Способ диагностики тромбинемии

(5)5 6 0 П ИЕ ИЗОБ ТЕН 2 одят в центрифужют соответственно 2%-ного раствора 0,12 мл 50%-ного и 0,16 мл 1%-ного пробирок встряхимнатной темпераГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯПРИ ГКНТ СССР АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ(71) Белорусский государственный институтусовершенствования врачей(54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ТРОМБИНЕМИИ(57) Изобретение относится к медицине, аименно к коагулологии. и касается способадиагностики тромбинемии. Целью изобреИзобретение относится к медицине, а именно к гемокоагулологии и касается способа диагностики тромбинемии,Цель изобретения - повышение специфичности способа диагностики тромбинемии за счет определения наличия растворимых комплексов мономеров фибрина в плазме путем осаждения их В-нафтолом или этанолом, или протаминсул ьфатом и определения в плазме содержания фибриногена.Результат определения выражают в виде показателя, вычисленного как отношение экстинций растворов соответствующего паракоагулянта и фибриногена, и, если вычисленные таким образом показатели превышают максимальный средний уровень у здоровых доноров, диагностируют тромбинемию. соб осуществляют следующие обратения является повышение специфичности способа диагностики тромбинемии, Для этого определяют наличие растворимых комплексов мономеров фибрина в плазме путем осаждения В-нафтолом, или этанолом, или протаминсульфатом и определяют содержание фибриногена. Результаты определения выражают в виде показателя, вычисленного как отношение экстинций растворов соответствующего паракоагулянта и фибриногена, и, если вычисленные таким образом показатели превышают максимальный средний уровень у здоровых доноров, диагностируют тромбинемию. 3 табл. Растворимые комплекфибрина (РКМ) плазмы осажвенно В-нафтолом, этанолосульфатом, полученный осав уксусной кислоте и опредераствора на спектрофотометопределяют содержаниеплазме. Для каждого из тестпоказатель как соотношениетворов соответствующего пафибриногена. Таким образзависимость результатов тефибриногена.Определение произвных пробирках. Смешива0,2 мл плазмы и 0,06 млВ-нафтола, 0.4 плазмы изтанола, 0,2 мл плазмыпротамина. Содержимоевают и оставляют при ко с м ономеров д ют соответстм и протаминдок растворяют ляют экстинции ре. Аналогично фибриногена в ов вычисляется экстинций расракоагулянта и ом устраняется стов от уровнятуре на 10 мин, Затем пробирки центрифугируют 20 мин при 3000 об/мин, Надосадочную жидкость удаляют пипеткой, ее остатки осторожно смывают 1 мл дистиллированной воды, пробирки переворачивают на фильтровальную бумагу, затем осушают их стенки, а осадок растворяют в 10 мл (В-нафтоловый) и в 5 мл (этаноловый и прота мин осул ьфатн ы й тесты) 1,5;ь уксусной кислоты, Определяют экстинцию растворов при 280 и 320 нм на спектрофотометре (СФ, СФ), Параллельно в исследуемой плазме определяют содержание фибриногена по Белицеру, Для каждого из тестовЕ 2 во - Езгоп вычисляют показатель Р,=вО - Е 320)ф умед, где (Ежа - Ез 2 п)п - разность экстинций при 280 и 320 нм в соответствующем паракоагуляционном тесте, а (Елвв-Еэ 2 о)ф - аналогичная величина при определении фибриногена в исследуемой плазме Для плазмы доноров найдены следующие средние значения(Х т 8;), Р, =.3,580,21 усл,ед., Рэг = 0,86+ 0,06 уел.