Способ определения нарушения активности фибриногена плазмы крови

(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ НАРУШЕНИЯ АКТИВНОСТИ фИБРИНОГЕНА ПЛАЗМЫ КРОВИ (57) Изобретение относится к гематологии. Цель изобретения - ускорение и повышение точности способа. Плазму крови смешивают с 17-ным раствором протаминсульфата в соотношении (10-5):1. 11 о величине максимальной амплитуды тромбоэластограммы определяют сохранность функциональной активности фибриногена. Если эта величина равна 30 мм, то состояние больного расценивают как критическое, требующее немедленной коррекции.4 табл. М 6.цинский стоматоим. Н.А. Семашков, Л.ф. КармолиИ.Г. Бобринская 1 окализованнаяосудистая коагу-,1974, с. 95. крови.Выбор опротаминсутывающейсятабл. 1,плазмы к раствору протаминсульфата не существенны и статистически до заны, а именно Р больше 0,05.Результаты контроля к оптимальной дозе протаминсульфата по нормальной плазме представлены в табл 2,каОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТРИ ГКНТ СССР ОПИСАНИЕ ИЗОБ(21) 4196707/28-14 (22) 1902.87 (46) 15.02.89, Бюл. (71) Московский мед логический институт (72) В.Н. Александр на, Г.Н.Будякова и (53) 612015(088,8) (56) Раби К. В кн.: и рассеянная внутри ляция. М.: Медицина Изобретение относится к медицине и может быть использовано для диагностики свертывающей системы в фазе несвертываемости крови при диссеминированном внутрисосудистом свертывании крови в акушерской, педиатрической, хирургической и прежде всего реанимационной практике.Цель изобретения - ускорение и повышение точности способа.Исследуемую плазму несвертывающейся крови больного смешивают с 1 Е-ным раствором коммерческого препарата протаминсульфата в соотношении 10-5:1 непосредственно в кювете прибора тромбоэластографа и по величине максимальной амплитуды тромбоэластограммы определяют сохранность функциональной активности фибриногена: приФзначениях больше 30 мм как сохранную функциональную активность фибриногена, а при максимальной амплитуде менее 30 мм - нарушение или полную утрату функциональной активности фибри ногена, т.е. диагностируют нарушения в собственно свертывающейся системе тимальной рабочей дозыьфата (в условиях несверкрови) представлен в Различия между величинами максальной амплитуды при разведениях14588 ДоЬавление раствора протаминсульфата в условиях нормокоагуляции плазмы не влияет на ее максимальную амплитуду при соотношении 10-5:1.Способ осуществляют следующим образом.Кровь у Ьольного забирают путем пункции вены силиконированной иглой в силиконированную пробирку в 3,8%- 10 ный раствор цитрата натрия в соотношении 9:1 для тромбоэластографии и во вторую пробирку без стабилизатора для определения времени спонтанного общего свертывания крови. Одно временно с определением времени общего свертывания крови и/или тромбоэластографии крови из цитратной крови получают плазму центрифугированием в течение 10 мин в режиме 1500 об/мин. 20 Тромбоэластографию предпочтительнее проводить на плазме, а не на кровИ.В связи с тем, что величины,гематокрита крови влияют на величины максимальной амплитуды, результаты ве личин, максимальной амплитуды, получаемые при тромбоэластографии плазмы, однозначны по сравнению с результата - ми крови. 11 ри получении данных, показывающих удлинение процесса сверты вания крови по показателю времени общего свертывания крови и/или тромбоэластограмме до 30 мин и вплоть до полной несвертываемости крови, требуется проведение специального, предлагаемого тромбоэластографического исследования. При этом непосредственно в кювету прибора тромбоэластографа вносят 0,27 мл плазмы несвертывающейся крови больного и 4 О 0,03 мл %-ного коммерческого раствора протаминсульфата, т.е. получают соотношение 9:1, Далее проводяттромбоэластографию такой смеси, рекальцифицируя ее 1,29 Х - ным раствором 45 хлористого кальция в количестве0,06 мл. При получении графической 1записи процесса коагуляции смеси по ее тромбоэластограмме проводят качественно в количественн оценку вели- Бр чины максимальной амплитуды, измеряемую в мм. При этом максимальная амплитуда, равная 30 мм и более, указывает на функциональную активность и сохранность фибриногена, а величины менее 30 мм до 0 указывают на нарушение или полную утрату функциональной активности фибриногена, т.едиагностируют нарушения в собственно 244свертывающейся системе крови. Если в дозе 10: коагуляция отсутствует, дозу протаминсульфата увеличивают до 5:1 и проводят тромбоэластографию, а именно к 0,25 мл плазмы добавляют 0,05 мл 1 Х-ного раствора протаминсульфата непосредственно в кювете прибора, проводят тромбоэластографию такой смеси, рекальцифицируя ее 1,29 У,-ным раствором хлористого кальция в количестве 0,06 мл. Согласно известному способу проведено 60 исследований, при этом только в 18 Х случаев удалось диагностировать нарушения свертывающей сис-. темы, которые оценивались как потенциальная гиперкоагуляция, Согласно предлагаемому способу проведено 23 исследования. Во всех случаях прове- цена диагностика нарушений свертывающей системы, При этом выявлены состояния сохранности функциональной ак-. тивности фибриногена в 68,4 Е, а снижение или полная утрата функциональной активности в 31,6%.