Способ флуоресцентного иммуноанализа
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Номер патента: 1642400
Авторы: Пономарева, Савицкий, Шаханина, Щеголев
Текст
1642400 20 Формула изобретения Составитель Е.ВасильеваТехред М,Моргентал Корректор М.Максимишинец Редактор А.Огар Заказ 1145 Тираж 419 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035 Москва, Ж, Раушская наб 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 ность БСА (5 г/л) в 250 мкл буфера М 1 в течение 2 ч при 37 С, После трехкратного промывания наносили по 100 мкл антиинсулиновых моноклональных антител МКАТ) Е 1 о, предварительно разведенных в буфере М 2, содержащем 50 мМ трис-НС 1, 9 г/л МаС 1, 0,5 г/л ИаИЗ, 5 г/л БСА, 0,5 г/л бычьего глобулина, 1 мл/л твина 20, в диапазоне концентраций 10 - 10 М, инкубировали 1 ч при 37 С. Лунки трижды промывали и вносили специфический коньюгат, кроличьи антимышин ые антитела (КАМ) - диэтилентриаминтетраацетат (ДТТА) - Е ц, 6 мкг/мл, в буФере М 2, дополнительно содержащем 10 М ДТРА и 5 х 10 М СаС 12, по 100 мкл, инкубировали в течение 1 ч при 37 С, После трехкратного промывания добавляли усиливающий раствор (1 КВ - Юа 11 ас), 100 мкл, перемешивали на встряхивателе в течение 10 мин, измеряли флуоресценцию на Флуорометре "Агсав 1230". В контрольных лунках анализ воспроизводили без этапа нанесения МКАТ Ео. Минимальная концентрация МКАТ Е 1 о, при которой сигнал опыта в 2 раза превосходил сигнал контроля, составила 1,26 х 10 М,После приготовления иммуносорбента, нанесения МКАТ Е 1 о аналогично описанному наносили специфический коньюгат, КАМ - ДТТА, б мкг/мл, по 100 мкл в буФере М 2, дополнительно содержащем 10 М ДТРА и 5 х 10 М СаС 12, инкубировали 1 ч при 37 С. После трехкратного промывания добавляли ЕоС 12 (6,6 х 10 М) в 100 мкл 75 мМ ацетатного буфера, рН 5,0, инкубировали в течение ЗО мин при комнатной температуре. Обрабатывали твердую фазу промывным раствором, содержащим 10 М ДТРА и 10 М СаС 12, в течение 5 мин при комнатной темпе ратуре, затем промывали 3 раза. Добавлялиусиливающий раствор (100 мкл), перемешивали на встряхивателе в течение 10 мин, измеряли флуоресценцию на флуорометре "Агсоэ 1230". В контрольных лунках анализ 10 воспроизводили без этапа нанесения МКАТЕ 1 о, Минимальная концентрация МКАТ Ео, при которои сигнал опыта в 2 раза превосходил сигнал контроля, составила б х 10 М.Предлагаемый способ флуоресцентного 15 иммуноанализа позволяет оп 10 еделятьМКАТ Е 1 о в концентрации б 10М, в то время как известный способ имеет чувствительность 1,26 10 М. Способ флуоресцентного иммуноанализа, включающий взаимодействие иммуносорбента,. исследуемого образца и 25 меченного Ео конъюгата с хелатирующимагентом с последующей оценкой иммуннойз+реакции по Ец, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения чувствительностиз+способа, введение ионов Еи в коньюгат ЗО осуществляют после взаимодействия реагентов в концентрации 2 10 - 2,4 10 М в ацетатном 50 - 100 мМ буфере с рН 4,75- 5,5 и инкубируют в течение 20 - 60 мин.
СмотретьЗаявка
4600199, 31.10.1988
ИНСТИТУТ БИОХИМИИ ИМ. А. Н. БАХА, ИНСТИТУТ ЭПИДЕМИОЛОГИИ И МИКРОБИОЛОГИИ ИМ. Н. Ф. ГАМАЛЕИ
САВИЦКИЙ АЛЕКСАНДР ПАВЛОВИЧ, ПОНОМАРЕВА ИРИНА ВЛАДИМИРОВНА, ШАХАНИНА КИРА ЛЬВОВНА, ЩЕГОЛЕВ АНДРЕЙ АЛЕКСАНДРОВИЧ
МПК / Метки
МПК: G01N 33/533
Метки: иммуноанализа, флуоресцентного
Опубликовано: 15.04.1991
Код ссылки
<a href="https://patents.su/2-1642400-sposob-fluorescentnogo-immunoanaliza.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ флуоресцентного иммуноанализа</a>
Способ конструирования плазмидной днк, штамм -продуцент эндонуклеазы рестрикции и способ получения эндонуклеазы рестрикции
Номер патента: 1040791
Опубликовано: 07.02.1985
Авторы: Баев, Глатман, Кравец, Кузьмин, Мороз, Солонин, Таняшин
МПК: C12N 15/00
Метки: днк, конструирования, плазмидной, продуцент, рестрикции, штамм, эндонуклеазы
...Физической структурыплазмидную ДНК выделяют ускореннымметодом (К 1 е 1 п Р,1 ейа 1, 1980,Р 1 азтпЫ, 8, 88-93) .Рестрикционный анализ проводят спомощью эндонуклеаз Р-1, Вя 1 11,11, Отобранные. клоны проверяютна присутствие системы рестрикциимодификации Есо 87. Для этого сравнивают эффективность посева (э.п.)фага; 0 на клетках, содержащихрекомбинантные плазмиды, а такжештаммах С 5183 (гь. -где ) и ) С 5183( г т+ ) с плазмидой рЬ 13. Наличие в клетках модификации устанавливают при снижении э.п. методом(Т. Ага, А.Ао 1 с 1, 3.Васй. 5, 18,1962) . Полученные данные представлены в табл. 2,Как видно из табл. 2, штамм3 С 5183/С 113 на четыре порядка ограничивает размножение фага Ъ0по сравнению со штаммом 1 С 5183( ГО ), не несущем плазмидуу...
