Способ количественного определения 3, 5, 7, 3, 4 -пента-он флавона

ОП ИСАНИЕИЗОБРЕТЕНИЯК АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ Союз СоветскихСоциалистическихРеспублик и 892277Опубликовано 23,12.81. Бюллетень М 47 ле делам нзебретеннй н открытейДата опубликования описания 23. 12. 81 А.И.Рыбаченко, В.П.Георгиевский, А.Г.Пиотровскаяи Т.А.Богаевскаяс,т.а:.,харьковский научно"исследовательский химикоФармацевтический институт(54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ Зв 5 э 7 уЗ ,4 -ПЕНТА-ОН-фЛАВОНАИзобретение относится к анали" тической химии, а именно к способам количественного определения 3, 5, 7 3, 4 -пента-ОН-флавона (кверцетина),Известен способ количественного определения 3,5,7,3 ,4 "пента-ОН-фла 3 вона, заключающийся в хроматографировании анализируемой пробы с после" дующей обработкой хроматограммы раствором хлористого алюминия с последующим флуориметрированием полученнойхроматограммы 11 1.Недостатком способа является слои" ность определения.Наиболее близким к изобретению по технической сущности и достигаемому результату является способ количеств 1 венного определения 3 1 7, 3 ,4 " -пента-ОН-флавона, заключающийся в растворении анализируемой пробы в метиловом спирте и обработке полученного раствора раствором ацетатэ свинца в метиловом спирте, и после,дующем центрифугировании, отделении и растворении полученного осадка азотной кислотой, обработке получен-. ного при этом раствора ацетатом натрия и титровании его раствором эти" лендиамина тетраацетата натрия 23.Недостатком способа является его сложность и длительность (время опре" деления более 8 ч).Цель изобретения - упрощение и сокращение времени определения.Поставленная цель достигается тем что в качестве спирта используют этиловый спирт в качестве химичесРкого реагента - 51,3-51,53-ный раствор серной кислоты и полученный после обработки раствора спектрофотометрируют. Способ осуществляется следующим образом,Навеску препарата экстрагируют кипящим этанолом, отмеренное количество этанольного раствора переносят в мер" ную колбу и смешивают с растворомсерной кислоты известной концентрации (51,3-51,5 Ф). Измеряют оптическую плотность сернокислотного раствора препарата на спектрофотометре при длине около 440 нм, применяя в качестве контрольного 51,3-51,54-ный раствор серной кислоты. Предлагаемый способ основан на различной способности кверцетина и ликуразида присоединять протон в сильнокислой среде; константы протонизации (рКс 1) кверцетина и ликуразида (2 4-ди-ОНФ -4 -О-Р-О-.глюкопираноэил-0-Р-О-апифураноэид халкон) составляют соот-. ветственно -2,55 и -453Длина волны максимума поглощения протонированного кверцетина лежит в области 440 нм, а в спектре протонированного ликуразида при 440 нм имеется минимум. При этом удельные показатели поглощения кверцетина и ликураэида при 440 нм существенно различны и соответственно равны 985 и 303.Кроме того, в основе предлагаемого способа лежит тот факт, что в интервале 51,3-51,54-ных концентраций серная кислота создает кислотность по шкале Гаммета, равную 3,54 единиц НО, В этих условиях кверцетин протонируется на 90,723, а ликураэид - лишь на 9,283.П р и м е р . Отвешенные 0,6459 г препарата экстрагируют кипящим этанолом, фильтруют в мерную колбу емкостью 100 мл, охлаждают до комнатной температуры и доводят раствор до метки этанолом (раствор А), 1 мл раствора А переносят в мерную колбу емкостью 25 мл, несколько подупаривают на водяной бане и приливают до метки 51,3"51,53-ный раствор серной кислоты (получают раствор .Б), Измеряют оптическую плотность раствора БПриравнивая С, и Сц, выводят,что оптическая плотность кверцетинаО превышает оптическую плотностьликураэида Оц в 31,8 раз.2 в О 0,462/31,8=0,014;О = 0,462-0,О 14=О,448,Рассчитывают содержание кверцетина в препарате (в процентах): п,п в пвв пв 085 0,6459 0,9072=1;933. Необходимость применения 51,4 +0,14-ной серной кислоты вызвана тем, что именно в данном интервал кислотности получаются наиболее стабильные и правильные результат анализа; при данной кислотности отношение степеней протонизации кверцетина и ликураэида около 10 нарушение этого отношения в большу или меньшую сторону влияет на правильность анализа, что показано в таблице,на спектрофотометре при длине волныоколо 440 нм в кювете с толщиной слоя1 см; величина оптической плотностираствора составляет 0,462.5 Согласно расчетам при даннойкислотности среды Н =-3,54 кверцетинпротонируется на 90,72, а ликуразид - на 9,284Отсюда. величинаоптической плотности раствора Б О1 в складывается из следующих величин.Оо, =985 0,9072 С +303 0,0928 хСщк егде Скв и С , - концентрации кверцетина и ликураэида в растворе Б. 5ОтноСодержание кверцетина кверце-.тина ликуразида 49,9 10,8 1,81 1,76 1,94 1,93 9,.8 51,4 8)9 2)08 2)21 51,9епользуют этиловый спирт, в качестве химического реагента - 51)3-51)53"ный раствор серной кислоты и полученный после обработки раствор спектрофотометрируют. Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1.Георгиевский В,П., 1)ибачен" ко А.Г. Флуороденситометричне визначення л 1 куразиду та кверцетину у препарат 1 "Флакарб 1 н".-"Фармацевтический журнал", 1974, У 4) с.51-54.2. Определение кверцетина в препарате "флакарбин" ВФС 42-898-79 (прототип). формула изобретения Составитель Л.СоломенцеваРедактор И.Николайчук Техред А Ач Корректор И, Коста Заказ 11240/64 Тираж 910ВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий1 13035, Москва, Ж) Раушская наб., д. /5-3,39 87,37 8,07 "3)54 90)72 9,28 -9,59 91,69 10)29 Предлагаемый способ более прост восуществлении, и время определениясоставляет 2 ч, что в 4 раза быстрее,чем известным способом. Способ количественного определения 3,5,7,3,4-пента"ОН-флавона пу-, тем растворения анализируемой пробы в спирте и обработки полученного раствора химическим реагентом, о т - фф л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью упрощения и сокращения аремени определения, в качестве спирта исшениестепенейпротонизациикверце"тина иликуразида Содержаниеликуразида)Ф