Способ определения антигена в биологических жидкостях

(54) СПОСОБ ОПР БИОЛОГИЧЕСКИХ (57) Изобретен не и, в частно диагностике, Ц шение чувствит ЕДЕЛЕНИЯ АНТИГЕНАЖИДКОСТЯХ е относится ти, к серол ль изобрете к меци гическойия - повыюсти инд Для индик их жидном стектях смешив а предме ле однужидкости нтиге ыворотодну иной прогреин, Че- ьтаты спец ииче аплю о рашеннои ин тафилококка 1 ОО С в теч ин регистри аг глю тина ци ктив иров Кован 1,взвеси стой прирез 1 О мреакции ение 2-3 руют резу и. 1 табл Иэобретатност 20-25 млрд. концт в течение 4 ме рациисрок тся к медицине,ической диаг -ение отпос к сероло г 1 пе. 1 ель иэ р.тения повышение чувии аитигена ит следующим обТВ ительности и.) ик ацскорение способа,Споссб осуществляю ста. в ра 5 -посГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТРО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТИРЫТИЛМПРИ Г 1(НТ СССР НИЕ ИЗОБР(56) Никитин В,Н, и др,Новые ускоренные методы индикации патогенньгх микробов. Кишинев, 1984, с72-80.Перадэе Т,В Халонен П, Иммунологическая диагностика вирусных инФс.кций 1 1985, с, 144-152,раом),Делаю. как обычно смыв клетоЬилококка Кованпосле его ростечение 24 ч на косяках (5-10 кс питательной средой) 0,853-ньгчствором ЛаСХ. Затем прогревает15 мин в кипящей вогяной бане исят краситель Конго-рот до 0,11,0/-чой концентрации на 1-2 минле его взвесь стафилококка 2-3зэ о)мывают 0,853-ныл) раст.:.ором тигена и ускорение спосокации антигена в биологич каплю исследуемои на или экстракта и одну еской антимикробной с ез 2-15 мин добавляют доводят до енти использую снаблюдения 1.Для индикации антигена используют экстракт фекалий, приготовленный : М обычным способом, Смешивают на пред-,АР метном стекле одну каплю исследуемо- Щ го на антиген экстракта, одну каплю ,Я) антимикробной сыворотки, и добавляют Я) через 2-15 мин одну каплю окрашенной инактивированной взвеси стафилококка, Через 3-10 мин отмечают наличие агглютинации клеток стафилококка, Используют антимикробные сыворотки коммерческие и сооственного приготовления и в разведении 1:10 - 1;200.П р и м е р, При обследованиибольных острыми кишечными инфекциями1530988 Таким образом, чувствительность индикации по предлагаемому способу выше, чем по известному, в 2-6 раз при ускорении исследованияСпособ Средняя арифметическая минимальной выявляемой дозы антигена, мкг/мл, специфичности индик ации Зонне 026 086 ИзвестныйПредлагаемый 0,04 + 0,004 0,01 + 0,002 Ов 06 + Оэ 005 0,01 + 0,002 0,08+ 0,005 0,04+ 0,005 0,03+ 0,004 0,01+ 0,002 Составитель И,БашкаевТехред М.Дидык Редактор А,Коэориз Корректор М,Шароши Заказ 7947/45 Тираж 789 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,101,проведен поиск антигенов шигелл и эшерихий в Фекалиях по известному и предлагаемому способом, По известному способу формалинизированную взвесь стафилококка нагружали сыворотками Зонне, эшерихиоэными 026, 055, 086, трюкды отмывали, ресуспендировали и вносили в лунки планшет в равных объемах с раститрованным экстрактом исследуемых Фекалий.По предлагаемому способу делали смыв стафилококка Кован 1 с пяти косяков с мясопептонным, агаром после 24 ч роста.при 37 С 0,853-ным раствором ИаС 3., инактивировали в кипящей водяной бане в течение 5 мин, доводили по стандарту мутности до 20 млрд. концентрации, вносили Конго-рот до концентрации 0,57., выдерживали 2 мин 2 О и дважды отмывали 0,857 раствором ЮаСХ, ресуспендировали до 20 млрд.На предметное стекло наносили одну каплю экстракта исследуемых фекалий, добавляли одну каплю антимикроб ной сыворотки Зонне в разведении 1:150, эшерихиозные в разведении 1:10), выдерживали 2 мин и вносили одну каплю окрашенного инактивированного стафилококка, Через 6 мин наблю" дали агглютинацию (укрупнение частиц) стафилококка. Чувствительность индикации иллюстрируется таблицей,Формула изобретенияСпособ определения антигена в биологических жидкостях путем реакции агглютинации с применением специфической антисыворотки и суспензии стафилококка Сооп 1, о т л и ч а ю - щ и й с я тем, что, с целью повышения чувствительности и ускорения способа, в изучаемый материал добавляют равный объем антисыворотки и через 2-15 мин вносят взвесь интактных клеток стафилококка Соуп 1, прогрео тую в течение 2-3 мин при 100 С и окрашенную 0,1 Х-ным раствором Конгорот и через 10 мин регистрируют результаты реакции агглютинации.