Способ прогнозирования течения ретинобластомы после энуклеации

/4 01 5) Т И ВИДЕТЕЛ ЬСТВУ АВТОРСКО сж во ту ОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМРИ ГКНТ СССР ПИСАНИЕ И(54) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ТЕЧЕНИЯ РЕТИНОБЛАСТОМЫ ПОСЛЕ ЭНУКЛЕАЦИИ Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмоонкологии и может быть использовано для прогнозирования клинического течения ретинобластомы.Известны клинико-инструментальные способы клинического прогнозирования ретинобластомы, включающие рентгенографию, диафаноскопию. эхографию, изотопную диагностику. Тем не менее труднО установить дифференциальный диагноз заболеваний, напоминающих ретинобластому и заболеваний, за которыми может скрываться ретинобластома.Клинический прогноз ретинобластомы данными методами весьма затруднителен.Известен способ прогнозирования клинического течения ретинобластомы путем иссечения ткани опухоли из энуклеированных глаз, приготовление образца химическим путем, а именноиганием ткани в атмосфере кислорода здуха в муфельной печи при темпераре 450 С, смешением золы с броми 1775669 А 1(57) Использование: в медицине, в, частности к офтальмологии. Сущность изобретения; проводят исследование тканей опухоли, при этом высушенную до постоянного веса ткань опухоли исследуют методом рентгеноструктурного анализа, определяют процентное содержание апатита в ней и при его значении 4 и менее прогнозируют благоприятное течение, а при значении более.4 - неблагоприятное. Способ позволяет повысить точность прогноза течения ретинобластомы. 2 табл. стым калием и исследовании полученной смеси методом ИК-спектроскопии, Согласно данным авторов более неблагоприятному прогнозу ретинобластомы соответствуют образцы, содержащие в своем составе двухи однозамещенные фосфаты кальция. Однако данные о том, какие именно заместители присутствуют в составе фосфатов авторами не приводятся. Помимо этого, иэ-эа присутствия в анализируемых образцах соли галоида, бромистого калия, на наш взгляд, представляетсязатруднительным идентификацию галогеновых заместителей. Более благоприятному клиническому течению ретинобластомы соответствует присутствие в анализируемых образцах трехэамещенного фосфата кальция.Из литературных данных известно, что в природе встречаются два вида трехзамещенного кальция - это витлоктитф-Саз(Р 04)2 и аморфный фосфат кальция Саз(Р 04)2. Оба этих минерала являются метастабильными соединениями даже в обычной среде при РН ( 7,0, 1775669легко гидролиэуются с образованием гидроксилапатита Са 5(Р 04)2 ОН, Обнаруживаются данные минералы в магматических породах, т.е. образованных в жестких условиях (высокая температура, давление), Следовательно существование трехзамещенных фосфатов кальция в тканях опухоли при обычных условиях вызывает сомнение. Очевидно зарегистрированные автором трехзамещенные фосфаты кальция образовались при приготовлении образцов во время озоления проб при 450 - 500 С в атмосфере кислорода воздуха,ИК-спектроскопия является эффективным методом анализа и определения структуры оргаНических соединений и значительно Менее пригоден в случае соединений фос рора, Неорганические фосфаты, как правило, не всегда дают хорошие результаты при И К-спектроскопии,Известен способ прогнозирования клинического течения ретинобластомы путем исследовэния морфологическим методом, взятый нами за прототип, Основными критериями злокачественности являются форма, размер опухоли и склонность к прорастанию в соседние ткани. В случае смешанной формы ретинобластомы, где могут присутствовать как дифференцированные. так и недифференцированные клетки, визуально определить преобладание одних над другими порой бывает трудно, особенно, когда опухоль находится в начальной стадии развития и еще не проросла в близлежащие ткани. Правильно прогнозировать клиническое течение заболевания патогистологу бывает затруднительно,. Целью предполагаемого изобретения является повышение точности клинического прогноза ретинобластомь 1,Поставленная цель достигается путем исследования кристаллической фазы ткани опухоли методом рентгеноструктурного анализа. Методика эксперимента заключается в следующем: свежий нефиксированный опухолевый материал помещается между двумя предметными стеклами, на которые накладывается груз весом 300 гр. Опухолевая ткань равномерно расплющивается и высушивается в термостате до постоянного веса при температуре 37 С. Сухую ткань тщательно растирали в агатовой ступке и в количестве 0,02 г, исследовали на дифрактометре Дропс медным излучением, длина волны равна 1,54051, фильтр никель, площадь исследуемой поверхности - 1,5 см. Межплоскостные расстояния рассчитывали по Формуле Вульфа-брегга. 