Способ оценки жизнеспособности почечных трансплантатов

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕВЕДОМСТВО СССР(ГОСПАТЕНТ СССР) САНИЕ ИЗОБР КОМУ СВИДЕТЕЛЪСТВУ(56) Раппорпорт Ф. и Доссеорганов и тканей у человека, М1973, с. 133-194 Изобретение относится к области медицины, а именно хирургической нефрологии,трансплантологии, может помочь в разработке клинических, теоретических, экспериментальнь 1 х вопросов пересадки почек,имеющих существенное значение и для развития проблемы трансплантации органов вцелом,При использовании в качестве аллотрансплантатов почек, изъятых у трупов после констатации биологической смерти,приходится пересаживать органы, функциональное состояние которых практически неизвестно, Поэтому подбор пар донор -реципиент. наряду с тканевым типированием, должен включать и методы для определения функционального прогноза ивыживаемости трупной почки.Известны способы определения состояния почечногс аллотрансплантата путем измерения ак"иенс-:ти в моче реципиенталактатдегидрогеназы. особенно 4,5 анаэробных ее фракций. щелочной фосфатазы,глутамилтрансферазы, Однако заметное(54) СПОСОБ ОЦЕНКИ ЖИЗНЕСПОСОБНОСТИ ПОЧЕЧНЫХ ТРАНСПЛАНТАТОВ (57) Использование: в медицине, в трансплантологии. Цель - повышение точности способа. Сущность изобретения: определяют содержание миоглобина в биоптате донорских почек и при значениях показателя 8-40 нг/мг белка ткани биоптата трансплантат оценивают как жизнеспособный. Положительный эффект: использование изобретения позволит почти в 1,5 раза точнее оценить жизнеспособность почечного трансплантата. увеличение содержания укаэанных фермен тов в моче связано с реакцией отторжени пересаженной почки и может быть испол зовано лишь как косвенное показание к уд лению трансплантата. Для подбора па донор - реципиент указанные методы н пригодны, При кризах отторжения диагно стическую ценность их значительн снижает прирост активности указанны ферментов в связи с инфекцией мочевыво дящих путей, паренхзиматозной формо печеночной недостаточности, внутрипеч ночным холестазом, циррозом печени т.д. Чувствительность методов недостаточ на для обнаружения раннего криза отторже ния. При поздних кризах использование и часто оказывается невозможным из-за вь раженной олигурии и анурии.Близкий по технической сущности ана лог предполагает выявление размеров и ло кализации участков ишемии в ткан донорской почки путем определения редук ции тетразолия в биопсироеанных кусочка при взаимодействии его с системой внутри;лточых дегидро еназ, Возможность применения его для прогноза выживаемости трупной гочки показана в эксперименте на собаках. Однако результативность указанного диагностического теста была отмечена лишь в случаях с довольно длительным перОдом ишемии, когда реальной становилась угроза оазвития необратимых изменений коркового слоя и канальцев аллотрансплантата, Основной недостаток ме.Ода обусловлен исключительной вариабельностью оклслительных ферментов оранов и тканей, даже среди одних и 1 ех .",е типов клеток, Поэтому использован, е реакцлй взаимодействия их с акцептора:1 водорода татразолий) для оценки фу 1 кциональной активности л хлзнеспособности .-рудных почек несовершенно,э о достоверно и имеет большие ограничу -иЗа прототип выбра метод, основанный а Гистологическом исследоваии пересажеых почек после производимой с помощью пункционной иглы "слепой" биопсии Материал фиксируется 10, нейтрал ьым ,ормалином и красится гема-Оксилин-зозиом, У больных с после операционной аурией этот метод позволяе-, отдиффсренцировать криз отторжения от острого некоозэ канальцев, Однако наличие таких: рубых морфологических изменений есогес-лмо с жизнеспособностью транспла 1 аа, Ранние цитогОГические сдвлГи моГУ 1 Ораяать БазличнуО клеГОчнуО актив -Ость, Более ТОГО их нужно,гфференьировать с повреждениями клеток во время фиксации и окраски, Друой существенньй недостаток метода заключается в том, ло результаты однократного гистологического исследования биопсийного материала по;ек очень трудно интерпретировать, поскольку в отмытом от крови перфузионным способом трансплантаге можно видеть отдельные патологлческие признаки, характернье для