Способ количественного определенияникотинамида

Союз СеветскикСоциалистическихреспублик ОПИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИ ЕТВЛЬСТВУ м 834468(51)М. Кл с присоединением заявки йо(23) Приоритет 6 01 й 21/64 Государственный комитет СССР по дедам изобретений и открытийДата опубликования описания 300581(72) Авторы изобретения В. П. Баранов и А. А. Хабаров Читинский государственный медицинский институт(54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ НИКОТИНАМИДА Таблица 1 Концентрация никотинамида, мкг/мл 1 Г 1 2 3 4 56 ( 7 16 22 16 100 14 32 35 74 10 100 20 50 0,1 0,2 Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам количественного определения никотин- амида.Известен способ количественного определения никотинамида, путем титрования анализируемой пробы, растворенной в уксусной безводной кислоте раствором хлорной кислоты в присутствии индикатора 11 .Недостаток способа - низкая избирательность определения.Наиболее близким к описываемому изобретению по технической сущности и достигаемому результату является способ количественного определения никотинамида путем обработки анализируемой пробы в щелочной среде смесью раствора синильной кислоты и хлорамина Т с последующим измере" нием флуоресценции полученного при этом раствора ( 21.Недостаток способа состоит в низкой чувствительности (50 мкг/мл 1.Цель изобретения - повышение чувствительности определения.Поставленная цель достигается тем, что в способе количественного определения никотинамкда обработку анализируемой. пробы в щелочной среде проводят хлоральгищ 5 атрм при 99 100 оС с последующим измерением флурресценции полученного раствора. 15 При излучении оптимальных условий реакции найдена линейная зависимость интенсивности флуоресценцииот концентрации препарата, котораялежит в интервале 0,7-50 мкг/мл 20 и приведена в табл. 1. Относительная интенсивностьфлуоресценции, Ф834468 4 Б 6 7 8 30 20 12 38 45 37 40 10 16 42 56 22 12 48 62 10 14 56 74 4.30 64 77е 38 80 7448 86 8050 100 80 50 5 5 60 70 80 90 100 910 фильтрами .ФКи Чувствительность реакции, описываемой в изобретении составляет 0,7 мкг/мл, что позволяет проводить определение препарата в лекарственных смесях. Определение проводится на отечественном электронном флуоримет Таблица 2 Концентрация раствора хлоральгидрата,Концентрация раствора едкого натра,250,1 0,5 1 10 4 4 4 4 4 . 4 0,1 0,5 4 10 б 4 4 4 4 437 16 1,0 4 4 4 4 12 20 30 3,0 5,0 4 14 22 37 52 45 б . 12 29 28 10,0 37 40 20 18 24 36 30 28 26 26 28 27 20,0 10 30 Насыщение Оптимальными концентрациями реактивов являются 5-ный раствор едкого натра и 5-ный раствор хлоральгидрата по 2 мл на обработку одной анализируемой пробы объемом 1 мл.Определено оптимальное время кипячения исследуемых растворов на кипящей водяной бане.ависимость относительной интен-си ости флуоресценции от времени кипячения на водяной бане, приведена в табл. 3. Таблица 3 Время кипячения мин ОтцосительнаяинтенсивностьФлуоресценции, 1 7 27 62 60 64 58 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 1,0 Продолжение табл. 11 ре Эф-ЗМА сВ 1 - 2.При изучении оптимальных условий 2 О проведения флуоресцентной реакциина никотинамид найдены оптимальные концентрации едкого натра и хлоральгидрата, которые приведены в табл. 2. Время обработкианализируемой пробы на кипящей водяной бане составляет 0,2-10 мин. Оптимальные значения этого интервала 2-10 мин. Приопределении использовалось времякипячения равное 5 мин.Определению никотинамида в лекарственных смесях не мешают цианкобаламин, тиамин, фолиевая кислота, аскорбиновая кислота. Никотиновая кислота55 обработанная по методике не даетфлуоресценции характерной для никотинамида.П р .и м е Р 1. Определение никотинамида в инъекционном 1-ном раст 0 воре,1 мл 1-ного раствора из ампулыпереносят в мерную колбу на 100 мл,доводят водой до метки и перемешивают. К 1 мл полученного раствора65 прибавляют поочередно 2 мл 5-ного 0,2 0,5 1 2 3 5 10834468 Таблица 4 Метрологические характеристики Никотинамид По калибровочномуграфику, мкг/мл В 1 мл 1-ного раствора, г/мл х = 0,01057 18,7 0,00935 0,01035 0,00965 0,01150 0,01153 0,01100 0,01100 0,01035 0,01050 0,01065 20,7 19,3(Р = + 0,00241 23,0 22,7 Е 95= + 0,000765 22,0 22,0 20,7 Истинное значение определяемой величины: а0,01057+0,000765 21,0 21,3 по стандартному раствору, для при готовления которого к 1 мл стандартного водного раствора никотинамидас содержанием препарата 100 мкг/млпоочередно прибавляют 2 мл 5-ногораствора едкого натра и 2 мл 5-ногораствора хлоральгидрата. Стандарт ный образец помещают на кипящую водяную баню на 5 мин и после охлажденияраствор флуориметрируют одновременнос исследуемыми образцами.Результаты определения никотин амида в таблетках представлены втабл. 