3-метил-4, 6-динитропирокатехин, проявляющий антиокислительную активность

СОЮЗ СОВЕТСНИХРЦВЛИПЮЕСЮМРЕСПУБЛИК ае ОИ3( С 07 С 79/28 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЬГПФОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯН АВТОКЙОМУ СЭИДВТВЪСТВУ(71) .Вильнюсский ордена ТрудовогоКрасного Знамени и ордена Дружбынародов государственный университетим.В,Капсукаса, Латвийский научно-исследовательский институт кардиологиии Рижский медицинский институт(56) 1. Кумерев А.О., Скутелиа А.П.,Гайдялис П.Г. Тезисы совещания по актуальным проблемам нейролептиков итранквилизаторов. Тартусский госуниверситет. г.Тарту, 1980, с135.2. Полукордас Г., Репчите М.,Скублицкене Г., "Фармакология и токсикология", 1966, В 5,с. 594, .3. Машковский М.Д. Лекарственныесредства. М., "Медицина", т.1, 508,1977,(54) З-МЕТИЛ, 6-ДИНИТРОПИРОКАТЕХИН,ПРОЯВЛЯВШИЙ АНТИОКИСЛИТЕЛЬНУ 10 АКТИВНОСТЬ.Изобретение относится к синтезу биологически активных химических соединений, конкретнее к синтезу 3- -метил,б-динитропирокатехина, проявляющего антиокислительную активность, 5 Указанные свойства позволяют предполагать возможность применения его в медицине и других областях в качестве антиокислителя жировых веществ.Известны производные пирокатехина, обладающие антиокислительной активностью. В частности, 2,3-диоксибензойная кислота (З-карбоксипирокатехин), являющаяся наиболее близкой по структуре к новому соединению, проявляет низкую антиокислительную активность 1 3 при невысокой общей токсичности 12,Цель изобретения - увеличение антиокислительной активности в сочетании с невысокой токсичностью.Указанные свойства определяются новой химической структурой .производных пирокатехина, которая выражается формулой ЮОу30ИОЗ-.Метил,6-динитропирокатехии формулы 1 проявляет высокую антиокислительную активность.35. Соединение формулы 1 получают нитрованием диацетата З-метилпирокатехи-, на 100%-ной азотной кислотой при 60 С без растворителя. Образовавшееся динитропроизводное (не выделяя в чистом виде) гидролизуют кипячением с концентрированной соляной кислотой, и полученный З-метил,6- -динитропирокатехин Формулы 1 очищают кристаллизацией из гексана.Способ получения предлагаемого 3- -метил,6-динитропирокатехина форму" лы 1 прост, дешев и легко осуществим в промьпвпенных условиях.П р и м е р. В трехгорлую кругло- донную колбу емкостью 250 мп, снабженную механической мешалкой, капельной воронкой и термометром, помещают 42 г (0,2 моль) диацетата 3-метилпирокатехина, прибавляют по каплям при перемешивании 60 С 60 мл (1,4 моль) 100 Х-ной азотной кислоты, перемешивают еще 15 мин при той же температуре, выпивают на лед, выделившийся осадок отфильтровывают, промывают на фильтре ,холодной водой; помещают в круглодонную колбу емкостью 1 л, приливают 500 мп (5 моль) концентрированной соляной кислоты, закрывают обратным холодильником, кипятят 6 ч, охлажда- ют до 5 С, осадок отфильтровывают, промывают на Фильтре холодной водой, высушивают на воздухе и перекристаллизовывают из гексана. Выход 3-метил- -4,6-динитропирокатехина формулы 1 26 г (61 Ж), т.пл. 142-143 С., Л204, 222, 285, 370 нм ВЕ 3,88, 3,99, 3,95, 3,55 (в этаноле). В ИК-спектре имеет полосу НО-группы при 3350 см " (в вазелиновом масле). Спектр ПМР (шкала д): с 2,49 (СН, ), с 8,35 м.д. (А 1 Н) (в дейтерохлороформе) .Найдено, Ж; С 39,22, 39,04, Н 2,68,295, М 1324, 13,17.С Н И Оь.Вычислено, 7.; С 39,26, Н 2,82,Н 13,08.Предлагаемый З-метил,6-динитропирокатехин формулы 1 представляет собой устойчивое, негигроскопичное, кристаллическое вещество желтого цвета, растворимое в этаноле, эфире, хлороформе, ацетоне, уксусной кислоте, бензоле, малорастворимое в гексане и воде.Исследуют на острую токсичность и антиокислительную активность предлагаемое соединение - З-метил,6-динитропирокатехина формулы 1, 2,3-диоксибензойную кислоту (известное соединение) и ацетат токоферола (витамин . Е) - стандартное соединение, применя-. емое в медицине в настоящее время (базовый объект) 31.