классической картины раннего отторжеия: нтерстициальный отек, проявления острого васкулита и т,д, Трудкти ин герпретации обусловлены также тем. что широкий спектр обнаружлваемых морфоло- Глчески изменений распространяется на отделы коркового и мозгового слоя неодинаково, отсутствует четкая корреляция между фиброзом и сморщиванием клубочков, с одной стороны, и степенью инфильтрации лимфоиднымл клетками лли острым васкулитом, с другой стороны. Нередко обширные сосудистые повреждения не выявляются при обычном гистологическом исследованли. Все это снижает клиничеСкуО цЕННОСТь МЕтода,ЕЗУЛЬТаТЫ ЕГО НЕ 10 15 20 25 30 35 40 могут с достоверностью использоваться как критерий функциональной активности и жлзнеспособности органа до пересадки, поскольку морфологические признаки нарушений, обусловленных тепловой ишемией почек во время агонии донора, забора и отмывания трансплантата, развиваются постепенно и могут быть обнаружены лишь в послеоперационном периоде,Целью изобретения является более обьективная, точная и количественная оценка функциональной полноценности трупных почек при подборе пар донор-реципиент для улучшения ближайших и отдаленных клинических результатов трансплантации,Укаэанная цель достигается тем, что в предлагаемом способе жизнеспособность донорской почки оценивается по рецепторной чувствительности нефронов к миоглобину. Сродство почечных рецепторов к данному белку обусловлено близостью свойств его полипептидной цепи с альбумином, контактностью молекул миоглобина и относительной устойчивостью их к изменениям рН и ионной силы первичной мочиУ поврежденных клеток очень быстро падает рецепторная активность. Поэтому низкое содержание в ткани донорских почек миоглобина является ранним и чувствительным признаком их функционально-структурной недостаточности Уменьшение рецепторной чувствительности трансплантата нарушает нейро-гуморальнуО коррекцию патологических изменений в пересаженном органе, В случае полной утраты рецепторных свойств поврежденный рансплантат выпадает иэ поля регуляторой деятельности медиаторов и системных функций организма.Выбор лиганда для исследования рецепторной чувствительности и жизнеспособности донорских почек был обусловег существованием высокоспецифических и очень точных методов определения содержания миоглобина в микроколичествах ткани, которые можно получить пункционной и.лой при открытой или "слепой" биопсии. Один из используемых нами микрометодов выголнялся с помощью радиоиммунных наборов фирмы "Боги" Франция, В ряде случаев для выявления миоглобина мы применяли иммуноглобулиновый эритроцитарный сухой диагностикум (производство Горьковского НИИ эпидемлологии и микробиояОгии), Полученные результаты оказались полностью сопоставимы.Отличительными признаками. которые характеризуют новизну предлагаемого сцо соба являОтся Определение рецепторной чувствительности нефрона по содержаио51015 25 30 35 40 45 50 55 миоглобина в биоптатах отмытых от крови трупных почек дает непосредственное представление о функциональной способности морфологической интактности и жизнеспособности трансплантата; нарушение рецепторной чувствительности равномерно распространяется на корковый и мозговой слой; благодаря высокой специфичности и чувствительности микрометодов определения миоглобина предлагаемый способ обеспечивает точную количественную оценку функциональной и морфологической полноценности трупных почек до их пересадки,Способ технически прост, выполняется быстро, что позволяет сократить срок консервации органов, подготавливаемых к трансплантации,Способ обеспечивает дифференциацию самых ранних стадий функциональной дестабилизации нефроцитов вследствие уменьшения их рецепторной чувствительности к миоглобину при тепловой ишемии или отложения больших количеств миоглобина на капиллярных петлях клубочков, в дистальных канальцах, собирательных трубках при миоренальном синдроме у агонирующих больных("шоковая почка"), которые предшествуют гипоксическим дегенеративно-деструктивным повреждениям нефрона или развитию тубулярного некроза мионефрометаболического происхождения,В отличие от довольно однотипных гистологических описаний препаратов отмытых от крови трупных почек (расширение полости капсул Шумлянского и просветов извитых канальцев; набухание, вакуолизация, зернистость, слущивание эпителия извитых канальцев; очаговый склероз и гиолинизация клубочков; паренхиматозная дистрофия эпителия извитых канальцев с очагами некробиоза и т.