Питательная среда для получения бактериального препарата, используемого при производстве сыров

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК КОМИТЕТ ССБРЕТЕНИЙ И ОТК ГООЮМЕПаааЙО ДЕЛ ПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕАВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ( лот,натрииХлористыймарганецХлористыйкобальт 022-0, 024 022-0,024 ЧЕИ ПОЛ сод сыв дро Осветленна подсырная сыворотка Остально(56) 1. Новые исследования в произ водстве чистых культур молочно-кислых бактерий, Экспресс-информация,Цельномолочная промышленность 1975, Р 4, с. 22.2прои. ратонени Белова Г.А. Совершенствованиезводства бактериальных концентв и разработка способов примея их в сыроделии, Вологда, 1972 (57) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ПОЛУЯ БАКТЕРИАЛЬНОГО ПРЕПАРАТА, ИСЗУЕМОГО ПРИ ПРОИЗВОДСТВЕ СЫРОВ, ржащая осветленную подсырную ротку, гидролизованное молоко, жжевой автолизат, лимоннокислый аЯОпю п 1 И 72 АЩ С 12 Ъ 1/20//А 23 С 19/ натрий и источник марганца, о т л и ч а ю щ а я с я тем, что, с целью повышения накопления бактериальных клеток в биомассе, она .дополнительно содержит лактозу, х ристый натрий и хлористый кобаль а в качестве источника марганца - хлористый марганец при следующем соотношении ингредиентов, мас.7.:Гидролизованноемолоко 14-16 Лак тоза 0,5 Дрожжевой автолизат 1,9-2,1 Лимоннокислыйнатрий 1,9-2, 1Хлор истый1118 б 1,9-2,1 О, 18-0, 22 Изобретение относится к технической микробиологии и касается питательной среды для получения бактериального концентрата, используемого при производстве сыров. 5Известно, что введение в состав питательной среды микроэлементов и минеральных солей благоприятно влияет на увеличение содержания клеток микроорганизмов 1 . 1 ОИзвестна питательная среда для получения бактериального препарата, используемого при производстве сыров, содержащая осветленную подсырную сыворотку, гидролиэованное молоко дрожжевой автолизат, лимоннокислый натрий и источник марганца 2 .Оптимальными условиями накопления бактериальюой массы являются: выращивание культур в среде, состоящей из осветленной подсырной сыворотки (90%), гидролизованного молока (107.), дрожжевого автолизата (10 мл/л), лимоннокислого натрия (20 мл/л) и сернокислого марганца (1 б 0 мл/л); ее раскисление через б и 9 ч инкубации 207-ным раствором двууглекислой соды, температура культивирования 30 С и ее продолжительность 9-12 ч; центрифугирование среды при 20 тыс.об/мин (центрифуга С). По данной технологии получены бактериальные концентраты с содержанием клеток 100-364 млрд в 1 мл.Однако известные способы приготовления и питательные среды для получения бактериального концентрата не позволяют получать максимально возможное количество клеток молочно- кислых бактерий, так как для усиленного роста молочнокислых стрептококков необходимы азотистые вещества и витамины. При действии панкреатином на Обезжиренное молоко сО 45 держание аминного азота в нем по- . вышается в 2-3 раза. В такой среде увеличивается урожай клеток молочно- кислых стрептококков, Следовательно, необходимо в среде Увеличить процентное отношение гидролизованного молока для выращивания культур, На развитие микроорганизмов существенное влияние оказывают различные микроэлементы, присутствующие в среде. Однако действие сернокислого марганца не в такой степени стимулирует 72 2рост бактерий, как набор микроэлементов (в виде раствора хлористого марганца и хлористого кобальта). Прн увеличении дозы дрожжевого автолизата сыворотка обогащается ценными растворимыми формами белков и витаминами группы В, которые необходимы для роста молочнокислых бактерий,Цель изобретения - повышение накопления бактериальных клеток в биомассе,Поставленная цель достигается тем,что питательная среда для получениябактериального препарата, используемого при производстве сыров, содержащая осветленную подсырную сыворотку, гидролизованное молоко, дрожжевой автолиэат, лимоннокислый натрийи источник марганца, дополнительносодержит лактозу, хлористый натрийи хлористый кобальт, а в качествеисточника марганца - хлористый марганец при следующем соотношении ингредиентов, мас, .:Гидролизованноемолоко 14-1 бЛактоза 0 5Дрожжевой автолизатЛимоннокислыйнатрий 1,9-2,1ХлористыйнатрийХлористый марганец 0,022-0,024Хлористый кобальт 0,022-0,024Осветленная подсырная сыворотка ОстальноеДля роста молочнокислых бактерийбольшое значение имеют буферныесвойства среды, Добавление в средулимоннокислого натрия (до 207)и хлористого натрия (0,27) значительно повышает буферную емкость среды.