Острую токсичность и общее действие предлагаемого З-метил,6-динитропирокатехина формулы 1 изучают на белых мышах массой 18-25 г путем перорального введения его суспензий в 1 Х-ном крахмальном клейстере с добавлением твина. Величину ЛДо вычисляют по методу Литчфилда и Уилкоксона, модифицированному Ротом.Картина острого отравления токсическими дозами предлагаемого 3-метил- -4,6-динитропирокатехина выражается учащением и углублением дыхания, тонико-клоническими судорогами, а гибель мышей происходит от остановки дыхания и прекращения сердечной деятельности.Антиокислительную активность соединений изучают на модели иницииро- о1098932 Т1Т,Антиокислительная активность при концентрации соединения, Х(При пероральном способе .введения),3-Метил,6-динитропирокатехин 5,2 2,8 2,2 1,2 3ванного перекисного окисления по сравнению с известным стандартным антиокислителем - ацетатом токоферола (витамином Е) и определяют полярографическим методом по поглощению кислорода окисляющейся системой в присутствии антиокислителя и без него.Опыты проводят на полярографе типа ".р" с кислородным электродом, 1 О покрытым мембраной, проницаемой для кислорода (и других нейтральных молекул) и непроницаемой для ионов. Катод и анод помещают по одну сторону мембраны. В электролит через мембрану из ячейки окисления диффундирует только кислород, растворенный в окисляемой жировой эмульсии, в качестве которой применяют 5 Х-ную.водную эмульсию линетола в 0,15 М растворе хлорида калия (рН 8,0), содержащую эмульгаторысмесь (1: 1) твинас твином, конечная концентрация которых в ячейке около 2 Х. Линетол, используемый в качестве субстрата перекисного окисления, содержит значительное количество ненасыщенных жирных кислот (йодное число - 1,27 Э , кислотное число - 0,40 мг КОН). Катализатором окисления служит гематин, концентра- ция которого в ячейке окисления составляет 2,5 10М. Применяют термо-. статируемую (25 С), защищенную от доступа кислорода воздуха ячейку, в которой равномерное распределение ингредиентов, достигается перемешива 35 нием при помощи магнитной мешалки, а введение антиокислителя и катализатора осуществляют непосредственно в ходе эксперимента нри помощи микрошприца. В экспериментах исследуемый анти- окислитель преинкубируют в эмульсии линетола в течение 5 мин, после чего добавляют катализатор и автоматичес- " аки записывают кривую поглощения кислорода при инициированном окислении эмульсии линетола. Скорость потребления кислорода описывают уравнением для скорости реакции первого порядка. Антиокислительную.активность соединений вычисляют по формуле где Т - время, в течение которого поглощается половина кислорода,растворенного в ячейке, в при.сутствии антиокислителя;Т - то же, в отсутствие антиокислителя.Данные по токсичности и антиокислительной активности соединений при" ведены в таблице. Из приведенных данных следует,что предлагаемый З-метил,6-динитропнрокатехин формулы 1 обладает невысокой общей токсичностью и высокой антиокислительной активностью, По антиокислительной активности предлагаемое соединение значительно превосходит известное - 2,3-диоксибензойную кислоту и базовый объект - ацетат токоферола (витамин Е), антиокислительная активность которого проявляется лишь при более высоких концентрациях. Кроме того, ацетат токоферола (витамин Е) при концентрациях 0,005-0,02 Х не оказывает влияния на период индукции окисления (отрезок времени с момента прибавления катализатора до начала реакции окисления), а предлагаемый З-метил,6-динитроирокатехин формулй 1 при концентрациях 0,005, 0,010, 0,05 и 0,0203 увеличивает период индукции окисления соответственно до 41,83, 81 и 84 с, т.е. ингибирует . начало окисления.Заказ 4315/20 Тираж 410 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская наб., д.4/5(ЛД 0) длябелых мышей,мг/кг 2,3-Диок (При сибензой- внутрибрюшинная кислота ном способевведения) Ъ 1 1 1 ХАнтиокислительная активность при концентрации соединения, Х