д,), которые более чем в 50;( случаев не позволяют однозначно решить вопрос о пригодности аллотрансплантата к пересадке, предлагаемый нами очень чувствительный миоглобиновый тест дает точную количественную оценку степени повреждения нефроцитов и позволяет в каждом случае определить жизнеспособность, функциональную активность трупных почек и риск развития почечной недостаточности в послеоперационном периоде, Совокупность отличительных признаков обеспечивает высокую достоверность предлагаемого способа в плане прогнозирования жизнеспособности и функциональной активности трансплантата при подборе пардонор-реципиент,Предлагаемый способ осуществляется следующим образомЗабор донорских почек производится по приказу Минздрава СССР М 1129 от 21.12.77 г, после констатации биологической смерти. Изъятые почки перфузируют холодным (+ 2-4" С) консервирующим раствором Евро-Коллинз для отмывания сосудистого русла от крови и заполнения его консервантом, Продолжительность первичной ишемии от момента нефрозктомии до помещения трансплантата в стерильную, заполненную физиологическим раствором и охлаждаемую снаружи колотым льдом камеру контейнера колеблется в пределах 15-20 минут. При оценке жизнеспособности трупных почек учитываются анализы крови (ионограмма, креатинин, небелковый азот) донора. Однако выявить таким образом почечную недостаточность, обусловленную травмой, гипоксемией и другими повреждающими факторами агонального периода, можно лишь в случае, если донор наблюдается в реанимационном отделении несколько суток. При тяжелой черепно-мозговой травме биологическая смерть наступает раньше, чем успевают развиться статистически значимые последствия нарушений фильтрационно-реабсорбционной функции почек, Существенное влияние на трансплантат оказывает и тепловая ишемия в период подготовки его в пересадке. Для точной количественной оценки жизнеспособности и функциональной активности отмытой консервирующим раствором трупной почки ткань ее, полученную путем "открытой" пункциональной биопсии, тщательно гомогенизируют с 0,2-0,25 мл дистиллированной воды в гомогенизаторе типа Поттера соответствующего объема. Гомогенат отстаивают в течение 15 минут в холодильнике (+4 С). Надосадочную жидкость (0,05-0,1 мл) используют для выявления миоглобина с помощью иммуноглобулинового эритроцитарного диагностикума (инструкция Горьковского НИИ эпидемиологии и микробиологии) или радиоиммунных наборов фирмы "Яоги", Франция (инструкция к набору). Содержание миоглобина рассчитывается в нанограммах (нг) на 1 мг белка гомогената. Концентрация белка определяется спектрофотометрически по разностному поглощению при двух длинах волн Е 224-Е 233,3 (8) в 0,002 мл гомогената разведенных в 10 мл дистиллиров. воды,Можно исследовать парный орган, который не подлежит пересадке (рассыпной тип почечной артерии, повреждение мочеточника, отсутствие подходящего реципиента). В этих случаях миоглобин определяют в 10,(гомогенатах, приготовленных иэ кусочков коркового или мозгового вещества предварительно отмытой консервирующим раствором трупной почки (вес ткани в граммах, обьем дистиллированной воды в мл. 1;10), Содержание его также рассчитывают в нг, на 1 мг белка.В трансплантатах с удовлетворительной функцией в послеоперационом периоде (близкие к нормальным показатели диуреза, состава мочи, сывороточного креатинина, калия, фосфора, отсутствие гипертенэии и т,д,) содержанле миоглобина при подборе пар донор-реципиент колебалось в пределах от 8 до 40 нг/мг белка, составляя в среднем 17,б +0,9 нг/мг белка, В биоп татах трупных почек, пересадка которых сопровождалась ранними нарушениями обьема гломерулярной фильтрации (олигурия, увеличение уровня сь 1 вороточного креатинина, калия, фосфора, падение концентрации натрия в моче нике 10 мэкв/л) или функции канальцев (канальцевый тип мочи с содержанием натрия более 80 мэкв/л), а также стойким повышением артериального давления, содержание миоглобина не превышало 4 .