-окси-,З-дпметцл-б-арилпиперидиновпредставляют собой белые кристаллические вещества, легко растворимые вводе.Антивирусную активность названных соединений определяют на модели аденовируса 3 типа.Эталонный штамп 3 типа получен цз музеявирусов Института вирусологии им. Д. И. Ивановского АМН СССР. В опытах применяют впрусосодержащую культуральную жидкость с титром 5,3 1 ТЦД 5 О. Первичный отбор ингибирующцх соединений проводят на пассируемых кожно-мышечных клетках эмбриона человека по снижению цитопатцческого действия (ЦПД) вируса.Пассируемые кожно-мышечные клетки эмориона человека выращивают на среде из 5 гемогидролизата с 10% бычьей сыворотки.Используют пробирочные культуры на четвер тые сутки роста с посевной дозой клеток в380131 Предмет изобретения 0ОН СН Зо СН Составитель С, Щеиева Текред Л. Богданова Корректор Т. Хворова г едактор г. Спиридонова одписное Заказ 001 Изд.1080 Тираж 467 11111 ИИ Государственпого комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий Москва, Ж-З 5, а)гнокаи наб., д. 4/5Обл. гнн. Костромского управлении нздагельств, полиграфии и книжной торговли 31,0 мл 4 10 - 2 10. В качестве поддерживающей среды применяют гемогидролизат-поддерживающуо среду,Влияние соединений на инфекционную акгивность вируса определяют на культуре трипсинизированных клеток почки эмбриона человека (ПЭЧ), Клетки ПЭЧ выращивают в пробирках с посевной дозой 5 105 в 105 в 1,0 мл по общепринятому методу на 0,5%-ном растворе гидролизата лактальбумина с 10% бычьей сыворотки, Берут опыт на 5-е сутки роста и поддерживают на той же среде, но без сыворотки, Перед инфицированием культуру клеток однократно отмывают соответствующей поддерживающей средой, В отборочных опытах вирус с множественностью инфекций 0,03 - 0,3 ТЦД 5 о/кл инкубируют в присутствии 1,0 мл поддерживающей среды, содержащей препарат в нетоксчной дозе для культуры клеток в течение 7 - 10 суток. Учитывают разницу ЦПД вируса, обработанного препаратом и контрольного в процентах поражения клеточного монослоя. ЦПД оценивают по общепринятой четырехкрестной системе, где: 1+ соответствует 25%, 2+ - 50% 3+ - 75%, 4+ - 100% поражения клеточного пласта, Инфекционную активность вируса определяют методом титрования по ЦПД. Титр вируса вычисляют по методу 1 Кеес 1, Н. Мпепс 1 (1938). Сравнивают титр вируса репродуцированного в присутствии соединения и контрольного. Достоверность различий принята на уровне 95%.Препараты являются мало токсичными. Лишь такие высокие концентрации как 1600 лкг/мл оказывают цитотоксическое действие, а дозы 800 мкг/мл и ниже не вызывают никаких морфологических изменений, Соединение хлоргидрат-З-окси,3 диметил-фенилпнперндона(1) снижает репродукцию вируса более чем на 2,0 1 д ТЦДво/0,1 в концентрации 800, 40 мкг/мл и в концентрации 200,100 мкг/мл - на 1,0 - 0,8 1 д. Второе соединение хлоргидр ат-З-окси,3-дйметил- (и-Г-фенил) пнперидона(11) снижает титр репродуцированного вируса на 1,8 1 в концентрации 800 лкг/мл, на 1,0 - 0,8 1 д ТЦДко/0,1 в концентрации 400 - 100 мкг/мл.10 Таким образом, для обоих препаратов максимально действующая концентрация равна 800 мкг/мл, а минимально действующая - 100 лкг/мл.Оба препарата снижают репродукцию аде новируса 3 твпа на 2,0 - 2,8 1 д ТЦД 5 о/0,1.В то же время препараты не обладаот нивирулицидным, ни профилактическим действием, а на стадии адсорбции снижают на 0,5 - 0,8 1 д ТЦД 5 о/0,1 титр вируса.20 Применение З-окси,3-диметил-арилпиперидоновобщей формулы25 35где Аг - арильный радикал, содержащий во-, м- и тт-положениях галоид, алкильные иалкоксильные группы, в качестве ингибиторавирусов.