Способ дифференциации риккетсий вида riккетsiа акаri от riккетsiа siвiriса

СОЮЗ СОВЕ ГСКИСОЦИАЛИСТИЧЕ СКРЕСПУБЛИК 756358 А 1 5 Ы,(51)5 С 12 С 1/04 ОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИРИ ГКНТ СССР ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН ВТОРСКОМУ СВИ ЬСТВУ(71) Омский научно-исследовательский институт природноочаговых инфекций(56) Л, 1 апзопо 1, 1965, Чо 1. 94, р. 883.Здродовский П,Ф,. Голиневич Е.М, Учение о риккетсиях и риккетсиоэах. - М.: Медицина, 1972, с, 121 - 122,(54) СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЦИИ РКЕТСИЙ ВИДА В 1 СКЕТТБА АКАВВ 1 СКЕТТЯ 1 А 8181 В 1 СА Изобретение относится к медицинскои микробиологии и касается идентификации риккетсий группы клещевой пятнистой лихорадки (КПЛ), а именно В. айаг и В, з 1 Ыг 1 са,Известен способ дифференцирования риккетсий группы КПЛ с применением цель ных антигенов и мышиных сывороток. Цельные антигены, т,е, растворимые антигены, не освобожденные от риккетсиальных корпускул, получают иэ нативных суспенэий яичных культур с добавлением фенола (0.5 О/) и последующей многократной обработкой эфиром и лиофилизацией препарата.Однако использование овокультур риккетсий для иммунизации белых мышей с целью получения иммунных сывороток приводит к образованию антижелточных антител часто в титрах, превышающих титры специфических антител, что затрудняет серологический анализ, Известна воэможность применения диагностикума иммуног(57) Использование: серологические исследования, дефференциальная диагностика, осуществление мониторинга циркулирующих в природе риккетсий группы КПЛ. Сущность изобретения: из исследуемых штаммов выделяют цельнорастворимые антигены. Активность антигенов титруют в реакции связывания комплемента, Проводят РНГА с иммуноглобулиновым эритроцитарным диагностикумом для выявления риккетсий группы клещевой пятнистой лихорадки, При отрицательных результатах РНГА культуру идентифицируют как В, айаг, при положительных результатах - как В; з 1 Ыг 1 са, 1 табл. лобулинавого для выявления риккетсий группы КПЛ в реакции непрямой гемагглютинации (Р Н ГА) для обнаружения риккетсий и их антигенов, однако для дифференциации антигенной структуры В. айаг от В, з 1 Ыг 1 са он не применялся,Цель изобретения - повышение точности способа.Для достижения поставленной цели способ предусматривает исследование цельных антигенов риккетсий в реакции непрямой гемагглютинации (РНГА) с диагностикумом иммуноглобулиновым эритроцитарным сухим для выявления риккетсий группы КПЛ, что позволяет дифференцировать антигенную структуру В. айаг и В. зЬг 1 са.Сущность способа сводится к тому, что цельные антигены риккетсий исследуют в РНГА в серийных разведениях, начиная с рабочего разведения для РСК. Цельные антигены В, айаг в отличие от антигенов В, зЫг 1 са,в РНГА практически не выявляются.1756358 Состав Техред ль Н,РудаковМорге нтал Корректор С,П Редакто Рогулич ва Заказ 3062 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при Г 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 тент", г, Ужгород, ул.Гагарина, 101 роизводственно-издатель омбин П р и м е р. Для постановки РНГА в два ряда лунок планшета для иммунологических реакций вносят серийные разведения анти- генов в объеме 0,025 мл, физиологического раствора, во второй ряд контроль специ фичности в РТНГА) - по 0,025 мл иммунной сыворотки к В. з 1 Ыг 1 са. Планшеты встряхивают и выдерживают 15 мин при комнатной температуре, затем в каждую лунку добавляют по 0,025 мл эритроцитарного иммуног л обули ново го диагности кума для выявления риккетсий группы КПЛ, Планшеты встряхивают и оставляют на 2 - 3 ч при комнатной температуре, после чего учитывают результаты. Титром антигена в иссле дуемом препарате считают максимальное разведение последнего, которое еще вызывает агглютинацию эритроцитарного диагностикума не менее чем на,Результаты представлены в таблице, 20 Как видно из таблицы, антигенная активность препаратов В. айаг в РСК не ниже (1:2-1;4), чем В. з 1 Ыг 1 са (1:2), однако в отличие от антигенов В, з Ыгса титры в РНГА 1:32 - 1:128) при постановке РНГА с антиге нами, полученными из штаммов В. айаг "Каплан" и "Тогер", выявляли лищь следовые реакции (не более+ или).Использование предлагаемого способа позволит осуществлять мониторинг циркулирующих в природе риккетсий группы КПЛ.Формула изобретения Способ дифференциации риккетсий вида В 1 сКецз 1 а айаг от В 1 сКеаза з 1 Ыг 1 са, включающий приготовление из исследуемой культуры цельнорастаоримого антигена с последующей постановкой серологической реакции с антителосодержащим препаратом и учетом результатов, о т л и ч а ю щ и й- с я тем, что, с целью повышения точности способа, ставят реакцию непрямой гемагглютинации, при этом в качестве антителосодержащего препарата используют эритроцитарный иммуноглобулиновый диагностикум для выявления риккетсий группы клещевой пятнистой лихорадки и при отрицательных результатах реакции культуру идентифицируют как Всимеиза айаг, а при положительных - как В 1 сКеттз 1 а з 1 Ыг 1 са.