5. Т а б л и ц а .5 Метрологические характеристики Никотинамид Навеска измельченныхтаблеток,г по калибровочномуграфику,глк г /мл иэ расчетана однутаблетку,г 0,096 0,096 19,3 0,01458 0,01404 18,6 х = 0,0139 раствора едкого натра и 2 мл 5-ного.раствора хлоральгидрата. Анализируемую пробу йомещают на водяную кипящую баню на 5 мин. После охлаждения раствор переносят в кювету ифлуориметрируют. Содержание никотинамида определяют по стандартномураствору, для приготовления которогок 1 мл стандартного водного раствораникотинамида с содержанием препарата П р и м е р 2. Определение никотинамида в таблетках по 0,015 г.0,1 г (точная навеска) мелкоизмельченных таблеток никотинамида помещают, в колбу на 100 мл, доводят до метки дистиллированной водой и перемешивают. К 1 мл полученного раствора приливают поочередно 2 мл 5-ного раствора едкого натра и 2 мл 5-ного раствора хлоральгидрата, Пробу помещают на водяную кипящую баню на 5 мин, После охлаждения раствор переносят в кювету и флуориметрируют. Содержание никотинамида в таблетках рассчитывают 100 мкг/мл приливают поочередно 2 мл 5-ного раствора едкого натра и 2 мл 5-ного раствора хлоральгидрата. Полученный раствор помещают на 5 мин на кипящую водяную баню и после охлаждения флуориметрируют одновременно с растворами исследуемых образцов.Результаты.флуориметрического определения никотинамида в 1-ном раствор приведены в табл, 4.+0,00024 = а 04 дартными образцами тинамида в нсследу считывают по калиб для построения кот.вносят 1,0; 0,5, О,водного раствора н 30 центрацией препара доливают поочередн.дистиллированной в бирку приливают ре выше и флуориметри е З 5 с растворами иссле Данные по опред в драже "Декамевит в табл. 6.6 абли Метрологическиехарактеристики котинам Навеска измельченных драже,0,0660 0,0648 8,0 7,6 0,04 0,044 576 0,04+0,00 075722 0,048 0,047 0,059 0,07235 0,09392 0,07040 0,09056 9,=+0,005Ю 0,048 Инстинное зн определяемой чины: а = О, +0,00508 ени ели 95+ 3,2 0736 0814 19,0,0 О,0 05 О, 096 18,6 . 0,01П р и м е р 3, Определение никотинамида в драже "Декамевитф.0,08 г (точная навеска) мелкоизмельченных драже переносят в мерную колбу на 50 мл, растворяют в дистиллнрованной воде и доводят до метки. Полученный рЫствор фильтруют через . бумажный фильтр. К 1 мл фильтрата добавляют поочередно 2 мл 5-ного раствора едкого натра и 2 мл 5-ного раствора хлоральгидрата, Пробирку помещают на водяную кипящую баню, гд проба находится 5 мин. После охлаждения раствор переносят в кювету и флуориметрируют одновременно со станпо калибровоч- из расчетному графику, на однумкг/мл драже, г Количество никоемом растворе рас- .ровочному графику,орого в пробирку,25 мл стандартногоикотинамида с конта 100 мкг/мл,о 0,0; 0,5 и 0,75 млоды, в каждую проактивы как указаноруют одновременнодуемых образцов.елению никотинамида10 834468 П р и м е р 4. Определение никотинамида в драже "Пентонит".0,075 г (точная навеска) мелко- измельченных драже переносят в мерную колбу на 50 Мл, растворяют в дистиллированной воде и доводят водой до метки. К 1 мл полученного раствора добавляют псочередно по 2 мл 5 В-ного раствора едкого натра и 5-ного раствора хлоральгидрата, перемешивают, помещают пробу на водяную кипящую баню на 5 мин После охлаждения растТаблица 7 Найдено никотинамида Навеска измельченных драже,г Метрологическиехарактеристики о калибровоч- иэ расчет ому графику, на одну д мкг/мл же, г 0,019 0,07225 0,07750 0,07975- 0,01863 19,0197 0,01 8,0787,0 мкг/мп. повышения чувс ления, в качес ганического ре лоральгидрат ич температуре в Формула изобретения 4 ии,кспертакологс. 463 отрав2, с. чники информавнимание прирственная фарэд. М., 1968, 3 и др. Хими М., 1973., т. нияаналоргасредфлуораст зея яю 10 Составитель Л,ТехРед Н. Келуш ломенце Редактор Е, Кинив орректор,Оодписное ла к 56/ 4 Тираж 907 ВНИИПИ Государственнопо делам изобретен 3035, Москва, Ж, Ра ак о комитета СССР й и открытийушская наб., д. 4 иал ППП "Патентф,г. Ужгород, ул. Проектная,особ количес икотинамида зируемой про ическим реагс последующ есценции пол ора, о т л и венного путем об ы хлорс нтом в щ м измер ченного ч а ю щопределеаботкидержащимелочнойниемпри этоми й с я вор переносят в кювету и флуориметрируют одновременно со стандартными образцами. Количество никотин- амида в исследуемом растворе рассчитывают по калибровочному графику, для построения которого готовят стандартные образцы с содержанием никотинамида 5, 10 и 20 мкг/мл по описанной выше методике.Данные по определению никотинамида в драже "Пентонит" представлены в табл.7. тем, что, с цельювительности опредхлорсодержащего оргента используютобработку ведут п99-100 С.Истопринятые во1. ГосудаСССР, 10-е и2. Франкещих веществ