C12Q 1/40 — амилазу
Способ определения активности цитолитических ферментов
Номер патента: 150808
Опубликовано: 01.01.1962
Автор: Салманова
МПК: C12Q 1/40
Метки: активности, ферментов, цитолитических
...Затем в смесь вносят вытяжку из грибной культуры, полученную настаиванием ее с 2 ч, дистиллированной воды в течение 5 час при температуре 20, доводят объем реакционной смеси до 25 мл, колбу закрывают резиновой пробкой и выдерживают в течение 2 час при температуре 40. По окончании цитолиза действие фермента прекращают 20-минутным кипячением на водяной бане. Затем содержимое колбы фильтруют через бумажный фильтр и в фильтрате определяют количество редуцирующих веществ по Бертрану.Так как сам субстрат не содержит редуцирующих веществ, а гемицеллюлозы с растворами Фелинга при определении редуцирующих веществ по Бертрану дают гели, затрудняющие этоопределение, то контроль с инактивированной грибной вытяжкой не ставится, а из общего количества...
Способ количественного определения активности сс-амилазы в биологических жидкостях
Номер патента: 396036
Опубликовано: 01.01.1973
Авторы: Иностранцы, Рональд
МПК: C12Q 1/40
Метки: активности, биологических, жидкостях, количественного, сс-амилазы
...Корректор Л, Царькова Редактор О. Кузнецова Заказ 12524/13 Изд,975 Тираж 755 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий Москва, Ж, Раушская нао., д. 4/5Малоярославецкая городская типография Калужского областного управления издательств, полиграфии п книжной торговлиИзготовление красильного крахмального комплекса.А. 10 г Цибакропа блестяще-синего ЕЗУСА в 1 л воды прибавляют к суспензии 100 г амилозы в 1 л воды при 50 С и при 5 пе 1 ремешивании. Потом медленно и при перемешивании вводят втечение 30 мин 200 г безводного сульфата натрия, затем 150 лсл 10%- ного раствора тринатрийфосфата. Для прохождения реакции реакционную смесь пере мешивают 75 мин при 50 С.Полученную суспензию...
Способ идентификации ингибиторов l-амилаз
Номер патента: 969720
Опубликовано: 30.10.1982
Автор: Конарев
МПК: C12Q 1/40
Метки: l-амилаз, идентификации, ингибиторов
...0,05 мл; раствор рибофлавин 5 мл (4 мг/100 мл) (добавляютнепосредственно перед полимеризацией) .Смесь доводят до .100 мл трис-глицино-вым буферои рН 8,3, содержащим 0,1 К,крахмала. В раствор добавляют Ы-амилазу из кишечника клопа в концентрации,20 адостаточной для разрушения всего крахмала в геле за 60 мин в буфере с рН 5,4 и при 37 ОС. Эту концентрацию подбирают предварительно обычными мето-дами в пробирках. Гель полимеризуют на свету в течение 30 мин, В качестве электродного используют тот же буфер, что и в геле. Исследуемый раствор белка наносят в лунки для образцов. При размере лунки 81 к 2 мм наносят 15 мкл экстракта, Электрофррез ведут с охлаждением при 10 ОС в течение 60 мин при силе тока 25 мА и напряжении 700 В, После...
Способ идентификации ингибиторов -амилаз
Номер патента: 1175967
Опубликовано: 30.08.1985
Автор: Конарев
МПК: C12Q 1/40
Метки: амилаз, идентификации, ингибиторов
...4,-амилаэы мучного хрущака. О1 О мг муки пшеницы или другого знака заливают 0,2 мл 2 М мочевины и оставляют на 18 ч при 4 С. Экстракцию проводят в лунках пластмассовой кассеты, предназначенной для 60 об разцов, Кассету помещают в термостат на 20 мин при 80 С, Раствор белкаонаносят на пластину разделяющего тела при помощи полосок фильтровальной бумаги 5 3 мм, впитавших по 3 мкл 2 О экстракта, На одной пластине разделяющего геля анализируют одновременно 40 образцов. Гель содержит 5,87, акриламида, 0,253 метиленбисакриламида, 17 амфолин (ц 1 КВ") рН 5-8 и 2 М 25 мочевину, Для приготовления геля размером 240 120 1 мм к 30 мл дегазированного раствора добавляют 30 мкл ТЕМЕДа и 1,5 мл раствора рибофлавина (4 мг на 100 мл), Разделяющий...
