Способ моделирования миокардита

(51)5 6 09 28 исто кото итов вввюй ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР(71) Киевский медицинский институт им,акад, А,А,Богомольца(56) Музыкантова В.С, Сравнительная гморфологическая характеристика нерых экспериментальных миокардДисс, канд, мед.наук, М., 1971 г.(54) СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ МИОКАРДИТА(57) Изобретение относится к экспериментальной терапии и может быть использовано для изучения динамики воздействияфакторов различной природы на заболеваИзобретение относится к медицине, вчастности к экспериментальной терапии, иможет быть использовано для изучения динамики воздействия факторов различнойприроды на заболевание миокарда воспалительного генеза,Цель изобретения - повышение адекватности модели клиническому течению заболевания.Поставленная цель достигается тем, чтов известном способе моделирования миокарда путем внутривенного введения животному кардиоцитотоксической сыворотки,согласно изобретению, предварительновнутривенно, медленно вводят адреналин вдозе 0,3 - 0,5 мг/кг,Способ осуществляется следующим образом,Кроликамдится адренал внутривенно, медленно ввоин в дозе 0,3 - 0,5 мг/кг, Вение миокарда воспалительного генеза. Целью изобретения является повышение адекватности модели клиническому течению заболевания за счет воспроизведения нескольких этапов развития патологии. Поставленная цель достигается тем, что животному внутривенно вводят кардиоцитотоксическую сыворотки, а также предварительно внутривенно, медленно вводят адре н ал и н в дозе 0,3-0,5 м г/к г. Та кое последовательное применение адреналина и кардиоцитотоксической сыворотки обеспечивает комбинированность влияния действующих начала на сердечную мышцу, что приближает данную модель к клиническому течению заболевания, обеспечивая при этом высокую воспроизводимость патологии у животных,С щество вводится в краевую ушную вену, что обеспечивает первоочередное и непосредственное действие его на сердце. Медленное введение предупреждает одномоментное массированное поступление адреналина в кровоток, что могло бы 0 закончиться гибелью животного. СьСы воротка вводится четы рехкратно в ( ) количестве 2 мл, 1 мл, 0,5. мол, 0,5 мл с с 4 промежутком с три дня. сУказанное количество сыворотки соответствует массе животного около 2 кг. С )йв увеличением массы животного увеличивается и количество вводимой сыворотки,Способ иллюстрируется следующими примерами.П р и м е р. Кролику породы "Шиншилла", массой 2050 г в краевую ушную вену введен 0,30 ь-ный раствор адреналина гидрохлорида, в дозе 0,3 мг/кг, Через некоторое время в животного отмечается одышка, тахикардия, оно становится малоподвижным, вялым, слабо реагирует на окружающее,Такое состояние сохраняется в течение 2 ч.Затем дыхание и общее состояние восстанавливаются при сохранении тахикардии, На третий день после введения адреналина вводится кардиоцитотоксическая сыворотка в количестве 2 мл внутривенно. После этОго сыворотка вводится еще три раза в количестве 1 мл, 0,5 мл, 0,5 мл с промежутком в три дня.. Через три дня после последнего введения сыворотки животное забирается путем воздушной эмболии.У экспериментального животного проведен комплекс морфологических, гистохимических и иммунологических исследований.Микроскопически в миокарде является умеренное расширение просвета сосудов гемомикроциркуляторного русла с умеренными дистрофическими изменениями эндотелия капилляров и венул, отеком подэнотелиальной базальной мембраны и переваскулярной соединительной ткани.Характерным является также очаговое развитие переваскулярных клеточных инфильтратов, состоящих из лимфоцитов, плазмоцитов, макрофагов, нейтрофильных гранулоцитов, лаброцитов,Важным микроскопическим признаком миокардита являются очаговые дистрофические изменения кардиомиоцитов, протекающие в основном по типу мутного набухания, Мышечные клетки несколько увеличены в объеме, отечны, с плохо контурируемой поперечной исчерченностью, измененными тинкториальными свойствами. Ядра их преимущественно несколько увеличены, набухшие, гипохромные. Часть ядер наоборот - уменьшена в размерах, гиперхромна, Гистохимическое изучение активности окислительно - восстановительных ферментов в миокарде выявило их значительную мозаичность, проявляющуюся очаговым уменьшением в клетках количества конечного продукта (диформазана), что в целом свидетельствует о снижении уровня энергетических процессов в кардиомиоцитах,Отражением развития воспалительного процесса в миокарде являются показатели иммунной системы. Сдвиги отмечаются со стороны как клеточного, так и гуморального звеньев иммунитета. Титр комплемента в опытной группе составил 19,8 .ф. 0,55 по 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 сравнению с контрольной группой 26,0 + 1,48 (р0,01). Количество лизоцима в сыворотке крови опытных животных было равно 17,01 .ф 1,17 мкг-мл по сравнению с контролем 10,3 . 1,12 мкг/мл (Р00,01), что говорит о начале развития компенсаторных реакций на воспаление.Содержание ЕАС - РОК (комплементарное розеткообразование) в опытной группе составило 30,75+ 2,5, в контроле 21,0 1,7 (р 0,05).