г/мг белка, Средний уровень его соответствовал 1,54+ 0,27 нг/мг белка при колебаниях в пределах от 4 до 0,17 нг/мг белка,Б гомогенатах почек, удаленных после имплантации вследствие тромбоза сосудов, резко выраженной реакции отторжения или разрыва трансплантата миоглобин практически отсутствовал,Трупные почки с высоким уровнем миоглобина (78-126 н г/мг бел ка), т.е. в среднем 99,8+ 4,6 нг/мг белка) с трудом отмываются ат крови перфузией консервирующим раствором (блок оттока), По-видимому, очень быстрый прирост концентрации мышечного белка в крови донора (кардиогенный шок, остановка сердца, неадекватная искусственная вентиляция легких, обширное повреждение мышечной ткани, длительное судорожное состояние) сопровождается усиленной адсорбцией миоглобина на клубочках, а также в канальцах, чему способствует резко кислая реакция мочи (миоренальный синдром, мионефрометаболический синдром) с быстрым развитием дегенеративно-деструктивных и функциональных нарушений нефрона ("шоковая" почка). Острую почечную недостаточность, в механизме развития которой значительная роль отводилась миоглобину, наблюдали и при восстановлении проходимости магистральных артерий после острой ишемии (1,2,3,4),5 10 15 20 25 30 35 40 50 55 Таким образом, не только низкое (4 нг/мг белка), но и высокое (78 нг/мг белка) содержание миоглобина в биоптатах трупных почек является прямым ограничением к проведению операции, Жизнеспособными считаем трансплантаты с уровнем миоглобина 8-40 нг/мг белка.Вопрос о возможности пересадок трупных почек, содержащих мышечный белок в количестве 48 и 4080 нг/мг белка, решается индивидуально в зависимости от степени соответствия антигенов донора и реципиента, а также адекватности перфузии при отмывании почки консервирующим раствором, Необходимо отметить, что такие трансплантаты мы наблюдали очень редко, Возможно это связано с определенным количеством соответствующих рецепторов в нефроне, пороговым характером блокады их в условиях циркуляторной гипоксии (тепловой ишемии) и особенностями образования иммунных комплексов или дериватов миоглобина, откладывающихся на капиллярных петлях клубочков, в дистальных канальцах и собирательных трубках при развитии миоренального синдрома у доноров, Пороговый характер блокады рецепторов трупных почек может обьясняться высоким сродством миоглобина к кислороду (1) и способностью аккумулировать последний в клетке, Лишь нарастающая выше определенного предела кислородная задолженность при гипоксемии, тепловой ишемии является пусковым механизмом повреждения рецепторной чувствительности большинства нефронов,П р и м е р 1, Неизвестный, около 45 лет, история болезни М 458, поступил в реанимационное отделение 2-ой городской больницы г. Алма-Аты по поводу тяжелой черепно-мозговой травмы и острой перидуральной гематомы. Искусственная вентиляция легких из-за периодически выраженных дыхательных расстройств проводилась 4 часа. Время гипотензии (АД/40 мм рт.ст,) - 60 мин. Остановка сердца. Реанимационные мероприятия в полном объеме оказались неэффективными, Произведена нефроэктомия. Тепловая ишемия почек - около 20 минут, Трансплантаты отмыты от крови консервирующим раствором. Пункционной иглой взяты биоптаты, Результаты исследования содержания миоглобина:правая почка - корковый слой 0,35 нг/мг белкамозговой слой 0,75 нг/мг белка левая почка - корковый слой 0,12 нг/мг белкамозговой слой - следы миоглобинаСделан вывод о нежизнеспособности обеих трупных почек, Однако из-за соответствия 2-х антигенов донора и реципиента(Евдокимов Р,Н., 23 г.) правая почка была пересажена, Диурез в течение 4 суток после операции составлял в среднем 2,5 литра, но концентрационная способность почки отсутствовала, азотистые шлаки в крови нарастали и при концентрации креатинина 1,5 ммоль/л больной взят на геомдиалиэ. Во время диализа произошел разрыв трансплантата,При исследовании 10 гомогенатов коркового и мозгового слоев удаленной почки не найдено даже следов миоглобина,П р и м е р 2. Свистунов Ф,И 26 лет, М истории болезни 38, лечился в нейрохирургическом отделении указанной выше больницы по поводу опухоли головного мозга. Дыхательная недостаточность в послеоперационном периоде нарастала, Переведен на искусственную вентиляцию легких. Через 2 ч давление упало до 70/40 мм рт.