Способ определения -амилазы
Номер патента: 1212332
Опубликовано: 15.02.1986
Авторы: Александер, Аугуст, Вольфганг, Герхард, Гюнтер, Йоахим, Ойген, Ульрих, Ульферт, Элли
МПК: C12Q 1/40, G01N 33/48
Метки: амилазы
...применяемого энзима. Предпочитаются фосфат, НЕРЕЯ (Н-гидроксиэтил)-пиперазин- -Х-этансульфоновая кислота) и глицилглицин, предпочтительны концентрации 10-200 ммоль/л.сь-Глюкозидазу применяют в количествах от О, 1 до 5000 Имл. Преимущество способа состоит в возможности применять сравнительно большие копио -амилазаМальтогептоза + Н 20 чества этого энзима так что 0 -амилазное расщепление является стадией,определяющей скорость.Соединение формулы (1) берут вколичествах от О, 1 до 250 ммоль/л,предпочтительно 0,5-100 ммоль/л,Насыщение субстрата Ы -амилазымальтогептозой происходит при концентрации от 8 до 10 ммольз Поэтомуцелесообразнее применять минимальнуюконцентрацию мальтогептозы (8 ммоль).Кроме того, целесообразно добавлять...
Способ идентификации лектинов
Номер патента: 1571070
Опубликовано: 15.06.1990
Автор: Конарев
МПК: A01H 1/04, C12Q 1/40, G01N 33/00 ...
Метки: идентификации, лектинов
...для удаления капель влаги. После ИЭФ на разделяющий гель накладывают гель-реплику на 10-30 мин. Затем реплику погружают в суспензию (1-4 по объему) эритроцитов кролика. Через 5-20 мин на поверхности гель-реплики появляются четкие ярко-красные полосы, образованные эритроцитами, связанными с лектинами,На разделяющий гель после реплики накладывают фотопленку на 20 мин и проявляют ее трипсином для идентификации компонентов ингибиторов трипсина. Изоточки лектинов и ингибиторов трипсина из зародышей пшеницы несколько отличаются,Таким образом, предлагаемый способ в отличие от прототипа позволяет идентифицировать в спектре белков компоненты лектинов и наличие примесей белков с иной специфичностью не влияет на результаты,П р и м е р 2....
Способ определения токсичности зернопродуктов и комбикормов
Номер патента: 1641888
Опубликовано: 15.04.1991
Авторы: Артюхов, Воробьева, Ковалева, Кокин, Селеменов, Чикин
МПК: C12Q 1/40
Метки: зернопродуктов, комбикормов, токсичности
...корма, инкубирают смесь в термостате. при 42 С в течение 15 мин. Через 15 мин отбирают 1 см гидролизата 55 и кипятят 10 мин, затем охлаждают до комнатной температуры, вносят 3 смз раствора С согласно действующей методике, перемешивают, оставляют на 45 мин при комнатной температуре и в дальнейшем определение проводят согласно пейстячощему глюкозооксидазному методу,Для определения чувствительностии достоверности значения нижнегопредела снижения активности глюконигрина Г 20 х проведена метрологическаяоценка полученных данных, Снижениеактивности тест-объекта - глюконигрина Г 20 х достоверно устанавливается при концентрации глюконигрина от-8от 3,0 10 М, при этом отсчет определения токсичности производится с 207.потери активности...
Способ идентификации ингибиторов гидролаз
Номер патента: 1648979
Опубликовано: 15.05.1991
Авторы: Вилкова, Конарев, Фомичева
МПК: C12Q 1/40
Метки: гидролаз, идентификации, ингибиторов
...и размолотых зеренпшеницы, Экстракт прогревают 5 мин при71 С для инактивации а - амилаэ.Полимеризуют два 6";ь ПААГ, содержащих 2амфолин, рН 5 - 8, для фракционирования ингибиторов и 2 сервалитов, рН3-10, для а -амилаз. Гель для а -амилазполимеризуют на подложке.Ингибиторы (200 мкг/мл) наносят с помощью бумажной полоски 5 х 80 мм, которуюнакладывают на гель в 20 мм от анода параллельно электродным полоскам,Раствор а -амилазы разбавляют в 5 раэи наносят полоской 10 х 80 мм в 50 мм отанода. После изофокусирования часть геляна подложке со спектром а- амилаз выреВбугорегйа Ооаиса Г, с 4-кратным объемом 0,1-ного СаС 2.Полимеризуют два 6 ПААГ, толщиной 0,2 мм, содержащие 2 амфолин, рН 5-8 для ингибиторов, и 2 ь сервалитов, рН 3-7 для а...