зд, Р, = 0,93+ 0,03 усл.ед, Таким образом повышение в исследуемой плазме показателей В-нафголового, этанолового и протамикосульфатного тестов выше 4,21 уел.ед 1,04 уел,ед.; и 1,02 уел.ед, соответственно (Х + 38 х) свидетельствует о превышении нормального уровня РКЧФ и, следовательно, о патологической тромбинемии.П р и м е р, Больной Тдиагноз: ДВС- синдром, гицокоагуляционно-геморрагическая форма. Для В-нафтолового теста (Е 2 во-Еззо) = 1,0 для этанолового - 0,107 для протиминосульфатного 0,126, для фибриногена - 0,09 (1,52 г/л), Показатели царакоагуляционныхтестов составили соответственно Р,= 11.11 усл,ед., Рэт = 1,19 усл,ед., Рл = 1,4усл,ед что превышает приведенные нормальные значения,В табл, 1 показано содержание фибри 5 ногена. РКМФ, ПДФ/Фг и время коалинактивированного эуглобулинового лиэиса вплазме больного; в табл, 2 - сочетаниеповышения содержания РКМФ с дополнительными признаками дессиминированно 10 го внутреннего свертывания крови (ДВС); втабл. 3 - сравнение частоты положительныхпаракоагуляционных тестов, не сопровождающихся дополнительными признаками ДВС,Предлагаемый способ имеет преиму 15 щество перед известным использованием В-нафтолового, этанолового ипротаминсульфатного тестов, так как устраняет зависимость результатов от уровняфибриногена и отражает лишь содержание20 Р КН Ф в исследуемой плазме. Способ и рости доступен для широкого применения в клинической лабораторной практике.Формула изобретенияСпособ диагностики тромбинемии пу 25 тем осаждения растворимых комплексовмономеров фибрина в плазме В-нафтолом,этанолом и протаминсульфатом, растворения полученного осадка в уксусной кислотеи определения экстинции растворов, о т л и 30 ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышенияспецифичности способа, одновременно определяют содержание фибриногена, осажденного тромбином, рассчитываютпоказатель отношения экстинций раство 35 ров соответствующего паракоагулянта ифибриногена и если полученный показательпревышает максимальный среднии уровеньу здоровых доноров диагностируют тромбинеми ю.40еЧ л ОЧ св вВО Лсчам о йоо 1 4 л О 1 Щ а о еО о -т оо о еО ф л счсчВ о о О О ВЪ ОЪ СЧ ео о ю иЪ МЪОеО СеЪ О Оа о о о о с Э о а о СсееОО Офоо Ое вем а- л о ио сеЪ сЧем л 3 о Ц о х 1 сО сч еО о сЧО Щ еО ев ма сч м Щ афмт осч Ое л цъ еО еО С 4 е ОЪ М О еО СЧ О О ееЪ Веа сЧ Э с о х х а сЪ е 1 ф о а эЭ Оо йа с сЪ г эе а а О Э 4 х ОЪ Оефоо о О,О О ф л со ссЪ СЬоо о сЧ есЪСЧ Оеоее ао о ю о о 2 х й Б ОЪ ЕЕ асъ о х о Щ л л ф ф л л Щ ф л л Щ ф л с с" СО ф Щ Ое ОЪ о о О Ое Юо о о о о о со о счс м л Ое а т М О ОЪ ф Ю О - О ОЪ .О - О 1 О ОЪ л со о оЛ ОЪ СС ЕСЪ О о о м м съ- - ОЪ ССЪ ОЪ СЧ 1.3 1 О Ю О о ех о с х х в ц х о ф еХ о о 16: Ф о о о ДЭ фрх э х ох а 1 О о х,х х 1 е фоф фх о ода 1 ф Ц Э с к1 Фз Х е Э х о к г х 10 а о едф ф о ас е 1 ОФР 1 хао. ецф о цх х ф с а 3 Э О 1 С 1С.е 1 2 о 3 ф 1 а х х х -ф1 с, -е 3 х х у е х сейфа 1 11 Щ о х Р 5 Р Щ О О л иО О ю хф хо эахо эа ха о- хеаь 1 Рхщ 9о О ХМР, 1е еоЦРохх1эофхаасоЭ Ц пН хдв фо 5 аС Р С Х Х Х Х х х х х х х х х е е е ц о ц о С ЬС о о охя хд хд ЙЦ 2ох хецф фйо эас хох оаэха г оР 3 С ГО е