ст, Время гипотензии 30 мин. Остановка сердца. Реанимационные мероприятия эффекта не дали, Произведена нефроэктомия, Тепловая ишемия почек - 15 мин, Время консервации до операции - 4 ч, Содержание миоглобина в биоптатах коркового и мозгового вещества:Правая почка: корковый слой - 12,8 нг/мг белкамозговой слой - 10,6 нг/мг белка Левая почка; корковый слой - 12,7 нг/мг белкамозговой слой - 13,0 нг/мг белка Сделан вывод о пригодности трансплантатов к пересадке, Реципиент Кокебаев М.К., 8 лет, Почка начала функционировать сразу после включения в кровоток, По истечении 3 суток азотистые шлаки крови нормализовались, Однако на 4 сутки послеоперационный период осложнился тромбозом почечной артерии, что привело к необратимому нарушению кровообращения в трансплантате и его функции, Содержание миоглобина (после удаления трансплантата на 5-е сутки в гомогенатах коркового (0,80 нг/мг белка) и мозгового (0,61 нг/мг белка) слоев снизилось более чем в 10 раз,П р и м е р 3, Больной Прошко В.К 40 лет, История болезни М 1146, поступил в реанимационное отделение с диагнозом закрытая черепно-мозговая травма, перелом основания черепа. Находился на искусственной вентиляции легких 2,5 часа. Время гипотензии (артериальное давление ниже 70 мм рт,ст.) - 40 минут. Остановка сердца, Реанимационные мероприятия в полном объеме не дали результата, Произведена нефроэктомия, Время тепловой ишемии - 17 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 минут. Содержание миоглобина в биоптатах почечной ткани:Правая почка: корковый слой - 3,27 нг/мг белкамозговой слой - 3,14 нг/мг белка Левая почка: корковый слой - 4,75 нг/мг белкамозговой слой - 3,54 нг/мг белка.Сделано заключение - трансплантаты нежизнеспособны. Однако, учитывая совпадение по 2-м антигенам донора и реципиента (Беспалов И., 21 год) левая почка была пересажена. Послеоперационный период осложнился олигурией, с нарушением экскреции шлаков крови и разрывом трансплантата на 5-е сутки после пересадки. При исследовании 10/, гомогенатов коркового и мозгового вещества удаленной почки не выявлено даже следовых количеств миоглобина,П р и м е р 4, Больной Прокопчук С.В 24 года. История болезни М 2011, Поступил в реанимационное отделение с диагнозом черепно-мозговая травма, субдуральная гематома, На искусственной вентиляции легких находился 2 ч, Гипотензия 60/40 мм рт.ст, в течение 30 мин. После остановки сердечной деятельности произведена нефроэктомия, Первичная тепловая ишемия - 18 мин. Время консервации - 6 ч, Содержание миоглобина в пункционных биоптатах;Правая почка: корковый слой - 15,5 нг/мг белкамозговой слой - 16,2 нг/мг белка Левая почка: корковый слой - 19,1 нг/мг белкамозговой слой - 17,5 нг/мг белка На основании полученных данных сделан вывод о пригодности донорских почек к пересадке. В связи с отсутствием реципиентов, подготовленных к операции, почки отправлены в Ташкентский центр трансплантации. По полученным нами данным обе почки пересажены; ближайший послеоперационный период - удовлетворительный.П р и м е р 5, Больной Бехер Л.А., 21 год, История болезни М 2482. Поступил в реанимационное отделение с диагнозом закрытая черепно-мозговая травма, перелом основания черепа. Больной в течение 10 ч находился в состоянии атонической комы с выраженными дыхательными расстройствами, по поводу которых проводилась искусственная вентиляция легких, За это время наблюдалась трижды остановка сердца. При последней остановке реанимационные мероприятия эффекта не дали, Произведена нефроэктомия, время тепловой ишемии составило 17 мин, консервации - 2,5 ч, Содержание миоглобина;5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Правая почка - корковый слой 63,7нг/мг белкамозговой слой 82,7 нг/мг белкаЛевая почка - корковый слой 116,2нг/мг белкамозговой слой 88,3 нг/мг белкаЗаключение "шоковые" почки, трансплантации не подлежат,П р и м е р 6, Больная Одинцова Л.