С целью устранения губительногодействия ионов Н на клетки приразвитии молочнокислых бактерийнеобходимо постоянно проводитьнейтрализацию среды.Данные по развитию культур впредлагаемой питательной среде стрехкратным раскислением(через6,9 и 12 ч) при 30 С представленыв табл.4Таблица 1 1118672е Возраст культур, ч Показатели 0 6 9 12 15 Количествобактерий,мпн/мл общее 18 2650 2625 9114 9284 ароматобразующее 7957 2298 4731 7640 рН 6,52 5,70 5,74 5,57 5,48 Из табл. 1 видно, что максимальный урожай клеток в культуральной20 жидкости приблизительно 9,х 10- 9,2 х 10 клеток в 1 мл питательной среды, а количество ароматообразующей микрофлоры колеблется от 7,6 х 10 - 7,9 х 10 клеток в мл, что составляет9 25 83,0-87,0 Ж от общего количества. Бактериальная масса выделяетсяиз охлажденной (до 18-20 С) культуральной среды центрифугированием. З 0Выход бактериальных концентратови их выживаемость приведены в табл.2. Таблица 2 Общее количество бактерий, млрд/ч, при продолжительности выращивания культур, ч Показатели 12 Суспензия Бактериальная масСуспензия Бактериальная масса са 136,8 68,4 144,4 72,2 Длительность хранения при 5-8 С, сут о О624 1224 605 1210 587 614 10 540 607 20 Выход из 10 л среды, г Если принять выход биомассы из среды после 12 ч инкубации равным 9,1 млрд. клеток в 1 мл (см. табл.1) и количество получаемой из 10 мл среды бактериальной массы 72,2 г, как указано в табл. 2, то содержание бактерий в 1 г биомассы должно составлять10000 мл х 9,1 х 10 кл/мл72,21260 х 10 кл/г, однако во время . отделения биомассы от среды часть клеток теряется.1118672 0,2 Таблица 3 20 Количество бактерий, млн/мп Возрасткультур,ч Общее Ароматобразую- щее Питательную. среду подвергают сте.25 рилизации при 1 атм.мин. и охлажодают до 30 С. После термическойобработки в среду (рН 6,4-6,5)вносят 0,8% чистых культур молочнокислыхстрептококков. Выращивание 30 проводят при 30 С в течение 12 чос трехкратным раскислением (через6,9 и 12 ч инкубации) 207-ным раствором аммиака до первоначальной ве- .личины рН.В 1 мл культуральной среде после12 ч инкубации накапливается9, 114 х 10 клеток молочнокислыхстрептококков, количество ароматобразующих бактерий 7,957 х 10 ф кле ток, что составляет 87,07 от общегоколичества (табл. 1). Без введения лактозы 11 1739 3055 4640 4421 18 2010 3819 5728 5818 0 6 9 12 15 С введением0,5% лактозы 18 0 2298 2650 5625 9114 4731 7957 912 Использование предлагаемой среды позволяет получить бактериальный 45 препарат с повышенным содержанием молочнокислых стрептококков, 7640 9284 Составитель И.ПриваловаРедактор О.Колесникова Техред М.Тепер Корректор А.Ильин Заказ 7374/19 Тираж 521ВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб д. 4/5 Подписное Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Из табл, 2 видно, что в 1 г биомассы, выделенной из культуральной среды после 12 ч инкубации культур, содержится 1210 млрд. клеток, а в 1 мл суспензии содержится 605 млрд. клеток.Исследования по введению в состав предложенной питательной среды 0,5% лактозы (5 г на литр среды) и без введения лактозы на процесс накопления культур в среде представлены в табл, 3. Из табл. 3 видно, что введение в питательную среду 0,57 лактозы стимулирует развитие молочнокислых стрептококков и в такой сре де происходит максимальное накопление клеток. П р и м е р. Проводят выращивание, смеси культур Бгергососсцз 1 асг 1 з, Ьецсопоз гос, рагащезепгегохдез, згг, йа 1 са 1 хз для.накопления бактериальной массы в питательной среде, состоящей:Гидролизованноемолоко, % 15Дрожжевойавтолизат, 7 2Лимоннокислыйнатрий, % 2Хлористый натрий. %Хлористый мар"ганец, мг/л 2,3Хл ори стыйкобальт, мг/л 2,3Лактоза, 0,5Осветленнаяподсырная сыворотка Остальное