Реакция бласттрансформации лимфоцитов (РБТЛ, морфологический учет) показала следующие результаты - в опыте 37,5 .0,86, в контроле 44,0 + 1,7(Р 0,01).Таким образом, морфологическое, гистохимические и иммунологические исследования свидетельствуют о развитии в миокарде подопытных животных данной группы признаков миокардита.П р и м е р. Кролику породы "Шиншилла", массой 2050 г в краевую ушную вену введен 0,3-ный раствор адреналина гидрохлорида в дозе 0,5 мг/кг, Непосредственно после введения отмечаются выраженные изменения общего состояния животного (сильная одышка, тахикардия, глухость сердечных тонов).Кролик с трудом сохраняет равновесие, малоподвижен, слабо реагирует на различные раздражители, Такое состояние сохраняется в течение последующих 2 ч, после чего выраженность общих изменений проходит. При этом полное внешнее восстановление наблюдается лишь на вторые сутки. На третий день после введения адреналина вводится кардиомиотоксическая сыворотка в количестве 2 мл внутривенно, медленно. Сыворотка вводится еще трижды в количестве 1 мл, 0,5 мл, 0,5 мл с промежутком в три дня,Через три дня после последнего введения сыворотки животное забивается,При проведении комплекса морфологических, гистохимических и иммунологических исследований установлены изменения, характерные для подострого течения миска рдита.Диагностически важным является выраженное очаговое развитие переваскулярных клеточных инфильтратов, состоящих из лимфоцитов, макрофагов, нейтрофильных гранулоцитов, лаброцитов.Признаком развития миокардита являются очаговые дистрофические изменения кардиомиоцитов, протекающие в основном по типу мутного набухания, Гистохимическое изучение активности окислительновосстановительных ферментов в миокарде показало очаговое изменение в клетках ко1764077 Формула изобретения .Способ моделирования миокардита, включающий введение кардиоцитотоксической сыворотки, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения адекватности модели клиническому течению заболевания, предварительно внутривенно вводят адреналин в дозе 0,3 - 0,5 мг/кг. Сравнительная характеристика иииунолэгических иорфолэгических и гистохииических показателей по клиническим и зксперннентальныи данным Предлагаемый способ 111 Изиенения у человека 1 Контроль2602148 Систеиа иннунитета Изучены отпечатки из лиифатических узлов и селезенки опытных и контрольных эзвотных а такще проведен подсчет кмток плаэиатического рядапри кардиоцитотоксическои ииэкардите обработка результатов показала относительно небольшую достоверность, которая скорее отращает тенденцию, чеи аутоиииунную перестройку Норма Ииокардит51,8 в 1,5 34325,2 Опыт 19,820,55(нкг-ил)БАС-РОК 2 КонпмиентЛизоции 2,5+О,1 3,8+0,6 10,3+1,122102174401,7 17,011,1730,7+2,537,520,86 РБТЛ(иорфол) Повышение количества Т - лиифоцитов в периферической крови дл303 полэшительная РБТЛ Увеличение В-популяциилиифоци" тов о 13,02 (нориа) до 2432 (инфекционно-алпергическй иио" карднт),Гистохннические.иэиенения Наличие воспалительного процесса ю иыщце сердца проявляется по еыщениеи активности сывороточных энэииов и изоэнзииов 1лактатдегидрогеназы (ЛДГ)и соотношение ЛДГ, IЛДГкреатининфосфокиназы (КФК) Активность гликолитических фернентов умеренноповышена, что выявляется увеличеннымколнчествои гранул дифорназана при изучении активности ЛДГ.Это такше отрешает развитие при иоделируенойпатологии гипоксии миокарда, являющейсяваяныи патогенетическни неханизнои альтерации сердца при ииокардите у человека,Изненение активности сукцинатде" гидрогеназы, сопровоыдаеиое постепенно нарастающин а затем убывающим колнчествон липидов в миэкардинальных клетках аспартат - аиинотрансферазы (АСТ) Норфологические изменения Дистрофия и альтерацня ииокардшиитов фибропластическаяреакция, кардиосклероз, клеточная инфильтрация периваскулярной эоны, изиенение ядер,Клеточная инфильтрация периваскупярнойзоны, дистрофия иикрокарйкэцитов Не выражены Составитель Л.Пашук Техред М,Моргентал Корректор Н.Ревская Редактор Заказ 3459 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул,Гагарина, 101 личества диформазана, что свидетельствует о снижении уровня энергетических процессов в кардиомиоцитах,Развитие воспалительного процесса в миокарде подтвержданьт показатели иммун ной системы. Так титр комплемента составил 20,8 СН 5 о, по сравнению с контролем 26,0 . 1,48 СН 5 о, что указывает на угнетение гуморального звена иммунитета, В то же время отмечается увеличение количест ва лизоцима (в опыте 17,1 кмг/мл, в контроле 10,3+ 1,12 мкг/мл), что говорит о начале развития компенсаторных образований, в опыте составило 32, в контроле 21,0 + 1,7. РБТЛ (морфологический учет) показала сле дующий результат - в опыте 37, в контроле 44,0 + 1,7.Таким образом, данные морфологических, гистохимических и иммунологических 20 исследований свидетельствуют о развитии в миокарде подопытного животного воспалительного процесса и соответствуют направленности измерений, определяемых при клиническом течении миокардита,Преимущества способа иллюстрирует таблица. Из таблицы видно, что предлагаемый способ является более адекватным клиническому течению заболевания, чем способ - прототип,