Способ консервации мицелия макрогрибов

(19) (11) . ЛИ 12 Н 1/04 А 01 Х 1 ЕНИЯ ОПИ 7ЕйТЕЛЬСТВУ К Бюл. В 1 отаники Хол о, В.Д,Мануиль 8(088.8 опзегча Ью 1 ояу ацзЬгоо 8, р.1 акоп ой гдеапд сц 1 йидз. Асад,-135с Я ОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ НИЕ ИЭОБ(54) СПОСОБ КОНСЕРВАЦИИ МИЦЕЛИЯ МАКРОГРИБОВ(57) Изобретение относится к микробиологической промьипленности, в частности к технологии хранения чистыхкультур, а именно мицелия макрогрибов. Целью изобретения является повы"венке жизнеспособности грибов в процессе хранения. Способ заключаетсяв следующем. Мицелий макрогрнбов подвергают дегидратацин при температуре5-15 С до влажности 5-153, затем погружают в жидкий азот. 2 табл.1 138 бб 53 гИзобретение относится к микробио, 7,5 и 15 ОС в вакуумном эксикаторе.логической промышленности, в частнос- При влажности мицелия 10 . проводятти технологии хранения чистых культур, замораживание со скоростью 300 -а именно мицелия макрогрибов, а так С мин до -19 б С. Отогрев провоже для получения посевного материала дят со скоростью 40-50 С минв водяопроизводственных штаммов. ной бане при 38-40 С. После отогреваЦелью изобретения является повыше- мицелий высевают на такую же культунне жизнеспособности грибов. ральную среду для определения егоП р и м е р 1. Мицелий высшего ба жизнеспособности.зидиального гриба Р 1 ецгогцв озггеа- Контролем 1 для всех примеров явгцз (1 асц. Рг) Кцпппег штамм ИМВРляется мицелиальная масса тех же двухиз коллекции Института ботаники штаммов базидиального гриба, культиим. Н,Г.Холодного АН УССР культиви- вируемая на твердой или жидкой питаР уют в чашках Петри на плотной пита тельных средах, которую хранят приотельной среде в течение 7 сут, Дегид- +4 С, а контролем 2 - мицелиальнаяратацню мицелия проводят над СаС 1 в масса, дегидратирования аналогичновакуумном эксикаторе при +15 С на режимам, описанным в примерах 1 и 3протяжении 5 сут, При достижении и в дальнейшем хранившаяся при +4 С.влажности мицелиальной массы 5% его 20 Скорость роста двухштаммов базизамораживают путем погружения флако- диального гриба Р 1 ецгогцв озСгеагцзнов в жидкий азот. Скорость снижения (Тасц. Гг) Кцпппег после криоконсертемпературы 280-320 С мин , Отогрев вации с использованием предлагаемогомицелия проводят в водяной бане со способа приведена в табл.1.скоростью 60-80 С.мин . Мицелий пе Сравнение жизнеспособности мицересевают на свещищ"о культуральную сре- лия штаммов баэидиомицета Р.овпгеаля определения скорости роста и гцз после криоконсервации по предладу для опрежизнеспособности материала, гаемому и известному способам д ано вП р и м е р 2. Мицелий высшего табл.2.базидиального гриба Р.озггеагцв штамм 30 Как следует иЭ табл.1, наилучшиеИБКиз коллекции Института бота- результаты получают при криоконсерваники им.Н.Г.Холодного АН УССР культи- ции мицелиальной массы штаммов ИМВУвируют на плотной питательной среде 1300 и ИБК, которые перед погру на протяжении 7 сут, затем дегидра- жением в азот дегидратируют до влажтируют над СаС 1 в вакуумном эксика ности 10% при 5 и 7,5 С, Скоростьторе при 5 и 7,5 С на протяжении роста этих двух штаммов после консер 8 сут. При достижении влажности 15 вации мало отличается от контроля.проводят замораживание мицелия путем Таким образом, предлагаемый спопрямого погружения в жидкий азот. соб позволяет поддерживать длительСкорость замораживания 290-340 С мин,. 40 ное время высокую жизнеспособностьРазмораживание проводят со ско- мицелиальной массы базидиальных гриростьюостью 20-30 С мин в воздушном тер- бов, а также упростить процедурымостате при 37-40 С. После полного криоконсервации по сравнению с извеотогрева мицелий высевают на свежую стным способом.культуральную среду для определения 45его жизнеспособности. Фо рмулла изобретенияП р и м е р 3. Проводят исследования влияния режимов консервации на жизнеспособность и,скорость роста базидиального гриба Р.овГгеаГцв штаммов ИМВГи ИБК, культивируемых на жидкой питательной среде на протяжении 7 сут. Избыток среды удаляют декантированием,после чего мицелий дегидратируют над СаС 1 п при Способ консервации мицелия макро грибов, предусматривающий его погружение в жидкий азот, о т л ич а ю щ и й с я тем, что, с целью, повьппения жизнеспособности грибов в процессе хранения, перед погружением в жидкий азот мкцелий грибов подверогают дегидратации при 5-15 С до содержания влаги 5-15 .1386653 Таблица 1 Штаммы Р.овйгеаЬьз ИБКМицелий ИМВРкорость та натной е,5+0,0 + 0,7 5,5 + 0,1 6)5 + 0,3 рованный онтроль влажно 5+0,4 5,8 1 0,9 5,6 +0,2 5) 9+ 0,7 амороари +5,6+ О,5)4+О 5)9 ф Таб знеспособность) 7) по способ Этапы техноло едлагаемому известном-1300 ИВКИМВГИБКелиальная масса он 00 1 О 100 00 влаждегидрати ности 103 ванна 1 О 10 Не предусматривает Не предусматрвает кубация с иопротекторами Не предусматри- . 98вает 10 10 су 0 0 30 сут еэ обработки (контроль дегидрати д ты 103 (к 2 После дегидратации женный до -196 С, д ция без обработки (общийроль) Программное замораживание"35 С Криоконсервация при -196 Схранение в жидком азоте напротяжении онцентрация биомасы на жидой среде,Скоростьроста наплотнойсреде,мм/сут Концентрация биомассы нажидкойсреде)гл1386653 Продолжение табл.2 знеспособность, Х, по способу Этаам тезпоюги известному предлагаемому ИИВУИВК00 ИВК270 сут 0 10 9 0 5 лет Составитель Т.По Техред А.Кравчук ская Корректор Редактор Н.Гуньк окосов каз 1470/3 Подпис митета СССткрытийя наб., д 4 Тираж 520 ВНИИПИ Государственного по делам изобретений и 035, Москва, Ж, Раушс