Б32 года, История болезни М 2461, Поступила в реанимационное отделение с диагнозом тяжелая закрытая черепно-мозговаятравма, ушиб головного мозга тяжелой степени, перелом основания черепа, Время искусственной венти яции легких - 9 ч, Времягипотонии - 3 часа, Гипоксическая остановка сердца, Реанимационные мероприятияэффекта не дали. После нефроэктомии почки от крови отмывались плохо. Содержаниемиоглобина в 10 гомогенатах коркового имозгового слоев,Правая почка: корковый слой - 96,6нг/мг белкамозговой слой - 87,5 нг/мг белкаЛевая почка; корковый слой - 97,4 нг/мгбелкамозговой слой - 89,66 нг/мг белкаЗаключение; шоковые почки, трансплантации не подлежат,П р и м е р 7, Донорские почки изьятыу больного Сологуб В,А. 34 лет. Историяболезни М 3082, Диагноз; тяжелая черепномозговая травма, ушиб головного мозга,субдуральная гематома. Время искусственной вентиляции легких - 10 ч, Остановкасердца, Реанимационные мероприятия вполном объеме не дали результата. Произведена нефроэктомия, Период тепловойишемии - 15 минконсервации - 6 ч, Пересадка больному Шарипову А., 38 лет, Совпадение по НА - одному антигену,перекрестная проба - отрицательная, Вторая почка не пересаживалась из-за отсутствия реципиентов и передана наисследование, Содержание миоглобина впочечной ткани;корковый слой - 14,7 нг/мг белкамозговый слой - 17,6 нг/мг белкаЗаключение: почки пригодны к трансплантации. Послеоперационный период больного Шарипова А, прошел без осложнений ина 33 сутки больной был выписан домой,П р и м е р 8, Донорские почки изьятыу Аубакирова Д. 48 лет. Тяжелая черепномозговая травма. Исследована левая почка,с рассыпным типом почечной артерии,Микроскопическое описание препарата, Ткань почки от эритроцитов отмыта.Встречаются местами склерозированныеклубочки, выраженный отек с увеличением просвета капсул Шумлянского. Сделать заключение о пригодности трансплантата к пересадке невозможно,Содержание миоглобина: корковый слой - 15,4 нг/мг белкамозговый слой - 14,8 нг/мг белка Заключение: почки жизнеспособны.П р и м е р 9, Донорские почки изъяты у Педус Н., 53 года. Тяжелая черепно-мозговая травма, Субдуральная гематома. Управляемая вентиляция легких в течение 2 суток, Отмыть почки от крови не удалось (блок оттока). В исследуемых препаратах обеих почек измеения клубочков выражались в набухании и пикнозе ядер эндотелия, В расширенной полости капсул зернистый экссудат, слущенные клетки, В просвете извитых канальцев местами пигментные цилиндры. В эпителии дистрофические и очаговые некробиотические изменения. Заключение "шоковые" почкиСодержание миоглобина;Левая почка; корковый слой - 77,9 нг/мг белкамозговый сгой 117,0 нг/мг белка Правая почка: корковый слой - 81,3 нг/мг белкамозговой слой - 121,7 нг/мг белка Заключение "шоковые" почки.. П р и м е р 10, Почки изъяты у Неизвестного, 30 лет с тяжелой черепно-мозговой травмой, субарахноидальным кровоизлиянием, Исследована правая почка (повреждение мочеточника), Микроскопическое описание препарата; Ткань почки от эритроцитов отмыта. В просвете клубочков слущенный эпителий. Просветы отдельных канальцев резко расширены с хлопьевидным белковым содержимым, Клетки эпителия канальцев 1 порядка светлые, с зернистостью. Наблюдается некроз отдельных клеток, Сделать вывод о категорическом противопоказании к пересадке тра нсплантата невозможно. Содержание миоглобина:корковый слой - 0,99 нг/мг белка мозговой слой - 0,81 нг/мг белка Заключение: почки не пригодны к пересадке,Таким образом, использование предлагаемого способа в клинической практике позволяет дать оценку жизнеспособности и функциональной активности трупных почек перед трансплантацией.Формула изобретенияСпособ оценки жизнеспособности почечных трансплантатов, включающий пуниционную биопсию донорских почек перед14 1780010 Составитель В,ВерболовичРедактор С,Кулакова Техред М.Моргентал Корректор Т,Палий Заказ 4433 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб 45 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 пересадкой, о т л и ч а ю щи йс я тем, что. с целью повышения точности способа, в биоптате определяют содержание миоглобина и при значениях этого показателя 8-40нгlмг белка ткани биоптатэ трансплантатоценивают как жизнеспособный.