Способ определения активности ферментов печени

ОПИСАНИЕ ИЭОБРЕТЕНИ ЕТЕЛЬСТВУ К АВТО У К. ГрибаусГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ(71) Вильнюсский государственный университет им. В.Капсукаса (72) И.Й, Крикштопайтис, Г. кас и Ю.К. Калибатас(56) Грибаускас Г. и др. Исследова. ние некоторых ферментов и их клиническая интерпретацияМетодические рекомендации. Каунас, 1974, с.33. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕН 1 И АКТИВНОСТИ ФЕРМЕНТОВ ПЕЧЕНИ(57) Изобретение относится к биохимии и медицине, касается гепатологии Цель изобретения - повышение точности и селективности способа, Для этого пункционно берут биопсию печени под обцим в/в тиопентал-натриевым наркозом с применением миорелаксантов (для избегания травмирования паренхимы печени, связанного с дыханиебольного), Внутреннюю иглу с биоптатом после прокола печени извлекают,а оставленную наружную иглу (канюлю)соединяют со шприцем, заполненнымстерильным Физраствором и быстро(в 3-5 с) вводят в печень 4-5 млстерильного физраствора, Вытекаюшуюобратно жидкость (3 мл) собирают впробирку и определяют ферментативныеактивности. Затем в канюлю вводятэлектрод, покрытий изоляционнымполихлорвпниловым слоем, кроме дистального участка, на 1 см выступаюцего из капюли. Электрод подключаютк электрокоагулятору.,и, извлекая еговместе с канюлей, постепенно электрокоагулируют пункционный канал дляисключения послепункционных кровотечений, 2 табл, 1394132Пзобретение относится к биохимиии медицине, касается гепатологии,Цель изобретения - повышение точности и селективности способа.Способ осуществляется следующимобразом,Забор печеночных ферментов проводят во время пункциоццой биопсии печени. Пункционцую биопсию печени 10производят под общим вцутривеннымтиопентал-цатриевглм наркозом с применением миорелаксантов короткогодействия, что позволяет избежатьвозможное травмирование паренхимы 15печени связанное с дыханием больноЭго. Прокол печени делают на уровнесредней подмьпдечцой линии в 1 Х-Хмежреберьи двойной иглой, состоящейиз наружной иглы (канюли), которую 20оставляют в печени, и внутренней иглыдля взятия биоптата печени, котораяна 1,5 см длиннее наружной и легковталкивается в просвет наружной иглы,Внутреннюю иглу с биоптатом извлекают 25из печени, а оставленную наружную иглу (кацюлю) соединяют со шприцем,заполненным стерильным Физиологичес-.ким растворогл, после чего быстро (35 с) впускают в печень 4-5 мл сте- ЗОрильцого Физиологического раствора,Вытекающую обратно жидкость в количестве 3 мп собирают в пробирку и определяют ферглентативные активности.Затем в канюлю вставляют электрод,который по всей длине, за исключениемего дистальцого участка, на 1 см выступающего из канюли, покрыт изоляционным полихлорвиниловым слоем. Электрод подключают к электрокоагулятору 40и, постепенно извлекая его вместес канюлей, производят эпектрокоагуляцию пуцкционного канала, Зто исключает возможность послепуцкционных кро"вотечений, 45П р и м е р, У 20 лиц производился забор кровииз кубитальной веныс последующим установлением активности основных Ферментов, отражающихФункциональное,состояние печени - ала-,Оциц аминотрансферазы (АлАТ), аспарагвн аминотрансферазы (АсАТ), щелочной Фосфатазы (11 Ф) . Параллельно волремя произведения многоступенчатойпуцкциоццоц биопсии печени предлагаемым способом определяли вцутриклеточцые печецочцые Ферменты путем промыпд нгия луцк циоццогд к вцела Физиологическим раствором с последующим устацовлецием активности вьддеукаэаццыхФерментов в Физиологическом растворе.