Способ введения атропина

.Н,бикоГурьКуз лико 1но ецови оло 390196 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙОПИСАНИЕ ИЗО АВТОРСКОМУ СВИ(54) (57) СПОСОБ ВВЕДЕНИЯ АТРОПИНАпутем создания депо-формы препаратас помощью высокомолекулярных соединений, о т л и ч а ю щ и й с я тем,что, с целью пролонгирования действияатропина 1 п что, предварительно парентерально вводят низкоаффинныегомологичные или гетерологичные специфичные к атропину антитела с титром 1:80-1:160 и содержанием иммуноглобулинов класса 18 С, равным 20-507.,с последующим введением через 16-32 чатропина в дозе 1-10 мг/кг.Изобретение относится к медицине, а именно к использованию полимерных соединений в качестве депообразующей системы при пролонгировании фармакологИческого действия лекарственных веществ,Существуют различные способы пролонгирования фармакологического действия лекарственных соединений с применением в качестве депообразующих 1 О систем полимеров различного строения,которые по механизмам реализации эффекта пролонгирования и по конечнойцели имеют отношение к изобретению.Специфичные к низкомолекулярным со 15 единениям антитела ранее не использовали для продления фармакологического действия этих соединений. Способы,90 мг атропина в 5 мл, Препараты применяют перорально, освобождение активного начала происходит в желудочно-кишечном тракте. Препарат оказывает терапевтический эффект в течение 24 ч после приема.Однако в известном способе атро 40 пин депонируется пассивно и для получения депо-форм препарата требуютсязначительные его дозы. Освобождениеатропина из депо-формы зависит отдиффузионных свойств использованных полимеров и не зависит от радиального уменьшения концентрации атропина в пределах биофазы структуры мишени,Цель изобретения - пролонгирование дейетвия атропина дп что.Указанная цель достигается тем, что согласно способу введения атро,пина путем создания депо-формы препарата с помощью высокомолекулярных обеспечивающие пролонгацию фармакологического действия атропина с по мощью антител, также не были описаны.Известен способ введения атропина путем создания депо-формы препарата с помощью высокомолекулярных со единений 111 . В этом препарате в качестве депообразующих соединений использованы нерастворимые, но набухающие в воде полимеры, полученные из винил-, стирол-, или винилпропан Зо сульфоновых кислот, а также из сополимеров моно- и диэфиров акриловой и метакриловой кислот с многоатомными спиртами. Депо-форму атропина получают п чТго при вымачивании этих полимеров в течение 12 ч в физиологи. ческом растворе, содержащем более соединений, предварительно парентерально вводят низкоаффинные гомологичныеили гетерологичные специфичныек атропину антитела с титром 1:801:160 и содержанием иммуноглобулиновкласса 1 дС, равным 20-50 Ж, с последующим введением через 16-32 ч атропина в дозе 1-10 мг/кгПредлагаемый способ реализуетсяследующим образом,Животным вводят парентеральногомологичные или гетерологичные,специфичные к атропину антитела, которые могут применяться в виде антисыворотки или глобулиновой фракциисыворотки. Антисыворотки, специфичные к атропину, получают от кроликовили мышей, которых иммунизируютконьюгатами БСА (бычьего сывороточного альбумина) с химически модифицированным атропином, Глобулиновыефракции сывороток получают высаливанием насыщенным водным растворомсульфата аммония при 407 насыщении,Используемые антисыворотки должныиме-ь следующие характеристики: титрантител к атропину 1:80-1: 160 (определяется в реакции непрямой гемагглютинации = РНГА с эритроцитарнымдиагностикумом с гаптенной детерминантой - модифицированным атропином);содержание антител класса 186 20 503(определяется по РНГА в присутствии0,2 М водного раствора меркаптоэтанола); специфичность антител устанавливается по ингибированию РНГА атропином.Доза вводимых специфических антител к атропину рассчитывается поформулеД = (240-260) х Эгде Д - доза вводимого антиатропинового -глобулина (мг/кг);д - атропина (мг/кг),Через 0,5-1,5 сут после введения специфичных к атропину антител вводят атропин любым способом в дозе 1-10 мг/кг.Таким образом, осуществление последовательности приведенных выше операций делает возможным формирование депо-формы атропина .хп ч.чо, с применением в качестве высокомолекулярной депообразующей системы специфичных к атропину антител.Использование предлагаемого способа пролонгирования фармакологического действия атропина позволяет увеличить13094 4 сов,Атропин + Специфическое Комплекс ееропиие со антитело специфическим антителом 20 з 11 длительность действия атропина в 2-8 раз.К моменту введения атропина в крови у животных циркулируют специфичные к атропину антитела. Взаимодействие атропина со специфическими антителами приводит к образованию комплексов атропина со специфическими Применение данной депообразующей системы делает возможным постепенное высвобождение атропина, что поз воляет достигнуть пролонгации его действия без увеличения вводимой дозы препарата и, соответственно, увеличить эффективно действующую его дозу, так как атропин находится в связанной форме и уменьшены потери за счет неспецифической сорбции.Необходимо отметить, что данный способ пролонгации фармакологического действия атропина предусматривает 25 использование специфических антиатропиновых антител только определенных вышеуказанных характеристик. При использовании специфических к атеропину антител с отличающимися от приведенных свойствами можно получить либо отмену действия атропина, либо отсутствие пролонгации.