Среда для предотвращения ишемического повреждения тканей при трансплантации органов

(5)5 А 61 К 9/ Е ИЗОБРИДЕТЕЛ ЬСТВУ НИЯ ОЛИСАНК АВТОРСКОМ ИЯКАВ арственный унив В.Н,Троянова ишепри ышеа соуват нкса архипу Я.М, Еба Апоха: А Я- Мо. ап3-482. пзуще МуоСе. дицине и емическасится к ьшения- пов ние жизнеГОСУДАР СТВЕ ННЫ Й КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР(56)Неагзе 0,3., Нойееазе Оогп 9 МуосагМе 1 аЬой РготесОопСагйо, 1975 М 7, р.46 Изобретение атно касается среддля умен го повреждения ткане Цель изобретения способности тканей.П р и м е р 1. В сбалансированную солевую смесь Хенкса без глюкозы, содержащую, мас.Д: феноловый красный 0,002; йаС 0,8; КС 0,04; СаС 22 Н 20 0,019; М 95047 Н 20 0,02; йа 2 НР 04Н 20 0.006; КН 2 РО 4 О, 006; йаНСОз О, 035, добавляют 0,200 мас, глюкозы и перемешивают на магнитной мешалке. Затем добавляют 0,037 мас.0 глутаминовой кислоты, 0,028 мас,1) пирувата натрия, 0,089 мас. изоцитрата натрия, тщательно перемешивая среду после добавления каждого компонента. При этом доводят рН среды до 7,4 (1-2 каплями 0,1 н. КОН), Готовую среду фильтруют через стеклянный фильтр и насыщают кислородом воздуха,П р и м е р 2, Готовят состав как указано в примере 1, но добавляют 0,015 мас.0 ь глутаминовой кислоты, 0,011 мас.0, пирувата натрия, 0,036 мас4 изоцитрата натрия,(54) СРЕДА ДЛЯ ПРЕДОТВРАЩЕ ИШЕМИЧЕСКОГО ПОВРЕЖДЕНИЯ НЕЙ ПРИ ТРАНСПЛАНТАЦИИ ОРГАН (57) Изобретение относится к медици касается сред для предотвращения мического повреждения тканей трансплантации органов. Цель - пов ние жизнеспособности тканей, Сред держит глутаминовую кислоту, пир натрия, изоцитрат натрия, состав Хе при определенном соотношении ко нентов . Зтабл,П р и м е р 3. После декапитации крыс линии Вистар 12-месячного возраста сердце быстро извлекают и помещают в холодную среду Хенкса на 3 мин. Остановленное и охлажденное сердце взвешивают, канюлируют аорту и помещают в установку для перфузии, термостатируемую при 37 С, В течение первых 3 мин сердце перфузируют средой Хенкса без глюкозы (контроль) или средой, включающей указанные метаболиты, Среду перфузии насыщают кислородом воздуха, а скорость перфуэии с помощью перистальтического насоса устанавливают равной 5 мл в 1 мин на 1 г ткани сердца. После укаэанной 3-минутной перфузии сердце,периодически подвергают ишемии по схеме; 19 мин тотальной ишемии - 1 мин реперфузии аэрированной средой,С целью испытания предлагаемой среды на каждой 20-й мин в течение 3 ч ишемии отбирают минутный перфузат и определяют в нем лактатдегидрогеназную активность.Результаты отражены в табл.1, при этом глутаминовую кислоту, пируват, изоцитрат в вариантах 1 - 3 добавляют в концентрации 0,074, 0,055, 0,179 мас,% соответственно ввариантах 4-6 - 0,037, 0,028, 0.089 мас.,6 соответственно. Глюкозу во всех случаях добавляют в концентрации 0,200 мас. в соответствии с известной средой, Число опытов 5 - 22.П р и м е р 4. Известно, что при ишемии увеличивается интенсивность перекисного окисления липидов и накопление его конечных продуктов. При этом степень уменьшения накопления продуктов перекисного окисления липидов, обусловливаемая действием испытываемых веществ, может быть показателем их противоишемических свойств,С этой целью измеряют содержание одного из конечных продуктов перекисного окисления липидов (малонового диальдегида) в гомогенатах миокарда крыс после 3 ч ишемии, В течение 3 ч ишемии ткань миокарда снабжают сбалансированной солевой средой Хенкса без глюкозы (контроль), средой Хенкса, содержащей 0,200 мас.оглюкозы (известная среда), и предлагаемой средой. Содержание малонового диальдегида определяют с 2-тиобарбитуровой кислотой,Как видно из данного примера (табл.2), известная среда снижает накопление мало- нового диальдегида при ишемии только на 26% по сравнению с контролем, а предлагаемая на 47%,П р и м е р 5. Влияние на сохранение сократительной активности сердца после 20, 40, 60 и 80 мин прерывистой ишемии,С этой целью крыс линии Вистар 12-месячного возраста декапитируют, сердце быстро извлекают и помещают в охлажденную среду Хенкса на 3 мин. Остановленное и охлажденное сердце взвешивают, канюли 0,015 -0,0740,011 - 0,0550,036 - 0,179Остальное руют аорту и помещают в установку для перфуэии, термостатируемую при 37 С. В течение первых 5 мин сердце перфузируют средой Хенкса, включающей указанные ме таболиты, или средой, включающей толькоглюкозу (известная среда), Среду перфузии насыщают кислородом воздуха, а скорость перфузии с помощью перистальтического насоса устанавливают равной 5 мл в 1 мин 10 на 1 г ткани сердца, После 5-минутной перфузии сердце периодически подвергают ишемии по схеме: 19 мин тотальной ишемии - 1 мин реперфузии аэрированной средой;После 20, 4060 или 80 мин прерыви стой ишемии начинают реперфузию с цельюрегистрации возобновления сократительной активности сердца, Для выравнивания условий испытания сердец. подвергнутых прерывистой ишемии с предлагаемой сре дой и известной, постишемическую перфузию проводят одной средой - известной,Результаты отражены в табл,3.Предлагаемая среда позволяет увеличить степень защитного противоишемиче ского действия.Ф ормул а из о бр ете н ия Среда для предотвращения ишемического повреждения тканей при трансплантации органов. содержащая состав Хенкса, 30 о т л и ч а ю щ а я с я тем, что, с цельюповышения жизнеспособности тканей, она дополнительно содержит глутаминовую кислоту, пируват натрия, изоцитрат натрия при следующем соотношении компонентов, 35 мас. :Глутаминовая кислотаПируват натрияИзоцитрат натрияСостав ХенксаЫоо.ф оомд ооаафсЭо дф со с фд фзО К ооо о оо1632427 Таблица 2 Со е жание малонового иаль еги а на 1 мг белка, нмоль Конт оль Известный способ П е лагаемый способ 0,097 + 0,005 0,072 ф 0,007 0,051 + 0,055 Таблица 3 Составитель Н, ДокшинаТехред Э. Цаплюк Корректор Е. Дормидонтова Редактор И. Горная Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 Заказ 568/91 Тираж 445 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5