Сопоставительные даццые методовприведены в таблице, в которой даныгцгфровьге значения активности Ферментов в периферической вецоэцой крови,полученной путем пуцкггии вены и взятия крови шприцем, и активность Ферментов, полученных по предлагаемомугспособу,Как видно из представленных в табл.1. данных, по предлагаемому способу в полученной жидкости из печени устанавливается высокая активность печецочцых внутриклеточцых Ферментов, что позволяет более точно делать выводы о степени поражения печегги,по сравнению с активностью данных ферментов в периферической вецозной 1 крови, так как в общее кровяное русло попадают вьпдеуказанцые Ферменты из многих органов, например повышение активности АсАТ может служить показателем не только поражения печеночцых клеток, но и сердца, а повышение концентрации 11 гФ может указывать це на печецочный холестаз, а на воспалительный процесс в суставах, Поэтому определение внутриклеточных печеночных Ферментов по предлагаемому способу является точным и селективным;Для подтверждения увеличения точности и селективности способа определения активности ферментов печени у пяти больных проведены сопоставительные исследования активности трацсаминаз в периферической венозной крови, в получаемом экстракте (по предложенному способу),и в печеночцом гомогенате.Печеночный гомогецат получают из юмм биоптата печени, который заливают 4 мл физиологического раствора,/ацные представлены в табл,2,Как видно из представленных втабл,2 данных, в получаемой внутриклеточной жидкости активность Ферментов более близка к таковой, котораяустановлена в печецочцом гомогенате,Более того, соотношение АлАТи АсАТ, установленное в экстракте,соответствует соотношению активности исследуемых трансаминаэ в печеночном гомогенате и резко отличаетсяот соотношения этих трацсамицаэ впериферической крови,139432 Активность ферментов, ммоль/лч в венозной крови ЦФ АлАТ АсАТ ЩФ ЛлЛТ ЛсАТ 0,28 О, 16 0,1 1,9 0,4 2,8 0,58 3,2 3,35 1,2 0,14 0,07 0,2 О, 16 0,28 0,32 3,45 1,64 1,48 2,75 5,9 1,93 0,7 0,3 0,3 0,9 0,7 5,9 0,35 2,0 0,28 1,6 4,75 2,35 0,84 0,94 О, 14 2,8 0,35 0,7 0,48 0,45 2,8 0,2 0,28 0,14 0,28 0,75 1,03 0,28 0,24 3,44 0,32 0,08 0,32 2,4 1,4 4,4 2,4 1,2 0,2 1,48 3,6 1, 18 2,12 2,9 3,85 0,35 0,22 1,72 0,14 0,42 0,16 0,68 1,23 2,0 2,56 7,43 1,0 4,36 1,85 5 з 9 0,56 4,5 0,45 4,9 0,8 0,3 3,2 0,1 2,7 0,56 0,28 0,77 0,24 0,72 6,9 1,5 3;35 1,9 2,8 6,2 О, 16 0,62 О,6 0,62 О, 16 О, 16 Формула изобретенияСпособ определения активности ферментов печени путем анализа внеклеточной жидкости человека, о т л и - ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения точности и селективцости способа, осуществляют пункцию печени, оставляют в печеци канюлю, вводят через цее 4,5+0,5 мл стерильндго Физиологического раствора, а в качестве вцеклеточцой жидкости исследуют жидкость, вытекающую из канюли.Таблица 1 внутриклеточных,полученныхпредлагаемым способом1394132 Таблица 2 Активность ферментов, ммоль/луч Экстракт (внеклеточ- Гомогенат печениная жидкость) Кровь АсАТ АлАТ АсАТАЛАТ АсАТ АлАТ 0,49 2,54 Составитель Н, ГуляеваТехред М.иоргенталКорректор О.Кундрик Редактор Г, Волкова Заказ 22 15/4 1 Тираж 847 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5