Таким образом, предлагаемый способ предполагает практическое использование совершенно нового свойства специфических антител к атропину - пролонгацию его действия. Для исследования длительности фармакологического действия атропи на применяются общепринятые фармакологические модели, наиболее адекватные для анализа холинолитических эффектов атропина: модель ареколинового тремора; измерение частоты пульса; измерение величины зрачка. Вследствие того, что центральные эффекты атропина .не ярко выражены, а ареколин холиномиметик преимущественно центрального действия, для оценки 50 длительности действия атропина были использованы и другие модели, позволяющие объективно исследовать про-, должительность действия препарата.По данным, полученным при измере нии частоты пульса и величины зрачка, длительность действия атропина (при пролонгировании его предлагаемым антителами (депо-формы атропина), при диссоциации которых выделяется1свободный атропин. Изменение концентрации свободного атропина приводит к смещению равновесея в данной обратимой реакции, то вызывает увеличение диссоциации комппекспособом) увеличивается до 8 раз.Длительность пролонгации определяется сроком персистенции в орган;измекомплекса атропина с антителами ивводимой дозой атропина,Предлагаемый способ пролонгацииприменим для увеличения длительностидействия и других лекарственных соединений при условии получения специфичных к ним антител нужных характеристик.Предлагаемый способ пролонгирования фармакологических эффектов атропина с применением специфическихантител определенных характеристикможет найти применение в клиникахвнутренних и глазных болезней прилечении язвенной болезни желудка,холецистита, бронхиальной астмы, терапии воспалительных заболеванийглаз и так далее.П р и м е р 1. Пролонгированиефармакологического действия атропина на модели ареколинового треморас применением специфичных антителв виде антисыворотки.Эксперименты выполняют на разнополых белых лабораторных мьппах массой 16-20 граммов в осенне-зимнийпериод, Опытным мышам за 24 ч довведения атропина внутрибрюшинновводят по 6 мл прогретой в течение30 мин при 56 С кроличьей сывороткисо следующими характеристиками: титрспецифичных к атропину антител 1:80;содержание антител класса 1 яС неменее 503. Контрольные животные получают равные количества аналогичнообработанной нормальной кроличьейсыворотки. Антропин вводят подкожно в дозе 2,5 мг/кг через 24 ч послевведения сывороток. П р и м е р 2. Эксперимент: выполняют аналогично примеру 1, но антись 7- воротку (как и нормальную кроличью1113094 сыворотку - НКС) вводят за 16 ч до введения атропина.П р и м е р 3. Эксперимент выполняют аналогично примеру 1, но атропин вводят через 32 ч после введения 5 сывороток.П р и.м е р ы 4 и 5. Эксперименты выполняют аналогично примеру 1, но вводят 5 и 10 мг/кг атропина перорально.10П р и м е р ы 6-8. Эксперименты выполняют аналогично примеру 1, но кроличья антисыворотка к атропину имеет следующие характеристики; титр антител к атропину 1:160; содержание антител класса 1 яС - 207. Атропин вводят в дозах 2,5; 5,0 и 10,0 мг/кг,П р и м е р ы 9-11. Эксперименты выполняют аналогично примеру 1, но опытным мышам вводят по 0,5 мл уравновешенного по белку со специфичной к атропину антисывороткой -глобулина специфичного к атропину со следующими характеристиками: титр антиатропиновых антител 1:80; содержание антител класса 18 С - 507, Контрольные животные получают равное количество нормального кроличьего -глобулина. Атропин вводят в дозах 2,5; 5,0 и 10 мг/кг внутримьнпеч- ЗО но.На животных, подвергнутых перечисленным в примерах 1-11 воздействиям,Длительность эффекта атропина в минутахпосле введения его в дозах Группы экспериментальных жиКоли- чествотных вомьппей 1 1 2,5 мг/кг 5 мг/кг 10 мг/кг 25 мг/кг Введение нормальной сывороткикролика 60 0 90 150 180 Введение нормального кроличьего7 -глобулина 180 бО 0 90 150 Введение антиатропиновой сыворотки:титр 1:20, 18 С -507Ф 120 180 150 0 Введение антиатропиновой сыворотки:титр 1:160,18 С -207. 150 90 150 180 Интактные мьппи 270 оценивают продолжительность защитного действия укаэанных доз атропинаот 2 ЕД ареколина. За критерийфармакологического действия атропина принимают полное отсутствие клиники ареколинового тремора у мьппейпосле введения атропина. Результаты продолжительности защитного действия атропина при предварительном введении мьппам специфическихантиатропиновых тел, полученные вэкспериментах, перечисленных в примерах 1-11, суммированы в таблице, Изпредставленных данных следует, чтопассивная иммунизация животных катропину и последующее его введение,т,е, предлагаемый способ пролонгирования фармакологического действияатропина обеспечивает удлинение в2-8 раз длительности действия атропина и увеличение эффективно действующей дозы препарата (снижение необходимой для получения эффекта атропина дозы),Как видно из представленных данных, пассивная иммунизация к атропину антителами определенных характеристик и последующее его введение,т,е. предлагаемый способ пролонгирования фармакологического действия,обеспечивает пролонгирование действия атропина п чиччо. 90 150 1801113094 Продолжение таблицы Группы экспериментальных жиКоли- честв от вых вомыли ей 1 150 180 150 90 120 30 90 180 180Отсутствие эффекта пролонгации действия атропина, так как используются антитела с другими характеристиками. Составитель П, Бонарцев Редактор С. Лисина Техред И. Асталош Корректор С, ШекмарЗаказ 6487/5 Тираж 687 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Введение антиатропинового глобулина:титр 1:801:160, 1 С-20-503 Введение антиатропиновой сыворотки: титр1:320-1;640,1 дС -100 м Введение антиатропиновой сыворотки: титр1: 1280-1: 5120,18 С от 20 до507 Длительность эффекта атропина в минутахпосле введения его в дозах 2,5 мг/кг 5 мг/кг 10 мг/кг 25 мг/кг