Способ получения меченных астатом-211 моноклональных антител
Номер патента: 1695757
Опубликовано: 10.05.1995
МПК: G01N 33/532
Метки: антител, астатом-211, меченных, моноклональных
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МЕЧЕННЫХ АСТАТОМ-211 МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ путем обработки астата реагентом, инкубации его с моноклональными антителами с последующим хроматографическим выделением целевого продукта, отличающийся тем, что, с целью сокращения времени получения целевого продукта, астат обрабатывают диэтилентриаминпентауксусной кислотой, взятой в концентрации 10-4 моль/л, в присутствии персульфата натрия, нагревают на водяной бане в течение 3 5 мин, охлаждают и инкубируют с антителами, взятыми в молярном соотношении к диэтилтриаминпентауксусной кислоте 20 1.
Способ получения гибридного полипептида, содержащего нв а
Номер патента: 1746887
Опубликовано: 07.07.1992
МПК: C12N 15/30, C12N 15/51
Метки: гибридного, полипептида, содержащего
...синтетический рге 8 2 пептид: 0,08 мкгСинтетический рге 8 2 пептид:0,08 мкгрге 2-8 частица дрожжей, управляемая Я Составитель Н.КузенковаТехред М.Моргентал Корректор О.Кундрикзуется следующей аминокислотной последовательностью; хоМеР 61 п-Тгр-Азп-Бег-ТЬг-Аа-РЬе - Нз - 618-А 1 а.ецп-Азр-Рго-Аг 9-.а-А Г 9-61 у.ец-Туг-Р пе-Р го-А 1 ауу-Яего -Бег-Зегу-ТЬг-Ча 1-Азп-Рго-Аа-РгР Азп-Ие - А 1 а-Яег-Н 1 з-Ие-Яег-Зег-Зег-бег - Аа -Аг 9-ТЬгу-Аз р-Рго-Ча 1-ТЬг-Азп.Функциональным производным Рге 82-3 согласно предлагаемому способу является производное, у которого аминокислота аланин (6 СТ) в положении 45 модифицирована с помощью сайт-специфического мутагенеза на треонин (АСТ),Рекомбинантная плазмидная ДНК состоит из последовательности, кодирующей...
Способ прогнозирования течения ретинобластомы после энуклеации
Номер патента: 1775669
Опубликовано: 15.11.1992
Авторы: Галимова, Дьякова, Мустафина, Савостин
МПК: G01N 33/48
Метки: после, прогнозирования, ретинобластомы, течения, энуклеации
...снижается и имеет значение 8,0 + 1,41, В опухолевых тканях ретинобластомы смешанного типа, где превалируют истинные розетки интеносивность рефлекса при д = 2,798 А составляет 4,33 + 0,47 усл. ед.Предлагаемый способ отличается .от прототипа тем, что прогноз заболевания ретинабластомы устанавливается путем исследования высушенных до постоянного веса опухолевых тканей на дифрэктометре Дронс медным излучением, длина волны равна 1,54051, фильтр никель, площадь исследуемой поверхности равна 1,5 см . Межплоскостные расстояния рассчитывались по формуле Вульфа-Брегга.П р и м е р 1. Больной С-в, 1 год 10 месяцев, ист. б-зни 3296 за 1989 г. пр. 5 М 1899-1908. Клинический диагноз: ретинобластома правого глаза, Энуклеация произведена 10 августа 1989...
Способ получения растворимой -атфазы
Номер патента: 1070479
Опубликовано: 30.01.1984
Авторы: Корягин, Новикова, Хватова
МПК: G01N 33/50
Метки: атфазы, растворимой
...мкМ фосфора/мин и 1558 мкМ фосфора/мин, удельная акУдельна 0 518 мкМ фосфора/мг бел тивность 4,7 мкМ фосфора/мг балка мин, камин .ФЗатем митохондрии для,освобожде- К РаствоРУ фермента добавляют ния от внешних мембран суспендируют сульфат аммония до конечной концентв гипотонической среде (0,02 М трио- . рации 50 от насыщения, корректируя буфер,рН 7,5) из расчета 20.мг бел- при этом РН 7,0-7,5 трисом. Раствор ка/мл среды и выдерживают при 4 С в выдерживают 30 мин при температуре течение 30 мин, Затем раствор центри С, затем центрифугируют 10 мин Фугируют 30 мин при 10000 д. Осадок при 10000 д. Супернатант выбрасыва 55суспендируют в растворе соли (0,9 М ют, осадок растворяют в среде (0,25 М ИаС 1 и 0,02 М трис-буфер, РН 7,5) из...
Предыдущий патент: Способ определения антител класса i м к корантигену вируса гепатита в
Следующий патент: Цифроаналоговый тахометр
Случайный патент: Грунтовочный состав для древесных плит