10 20 25 30 35 40 45 50 55 Исследовались образцы опухолевой ткани ретинабластомы, В результате исследования установлено, что образцы тканей опухоли ретинобластомы содержат минерал фтор-апатит Саб(РО 4)зР, Идентификация данного соединения и сравнение проводились по известным методам. Межплоскостные расстояния б и интенсивности наиболее сильных рефлексов в усл. ед. представлены в табл. 1.Из табл, 1 видно, что наибольшей интенсивностью обладает рефлекс при межплооскостном расстоянии б= 2,798 А, Он был взят в качестве основного критерия оценки содержания фтор-апатита в ткани ретинобластомы. Исследованные образцы опухолевой ткани ретинобластомы смешанного типа,1, И, Ш, И стадий развития. Установлено, что большей степени злокачественности опухоли соответствует большая интенсивность рефлекса при б = 2,798 М фтор-апатита и большая степень совершенства кристаллов минерала (большая информативность рентгенограммы), Установлена корреляция между клеточным составом ретинобластомы, интенсивностью сильного рефлексаофтор-апатита при б = 2,798 А и степень злокачественности. Степень злокачественности поданным авторов, не всегда зависит от стадии развития опухоли. В табл, 2 представлена зависимость различного клеточного состава тканей ретинобластомы смешанного типа от интенсивности рефлекоса фтор-апатита при б = 2,798 А.В тканях ретинобластомы смешанного типа- И стадий развития, содержащих солидные поля и псевдаразетки и истинные розетки, где преобладают солидные поля рефлекс при д = 2,798 А имеет наибольшую интенсивность, а именно 16,25 + 3,7 усл. ед.В опухолевых тканях ретинобластомы смешанного типа, где превалируют псевдоорозетки рефлекс при б = 2,798 А снижается и имеет значение 8,0 + 1,41, В опухолевых тканях ретинобластомы смешанного типа, где превалируют истинные розетки интеносивность рефлекса при д = 2,798 А составляет 4,33 + 0,47 усл. ед.Предлагаемый способ отличается .от прототипа тем, что прогноз заболевания ретинабластомы устанавливается путем исследования высушенных до постоянного веса опухолевых тканей на дифрэктометре Дронс медным излучением, длина волны равна 1,54051, фильтр никель, площадь исследуемой поверхности равна 1,5 см . Межплоскостные расстояния рассчитывались по формуле Вульфа-Брегга.П р и м е р 1. Больной С-в, 1 год 10 месяцев, ист. б-зни 3296 за 1989 г. пр. 5 М 1899-1908. Клинический диагноз: ретинобластома правого глаза, Энуклеация произведена 10 августа 1989 г, Патогисто 2,798 2,769 2,702 13 10 7В состав кристаллической фазы образцавходит фтор-апатит с интенсивностью сильного рефлекса 13 усл, ед, Опухоль оченьзлокачественная, превалируют солидныеполя.П ример 2. Больной К-р,3,5 мес,0, Ист.б-зни М 3156 за 1989 г, пр М 1884-93. Клинический диагноз: ретинобластома левого В состав кристаллической фазы образ-, ца входит фтор-апатит с интенсивностью сильного рефлекса 13 усл, ед, Превалируют солидные поля. Опухоль очень злокачественная, хотя имеет небольшой размер и не проросла в близлежащие ткани.П р и м е р 3, Больная В-ч, 6 л, Ист. б-зни М 2214 эа 1989 г. пр, М 1325-34. Клинический диагноз: ретинобластома 35 В состав кристаллической фазы образца входит фтор-апатит с интенсивностью сильного рефлекса 7 усл. ед, Опухоль злокачественная.П р и м е р 4. Больной К-а, 5 лет, Ист. 45 б-зни 2415 за 1989 г. пр, М 16-65, Клинический диагноз: ретинобластома правого глаоб,А 2,798 2,769 2,702 ,усл,ед 7 6В состав кристаллической фазы образца, входит фтор-апатит с интенсивностью сильного рефлекса 7 усл. ед. Опухоль злокачест венная, хотя имеет небольшой размер и не проросла в близлежащие ткани.П р и м е р 5. Больная Н-а, 7 лет, Ист. б-эни М 1538 за 1989 г. Пр В 947-56. логический диагноз: ретинобластома сетчатки, нед 1 фференцированный тип с инфильтрацией сосудистой оболочки, внутренних слоев склеры и ствола зрительного нерва не достигая линии отсечения, 1 Ч стадия.Результаты рентгеноструктурного анализа. 