Способ определения адаптированности чабанов к холодовым нагрузкам в условиях отгонного животноводства

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИРЕСПУБЛИК 05 А 1 19) 5 6 01 М 33/49,33/5 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИПРИ ГКНТ СССР ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ К АВТОРСКОМУ С ЕЛЬСТ ИЯХ ОТ биохимия особности ода. Сущбор крови, деляют соов. При нава от 1,7 , содержаии коэффи и выше организма(71) Научно-исследовательский институт гигиены и профессиональных заболеванийМинистерства здравоохранения КазССР(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АДАПТИРОВАННОСТИ ОРГАНИЗМА ЧАБАНОВ К ХОИзобретение относится к физиологии, биохимии и гигиене и может быть использовано для определения адаптированности организма чабанов к холодовым нагрузкам,Цель изобретения - упрощение способа за счет сокращения числа трудоемких операций.Способ осуществляют следующим образом,Для определения адаптированности человека к холоду используют три показателя адениловой системы: суммарное содержание адениловых нуклеотидов в эритроцитах, которое у адаптированных лиц составляет 1,7 мкмоль/мл эритромассы и выше, а в не- адаптированной контрольной группе от 0,5 до 1,6 мкмоль/мл; уровень АТФ у неадаптированных чабанов до 65%, от 65% и выше - у адаптированных лиц, а также коэффициент отношения АТФ к АДФ, имеющий у адаптированных чабанов значение 3 и выше,ЛОДОВЫМ НАГРУЗКАМ В УСЛО ГОННОГО ЖИВОТНОВОДСТВА (57) Использование: физиология, и гигиена труда, оценка работосп человека при воздействии хол ность изобретения: проводят за выделяют эритроциты, в них опре держание адениловых нуклеотид личии суммарного количест мкмоль/мл эритромассы и выше нии АТФ от 65% и выше и значен циента отношения АТФ к АДФ определяют адаптированность чабана к холоду, 1 табл. Принцип способа заключается в экстракции адениловых нуклеотидов 10%-ной трихлоруксусной кислотой, последующем их разделении методом низковольтного электрофореза и спектрофотометрией элюата в ультрафиолете.Реактивы: бумага ленинградская быстрая, М 2; 10%-ная трихлоруксусная кислота (ТХУ): 0,1 М цитратный буфер рН 4,5; серный эфир,Ход анализа: кровь из вены в количестве 3-4 мл берут в охлажденные пробирки с гепарином, Определяют гематокрит суспензии отмытых в физиологическом растворе эритроцитов, К 0,5 мл эритроцитов прибавляютт 0,5 мл 10%-ной ТХУ, охлаждают 30 мин в испарителе холодильника, центрифугируют при 3000 об/мин. Надосадочную жидкость количественно переносят в чистую пробирку с притертой пробкой и очищают путем встряхивания с трехкратным объемом серного эфира. После разделения слоев эфир отсасывается пастеровской пипеткой,1728805 Очистку повторяют дважды, В результате очистки эфиром удаляется ряд соединений ненуклеотидной природы, имеющих линии поглощения в ультрафиолете.Подготовленные экстракты наносят в количестве 0,1 мл на бумажные ленты для электрофореза, отступя от катодного конца ленты. Используются полосы бумаги 40 х 4 см . Разделение производят при напряжении 15 Вт/см в камере для бумажного электрофореза, заполненной 0,1 М цитратным буфером рН 4,5,После разделения фораграммы высушивают в горизонтальном положении в сушильном шкафу при 80 С 3 мин, затем просматривают на ультрахимескопе (фильтр УФ С - 1).В качестве свидетелей используются химически чистые препараты АТФ, АДФ АМФ в концентрации 4 х 10, 1,5 х 10, 1 10 м соответственно.Зоны миграции свидетелей и нуклеотидов ТХУ - экстракта эритроцитов строго постоянны и характеризуются определенной подвижностью, обнаруживаемой на ультрахимескопе,Очерченные пятна нуклеотидов вырезают, элюируют в 5 мл 0,1 М НС при 37 С в течение 4 ч, последние 30 мин непрерывно встряхивая. Оптическую плотность элюатов регистрируют на спектрофотометре при 258 и 290 нм.Содержание адениловых нуклеотидов рассчитывают по формуле0,363 Е40 100ПГгде 0,363 - расчетный коэффициент адениловой системы; Е - разность экстинкции при 258 и 290 нм; 40 - коэффициенты пересчета на 1 мл.Достоверные отличия от контроля прТо же,. при р 0,01,П р и м е р 1, По предлагаемому способуобследован овцевод-чабан со стажем работы 11 лет. Суммарное количество адениловых нуклеотидов в эритроцитах 1,885 мкмоль/мл, содержание АТФ 71 ф , отношение АТФ/АДФ 3,0.П р и м е р 2. Обследован овцевод-чабансо стажем работы по профессии 12 лет. Суммарное количество адениловых нуклеоти 10 дов 2,74 мкмоль/мл; АТФ 73 ф ; АТФ/АДФ4,5.П р и м е р, 3. Обследован овцевод-чабансо стажем работы 9 лет. Суммарное количество нуклеотидов 1,7 мкмоль/мл; АТФ 65 ф;15 АТФ/АДФ 3,0,Суммарные данные, полученные дляадаптированных чабанов (со стажем работыот 1 г) и неадаптированных людей (контрольных, чабанов со стажем менее 1 г) при 20 ведены в таблице.Таким образом, предлагаемый способпозволяет вместо реализации сложного исследования комплекса физиологических показателей провести значительно более25 простой и быстрый биохимический тест.Формула изобретенияСпособ определения адаптированностиорганизма чабанов к холодовым нагрузкамв условиях отгонного животноводства, о т 30 л и ч а ю щ и й с я тем, что, с цельюупрощения способа за счет сокращения числа трудоемких операций, у испытуемых проводят забор крови из вены, отделяютэритроциты, определяют в них адениловые35 нуклеотиды, и при суммарном их содержании 1,7 мкмоль/мл эритромассы и более,содержании АТФ 65 фи более от суммарныхадениловых нуклеотидов и отношенииАТФ/АДФ, равном 3 и более, определяют40 адаптированность к холодовым нагрузкам.