Способ экспресс-диагностики инфекции

Номер патента: 1175440

Авторы: Байжомартов, Семенова, Стеценко, Ярема

ZIP архив

Текст

(51) 4 А ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ еменова и нстии инф ОСУДАРСТВЕННЫИ НОМИТЕТ СССРО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ(54) (57) СПОСОБ ЭКСПРЕСС-ДИАГНОСТИКИ ИНФЕКЦИИ МУСОР 1.АЬМА РХЕ 11- МОМ 1 АЕ путем проведения реакции встречного иммуноэлектрофореза исследуемой сыворотки и специфического антигена с последуюШим определением антител, по наличию которых диагностируют заболевание, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности способа, в качестве антигена используют гликопротеидную фракцию анти- гена Мусор 1 авгпа рпецгпоп 1 ае.1175440 Составитель В. ДроздовТехред И. Верес Корректор В. СиницкаяТираж 722 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж - 35, Раушская наб., д. 4/5Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул, Проектная, 4 Редактор Н. Швыдкая Заказ 5245/4 Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для лабораторной диагностики микоплазменных пневмоний. 5Целью изобретения является повышение чувствительности способа диагностики,Способ осуществляется следующим образом.Сыворотки крови больных острыми пневмониями собирают в острый период заболевания. Реакцию ВИЭФ ставят на гель-электрофоретическом приборе фирмы Реанал, модель 73. Готовят 1%-ный агаровой гель фирмы Дифко на мединал-ацетатном буфере (рН 8,6), В агаре вырезают 2 ряда лунок. В ряд лунок, расположенных к аноду, вносят по одной капле испытуемой сыворотки больного, взятой в различных двукратных разведениях (от 1:2 до 1:64), Лунки находящиеся около катода, заполняют гликопротеидной фракцией антигена М. рпецгпо п 1 ае, которую получают путем химической экстракции антигена ледяной уксусной кислоты и этанолом.Процедура получения гликопротеидной фракции заключается в следующем. Подвергнутый ультразвуковой дезинтеграции концентрированный антиген М. рпецгпоп 1 ае обрабатывают ледяной уксусной кислотой до получения рН среды 6,0. Выпавший осадок огделяют центрифугированием и в надосадочную жидкость снова добавляют ледя ную уксусную кислоту до рН среды 5,0. Через 15 - 20 мин сформировавшийся осадок собирают путем центрифугирования при 18000 об/мин в течение 30 мин. Полученный осадок растворяют в небольшом объеме физиологического буферного раствора (рН 7,2) и подвергают диализу в течение 3 дней в проточной и дистиллированной воде на холоду. Таким образом, приготовлена гликопротеидная фракция 1 антигена М. рпешпоп 1 ае. Надосадочную жидкость, полученную после экстракции гликопротеидной фракции 1, обрабатывают 6-кратным объемом эталона на холоду (+4 С) и через 12 - 18 ч образовавшийся осадок отделяют путем центрифугирования. Осадок подвергают диализу как описано, и полученный материал представляет собой гликопротеидную фракцию 2 антигена М, рпецгпоп 1 ае. Полученные таким образом гликопротеидные фракции используют в реакции ВИЭФ в концентрации 120 - 200 мкг/мл углеводов и 70 - 120 мкг/мл белка.В качестве положительного контроля реакции ВИЭФ используют лунки, содержащие гликопротеидную фракцию антигена и гипериммунную сыворотку и М. рпецгпоп 1 ае, В качестве отрицательного контроля используют 2 пары лунок, содержащих гликопротеидную фракцию антигена и нормальную кроличью сыворотку, а также в качестве контроля прототипа - нативный антиген и сыворотку больного. Нативный антиген М. рпецгпоп 1 ае представляет собой концентрированную и обработанную ультразвуком культуру возбудителя с содержанием белка 400 - 500 мкг/мл.Реакция протекает при силе тока 40 гпА, напряжении 206 В в течение 1 ч. О положительном результате реакции судят по наличию линии преципитации между лунками,

Смотреть

Заявка

3587823, 04.05.1983

НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ЭПИДЕМИОЛОГИИ, МИКРОБИОЛОГИИ И ИНФЕКЦИОННЫХ БОЛЕЗНЕЙ

БАЙЖОМАРТОВ МЕЛС СЕРИКБАЕВИЧ, СЕМЕНОВА ВАЛЕНТИНА АНТОНОВНА, СТЕЦЕНКО ОЛЬГА ГЕОРГИЕВНА, ЯРЕМА ГАЛИНА ВЛАДИМИРОВНА

МПК / Метки

МПК: A61B 10/00, G01N 33/53

Метки: инфекции, экспресс-диагностики

Опубликовано: 30.08.1985

Код ссылки

<a href="https://patents.su/2-1175440-sposob-ehkspress-diagnostiki-infekcii.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ экспресс-диагностики инфекции</a>

Похожие патенты