Способ получения сапогенинов

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 1156 9) К 35 78 ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ ЪГ СВИДЕТЕЛЬСТВ Н АВТОРС М 1Н. ИФ Даниляин им. Н. Г. Холодногоследовательский инстений ьство СССР 5/78, 1976.ЛУЧЕНИЯ САПО- льчения корневищ обработки водными ОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР О ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТ(71) Институт ботаникии Всесоюзный научно-исститут лекарственных р(54) (57) СПОСОБ ПОГЕНИНОВ путем измдиоскореи дел ьтовидной растворами ферментных препаратов, инактивации ферментных препаратов, кислотного гидрол иза, нейтрал изации, высушива ния гидролизатов с последующим экстрагированием петролейным эфиром и отгонкой растворителя, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода и чистоты целевого продукта, сырье обрабатывают раствором ферментного препарата пентоаваморина П 10 Х из Азрегр 1 цз ачагпог 1 или раствором ферментного препарата, полученного спирто- осаждением из культурал ьной жидкости высшего базидиального гриба Сог 1 о 1 цз )нгзШцз, при концентрации ферментных препаратов 0,9 - 1, мас. о в течение 3 - 24 ч при соотношении твердой и жидкой фаз 1:10.156695 выход диосгенина, Наличие дианов7 Способ обработки 140,2 151,О йзр. Аяавогг С.ьггзогиз Контроль: Без ферментативнойобработки 1 по предлагаемому способу 1 ОО,О 136,5 По известному способу П р и м е ч а н и е: + 0,3-0,57,До 17Более 27, О отсутствие. Составитель Н. Гуляева Техред И. Верес Корректор Е. Рошко Тираж 722 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж - 35, Раушская наб., д. 4/5 Филиал ППП Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4Редактор Л. ЗайцеваЗаказ 3218/5 Изобретение относится к медицинской промышленности и может быть использовано для получения лекарственных веществ из растительного сырья.Целью изобретения является повышение выхода и чистоты целевого продукта.Пример 1. Сырье - измельченные корневища диоскореи дельтовидной (навеска 1 г, диаметр частиц 2 мм) заливали 10 мл ферментного препарата пектоаваморина П 10 Х из Азрегр 11 цз аиагпог 1. Дозировка препарата 1 мас. Я на абсолютно сухое вещество, рН раствора около 5,0. Инкубацию проводили 13,5 ч, при 40 С в термостате, Инактивацию ферментов и последующий кислотный гидролиз проводили с обратным холодильником при добавлении к раствору 2 мл концентрированной соляной кислоты в течение 2-х ч при 115 С на глицериновой бане. Гидрол изаты корневищ отфильтровывали через бумажный фильтр, осадок на фильтре, содержащий сапогенины (диосгенин), 20 промывали водой (25 мл), 5 Я-ным раствором аммиака (20 мл), снова водой (10 мл) и сушили при 60 С в течение 10 - 12 ч. Диосгенин извлекали из осадка петролейным эфиром (фракция 40 - 70 С) в аппарате Сокслета в течение 24 ч, Экстракты сгущали досуха, остаток диосгенина количественно растворяли спиртом в определенном объеме. Содержание диосгенина определяли на фотоэлектроколориметре при 530 нм.Выходсапогенинов (диосгенина) с применением пектоаваморина П 10 х составлял 4,35 мас. О 7 на абсолютно сухое вещество при ферментации в течение 13,5 ч. При тонкослойной хроматографии целевого продукта в опытном варианте не выявлено побочных продуктов в сравнении с известным способом и вариантом без ферментативной обработки сырья.Пример 2, То же, что в примере 1, но инкубацию сырья проводили ферментным препаратом, полученным из гриба Сого 1 цз Ыгзц 1 цз, выращенного глубинным способом в течение20 ч. Ферменты осаждали спиртом из культурального фильтрата с последующей лиофилизацией. Дозировка препарата 1 мас. Я на абсолютно сухое вещество, рН раствора около 5,0. Инкубацию проводили 13,5 ч при 40 С в термостате. Инактивацию ферментов и последующий кислотный гидролиз проводили с обратным холодильником при добавлении к раствору 2 мл концентрированной соляной кислоты, в течение 2-х ч при 115 С на глицериновой бане. Гидролизаты корневищ отфильтровывали через бумажный фильтр, осадок на фильтре, содержащий аногенины (диосгенин), промывали водой (25 мл), 5 Я-ным водным раствором аммиака (20 мл), снова водой (10 мл) и сушили при 60 С в течение 10 - 12 ч. Диосгенин извлекали из осадка петролейным эфиром (фракция 40 - 70 С) в аппарате Сокслета в течение 24 ч.Экстракты сгущали досуха, остаток диосгенина количественно растворяли спиртом в определенном объеме. Содержание диосгенина определяли на фотоэлектроколориметре при 530 нм.Выход сапогенинов (диосгенина) с применением ферментного препарата из Сог 1 опз Ь 1 гзп 1 цз составлял 4,72 мас.оА, на абсолютно сухое вещество при ферментации 13,5 ч. При тонкослойной хроматографии целевого продукта в опытном варианте не выявлено побочных продуктов в сравнении с известным способом и вариантом без ферментативной обработки сырья.Влияние ферментативной обработки корневищ диоскореи на выход диосгенина приведено в таблице.Как видно из данных, представленных в таблице, предлагаемый способ позволяет повысить выход и чистоту . целевого продукта.