Сравнительный анализ результатов параллельных исследований цитратнои плазмы несвертывающейся крови больных двумя способами представлен в табл. 3.Данные, приведенные в таблице, проверены на содержание фибриногена в плазме и показывают колебания его в широких пределах от 0,8 г/л до 6,1 г/л в пробах 1-7, определенные по Рутберг и/или высаливанием.Диагностическая информативность двух способов представлена в табл, 4.И р и м е р 1. Больной К., 30 лет. Диагноз: Черепно-мозговая травма.11 ерелом свода и основания черепа. Ушиб мозга. 11 оражение ствола мозга. Кома 1-П степени, Состояние больного крайней степени тяжести, требующее проведения искусственной вентиляции легких и других реанимационных мероприятий, Для исследования свертывающей системы. кровь у больного забирают путем пункции вены силиконированной иглой в силиконированную пробирку в 3,8%-ный раствор цитрата натрия в соотношении 9:1, а также во вторую пробирку,для определения времени спонтанного общего свертывания крови, Центрифугированием в режиме 1500 об/мин в течение 10 мин из крови получают плазму. По показателю5 1458824 времени общего свертывания крови и по тромбоэластографическому исследованию выявляется несвертываемость крови н течение 30 мин от момента забора крови, Проводят тромбоэластографическое исследование согласно известному способу, при этом обнаружено Р больше Р т.есмеси здорового потенциальной гиперкоагуляции не выявлено.Далее тромбоэластографию проводят согласно предлагаемому способу. Непосредственно в кювету прибора тромбоэластографа Не 1118 е (ФРГ) вносят 0,27 мл плазмы неснертывающейся крови больного и 0,03 мл 17-ного раствора коммерческого препарата протаминсульфата, что соотносится как 9;1, Проводят тромбоэластографию, рекальцифицируя смесь добавлением 1,29/-ного раствора хлористого кальция в количестве 0,06 мл. В результате проведения этих приемов получают тромбоэластограмму. Величина измеренной максимальной амплитуды 40 мм. По данным предлагаемого способа сделано заключение: функциональная активность фибриногена сохранена; несвертынаемость обусловлена избытком физиологического гепарина. По данным известного способа такого заключения сделать не удается, так как он не выявляет этих комплексны 1 с нарушений. Даны соответствующие рекомендации к проведению корригирующей терапии выявленных нарушенийИсход заболевания - больной переведен в профильное отделение. 45 50 55 П р и м е р 2. Больной Г., 39 лет, Диагноз: Сепсис, Гнойный менингит, Цирроз печени. Состояние больного тяжелое, требующее проведения реанимационных мероприятий и интенсивной терапии. Для исследования свертывающей системы кровь у больного забирают путем пункции вены силикбнированной иглой в силиконированную пробирку н 3,87.-ный раствор цитрата натрия в .соотношении 9:1, а также во вторую пробирку для определения времени общего свертывания крови. Центрифугиронанием н режиме 1500 об/ /мин в течение 1 О мин из крови получают плазму, По показателю времени общего свертывания крови и по тромбоэластографии выявляется несвертываемость крови н течение 30 мин от 5 10 15 20 25 30 35 40 момента забора крови, Проводят тромбоэластографическое исследование согласно известному способу,. при этомоказывается Р больше Рсмеси здоровогот.е. потенциальной гиперкоагуляциине выявлено, Далее тромбоэластографию проводят по предлагаемому способу: непосредственно н кювету приборатромбоэластографа Не 11 т.яе (ФРГ) вносят 0,27 мл плазмы неснертывающейсякрови больного и 0,03 мл 17-ногораствора коммерческого препаратапротаминсульфата, что соотноситсякак 9:1, Проводят тромбоэластографию,рекальцифицируя смесь добавлением1,297-ного раствора хлористого каль.ция в количестве 0,06 мл, В результате проведения этих приемов графической записи не получено. Дозу протаминсульфата увеличивают, а именно:вновь непосредственно в кювету прибора тромбоэластографа вносят 0,25 млплазмы неснертынающейся крови больного и 0,05 мл 17.-ного раствора препарата протаминсульфата, что соотносится как 5:1, Проводят тромбоэластографию, рекальцифицируя смесь добавлением 1,297-ного раствора хлористого кальция в количестве 0,06 мл. Врезультате проведения этих приемовграфическую запись не получают. Заключение: полная утрата функциональной активности фибриногена, т,е, нарушения в собственно снертынающейсистеме крови. По известному способутакого заключения сделать нельзя.