3,430 3,060 1,920 1,720 7 3 2 0глаза. Энуклеация произведена 4 августа 1989 г. Патогистологический диагноз: ретинобластома сетчатки, недифференцированный тип, с инфильтрацией диска зрительного нерва, не достигая ламина криброза, стадия,Результаты рентгеноструктурного внализа: правого глаза, Энуклеация произведена 2 июня 1989 г. Патогистологический диагноз: ретинобластома сетчатки, недифференцированноготипа с инфильтрацией ствола зрительнО- го нерва с прорастанием за ламина криброза, не достигая линии отсечения.Результаты рентгеноструктурного анализа: 2 430 3 060 1,930 1,720 4 2 1 1эа. Произведена энуклеация 27 июня 1989 г, Патогистологический диагноз: ретинобластома сетчатки, недифференцированного типа, прорастание начальных отделов диска зрительного нерва, 1 стадия.Результаты рентгеноструктурного ана- лиза 2 430 3 060 1 930 1,720 3 2 1 1Клинический диагноз; ретинобластома Вторичная глаукомаЗнукяеация произведена 13 апреля 1989 г.Патогистологический диагноз: ретинобластома сетчатки, смешанного типа (истинные и псевдорозетки) превалируютб, А1,усл.ед только ретийобластоме приводим примеры результатов рентгеноструктурного анализа нормальной трупной сетчатки глаза (снято 10 образцов) и других офтальмопатологий.П р и м е р 6, Нормальная трупная сетчатка глаза В состав кристаллической фазы образца входит фтор-апатит низкой степени совершенства кристаллов с интенсивностью 10 сильного рефлекса 4 усл. ед. Опухоль менее злокачественная,Чтобы доказать, что наличие в исследуемом образце фтор-апатита присуще 3,140 2,820 1,991 1,627 1,410 1,2603 31 12 3 2 3Образец содержит в основном аморф нуюфазу. На рентгенограмме галообразный (диффузный) максимум примежплоскостном расстоянии 4,2267 А с мак, симумом интенсивности 11 усл. ед, Фторапатит отсутствует,П ример 8, Больная К-ва,1 год 2 месИст, б-зни 2972 за 1989 г. Пр. М 1833Клинический диагноз: ретинЬбластомав состоянии спонтанной регрессии правогоглаза,Энуклеация произведена 2 августа 1989 б, А 7,622 6,146 4,037 3,341 3,2601,усл.ед 2 7 7 2 3 В состав кристаллической Фазы образца 20 не входит фтор-апатит.П р и м е р 7, Больной Л-в, 5 лет, Ист. б-зни Ь 682 за 1989 г, Пр М 336.Клинический диагноз: ретинобластома правого глаза. 25Энуклеация произведена 23 февраля 1989 г.Патогистологический диагноз:; зксудативный ретинит Коатса с частичной отслойкой сетчатки. 30Результаты рентгеноструктурногб ана- лиза Патогистологический диагноз: ретинобластома с явлениями спонтанной регрессии.Результаты рентгеноструктурного ана- лиза б, А 7,6220 6,214 6,146 4,2267 3,341 351,усл.ед 3 3 4 11 4 оО,А1,усл.ед 2,712 2,882 ; 3,437 6 44, 1988 г,45Патогистологический диагноз: обшир, ное субретинальное кровоизлияние. Отслойка сетчатки, Катаракта.Результаты рентгеноструктурного ана, лиза.50. На рентгенограмме два галообразныхВ состав кристаллической фазы образца входит минерал подолит, Са 1 оР 04)6 СОз, имеющий следующие межплоскостные раС- стояния и интенсивность сильных линий; согласно (13) М карт 570 д, А 2,811 2,712 3,437 1,993З,усл.ед 10 6 2 1 Следовательно, при спонтанной регрессии ретинобластомы ионы фтора замещаются на карбонат-ионы.П ример 9, Больная Н-о,14 дней, Ист. б-эни В 5024 за 1988 г, Пр, М 2201,Клинический диагноз: ретинобластома И стадии левого глаза,3.060 1,930, 1,720 2 1 110 1775669 Преимущества предлагаемого способа 1. Можно установить прогноз и степень злокачественности ретинобластомы смешанного типа в начальной стадии развития опухоли. 2. Прогноз устанавливается одномоментно. Кристаллический фтор-апатит может определяться методом рентгеноструктурного анализа даже в виде следов,Таблица 1 Межплоскостные расстояния и интенсивность рефлексов минерала фтор-апатиат,Са 5(Р 04)зР. ЬЬ карт. 567 1Степень злокачественности Исследуемые образцы НЧ стадия развития16,251 3,7 очень злокачественная 8+1,41 р 0,05 злокачественная 4,33+0470 05 менее злокачественная Составитель Ж.МустафинаТехред М,Моргентал Корректор Й.Гунько Редактор Заказ 4032 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Гагарина, 101 Ретинобластома, смешанный тип (превалируют солидные поля) и Ретинобластома, смешанный тип (превалируют псевдорозетки) п=6Ретинобластома, смешанный тип (превалируют истинные озетки и= 5 Формула изобретения Способ прогнозирования течения ретинобластомы после знуклеации путем исследования тканей опухоли, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения точностиспособа, высушенную до постоянного веса ткань опухоли исследуют методом рентеноструктурного анализа, определяют процентное содержание апатита в ней. и при 10 егоэначении 4 и менее прогнозируют благоприятное течение, а при значении более 4 - неблагоприятное,