Даны соответствующие рекомендации ккоррекции выявленных нарушений. Исходзаболевания - больной погиб на 9 сутки пребывания н реанимационном отделении,П р и м е р 3, Больной П 24 г. Диагноз: Открытая черепно-мозговая травма, Ушиб мозга, Состояние больного тяжелое, требующее проведения реанимационных мероприятий и интенсивной терапии, Для исследования свертынающей системы кровь у больного забирают путем пункции вены силиконированной иглой н силиконированную пробирку н 3,87.-ный раствор цитрата натрия в соотношении 9:1, а также но вторую пробирку для опреде ления времени спонтанного общего свертывания крови. Центрифугиронани ем в режиме 1500 об/мин в течение 1 О мин из крови получают плазму. Од7 1458824 8 Таблица 1 Проба Показатель,мм Соотношение цитратной плазмы к 1%-ному раствору протаминсульфата15:1 10:1 7:1 5:1 2:1 1 Максимальная 50 50 48 12 амплитуда Максимальнаяамплитуда 60 59 57 09 65 64 59 14 новременно с центрифугированием определяют время общего свертывания цельной крови и проводят тромбоэластографию крови. Выявляют несвертывемость крови в течение 30 мин от мо 5 мента забора крови по показателю времени общего свертывания крови и по тромбоэластограмме. Проводят исследование согласно известному способу, при этом "Р" больше "Р"смеси здорового т,е. потенциальная гиперокоагуляция не выявляется,.Далее тромбоэластографию проводят согласно предлагаемому способу: непосредственно в кювету прибора тромбоэластографа Не 11 Це (ФРГ) вносят 0,27 мл плазмы несвертывающейся крови больного и 0,03 мл 1%-ного раствора коммерческого препарата прот аминсульфата, что соотносится как 9:1Проводят тромбоэластографию, рекальцифицируя смесь плазмы и протаминсульфата добавлением 1,29%-ного раствора хлористого кальция в количестве 0,06 мл. В результате проведения этих приемов графическую запись не получают. Дозу протаминсульфата увеличивают, а именно вновь непосредственно в кювету прибора 30 тромбоэластографа вносят 0,25 мл плазмы больного и 0,05 мл 1%-ного раствора протаминсульфата, что соотносится как 5:1. Проводят тромбоэластографию, рекальцифицируя смесь 35 1,29%-ным раствором хлористого кальция в количестве 0,06 мл. Проведение этих приемов позволяет получить тромбоэластограмму. Величина измеренной максимальной амплитуды равна 70 мм., 40 По результатам предлагаемого способа сделано заключение: функциональная активность фибриногена сохранена, несвертываемость обусловлена избытком физиологического гепарина. Известный способ такого заключения не дает, Даны рекомендации к проведению корригирующей терапии нарушений в свертывающей системе. Исход заболевания - больной переведен в профильное отделение.1П р и м е р 4. Больная В., 74 г. Диагноз: Открытая черепно-мозговая травма, Перелом основания черепа. Состояние тяжелое, требующее интенсивной терапии. Для исследования свертывающей системы крови кровь забирается путем пункции вены. По предварительным данным времени свертывания крови и тромбаэластографии кровь не свертывается в течение 30 мин от момента взятия. Исследования согласно известному способу не выявляет потенциальной гиперкоагуляции, Исследования согласно предлагаемому способу позволяет получить тромбоэластографическую запись, Величина измеренной максимальной амплитуды 30 мм, Заключение: состояние критическое, требующее немедленной коррекции. Исход болезни - больная переведена в проФ фильное отделение,Формула изобретения Способ определения нарушения активности фибриногена плазмы крови путем тромбоэластографии центральной плазмы,о тличающийся тем, что, с целью ускорения и повышения точности способа, исследуемую плазму смешивают с 1%-ным раствором протаминсульфата в соотношении (10-5) :1 и измеряют величину максимальной амплитуды тромбоэластограммы и при значениях ее менее 30 мм определяют нарушение активности.1458824 1 О ношение цнтратной плазж к Х-ному раствору протаминсульфата аа 2: 7 4,6 О ЬОЙ 5,5 59+6 56 Т а б а ичины максимальной амп Проба уды тромбоэластограммь С рабочими разведениями протаминсульфата,мм Без протаминсульфата, мм 8 9 ица Э Предлагаемый спо ба Известный способ Отношение времени "Р" азатель тромбоэластограммы льше "Р" амплитуда ="Р" смес Максимальн о о амплитуда = 6 сималь оль зд Э 4- 07 О"Р" смеси меньше "Р"Маздорового пли туда ьна Р смеси орового1458824 12 Таблица 4 Количество ис 6 леВыявляемость коагуляционной активности фнбриногена плазмы, 0% Способ дований Иэвестный 60 18 Предлагаемыи 68,4 23 Составитель А, ПотемкинРедактор К. Волощук Техред Л.Сердюкова Корректор Н, Король Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Заказ 367/51 Тираж 788 ПодписноеВНИИХИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР113035, Москва, Ж, Раушская иаб., д. 4/5