Способ идентификации sнigеllа dusеnтеriае 1 для постановки этиологического диагноза

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК А 1 1 м С 1 ЕНИ БР ЕТЕЛЬ АВТОРСКОМУ СУДАР СТВЕ ННЫ Й КОМИТЕТИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМИ ГКНТ СССР ОПИСАНИЕ И(71) Центральнский институт эп(56) Энтеробактчей. /Под ред, Вцина, 1985. л.%37ый научно-исследоватвльидемиологиии Ю,П.Солодовников 88,8)рии. Руководство для вра- И.Покровского, - М,. Меди(54) СПОСОБ ИДЕ НТИФИКАЦИИ ЯН 10 Е 11 А ОУЯЕМТЕЯ 1 А 1 ДЛЯ ПОСТАНОВКИ ЭТИОЛОГИЧЕСКОГО ДИАГНОЗА (57) Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано при эпидемиологическом надзоре за дизентерией Григорьева-Шига. Цель изобретения - повышение точности этиологического диИзобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано при эпидемиологическом надзоре за дизентерией Григорьева-Шига.Известен способ идентификации ЯЫ 9 еПа бузептег 1 а 1 на основании биохимических свойств исследуемой культуры. При отрицательной реакции по индолу, дульциту, рамнозе, ксилозе и сорбиту культуру относят к Я. бузептег 1 а 1, подтверждая затем правильность идентификации постановкой реакции агглютинации со специфической агглютинирующей сывороткой.Однако известный способ не обеспечивает высокой точности этиологического диагноза, так как выявляет только видовую принадлежность выделенной культуры.Цель изобретения - повышение точности этиологического диагноза. агноза, Способ заключается в том, что определяют биохимическую активность виде- ленной культуры в отношении индола, дульцита, рамноэы, ксилоэы, сорбита и арабиноэы. По показателям биохимической активности культуру относят к Я 1 деа буземега 1, Затем определяют биохимическую активность в отношении аргинина. При отсутствии разложения аргинина культуру относят к биовару 1, а при наличии разложения аргинина - к биовару 11, Далее определяют биохимическую активность в отношении мальтозы, трегалоэы и глицерина, Культуру инкубируют в течение 1-3 сут, При сбраживании мальтоэы и трегалоэы и окИсления глицерина в течение первых суток культуру относят к подбиовару а, а при отсутствии биохимической активности в течение 3 сут. - к подбиовару с. 2 табл,Сущность способа сводится к тому; что после идентификации культуры как Я. бузептег 1 а 1 1, дополнительно определяют биохимическую активность в отношении аргинина, мальтоэы, трегалоэы и глицерина и по характеру биохимической активности определяют принадлежность исследуемой культуры и соответствующему биоваоу и подбиовару.П р и м е р 1. Микроорганизм, принадлежность которого к роду ЯЫ 9 еИа, уже определена с помощью минимального дифференцирующего ряда - тесты в отношении наличия индоло- и сероводородообраэования (-), подвидности Н, лизин (-) и орнитиндекарбоксилаэы (-), ферментации лактоэы (-), глюкозы (+)(без газообразования), уреаэной активности (-), утилизации в качестве единственного источника питания ацетата(-), дульцитом (-), ксилозой (-), рафинозой (-) для определения его видовой принадлежности. При установлении принадлежности возбудителя к виду Я, бузептега 1 определяют биохимическую активность в отношении рамнозы (-) и арабинозы (-, +), По совокупности признаков штамма в отношении дульцита (-), рамнозы (-), ксилозы (-)сорбита (-), арабинозы (-, +), а также по индолообразованию (-) делают заключение о принадлежности исследуемого штамма к сервовару Я, бузептег 1 а 11, подтвержденное постановкой серологической реакции с соответствующей агглютинирующей сывороткой,Для определения биоваров Я. бузажага 1 посла аа идентификации до:полнительно исследуют биохимическую активность шигелл этого сарвовара в отношении глицерина, мальтозы, трегалозы и наличия аргининдегидролазной активности,Штаммы Я. бузаптага 1 отличаются друг отдруга по активности к ингредиентам, приведенным в табл. 1,В процесса изучения биохимической активности 53 штаммов Я. бузептег 1 а 1 выявла; а стабильность отличительных признакоь, что позволяет достоверно судить о преимущественной циркуляции конкретных биоваров возбудителей дизентирии Григорьева-Шига в различных географических регионах в различное время,На основании полученных данных составлена схема биохимического типирования Я, бузеяега 11, приведенная в табл, 2. Окончательный учет результатов биохимичес ого типирования проводят через 3 сут наблюдения (72 ч).Изученные 53 штамма Я. бузеяега 1 по своим биохимическим свойствам по отношению к аргинину, глицерину, мальтозе и трагалозе позволяют разделить их по предлагаемой схеме на 6 самостоятельных Ьиоваров, При этом штаммов, относящихся к биовару 1 а, было 7 (13,21%), 1 Ь 8 (15,09%), с 15 (28,3%), 11 а 2 (3,77%), 11 Ь 13 (24,52%), 1 с 8(15,09%)При выделении неодинаковых(по предлагаемой схеме) биоваров Я, бузептег 1 а 1, во время вспышки или в одном очаге дизентерии Григорьева-Шига, есть основание утверждать, что в данном случае заражение людей произошло от различных, не связанных между собой источников инфекции. При идентичности биоваров появляется реальная воэможность объективного лабораторного подтверждения результатов эпидемиологического надзора,П р и м е р 2. Штамм Я. бузеп 1 ег 1 а 1 1 М 519, выделенный в Риге в 1985 г, не обладает аргининдегидролазной активностью, В первые сутки инкубирования ферментировал глицерин и мальтоэу, замедленно ферментировал трегалозу - относится к биовару 1 а,П р и м е р 3. Штамм Я, буземега 1 1 Ф3208, выделенный в Зафарабаде Таджикской ССР в 1986 г, не обладал аргининдегидролазной активностью, замедленноферментировал глицерин и трегалозу, ферментировал в первые сутки мальтозу - относится к биовару 1 Ь.П р и м е р 4, Штамм Я. бузеп 1 ег 1 а 1 1 М19, выделенный в Нукусе Узбекской ССР МХ в 1988, не обладал армниндегидролазнойактивностью, не ферментировал глицерин,замедленно ферментировал мальтозу итрегалозу - относится к биовару 1 с.П р и м е р 5. Штамм Я, бузеп 1 ега 1 1 М312, выделенный в Намангане узбекскойССР в 1986 г, обладал аргининдегидролазной активностью, ферментировал в первыесутки глицерин и мал ьтозу, замедленно ферментировал трегалоэу - относится к биовару1 а.П р и м е р 6, Штамм Я, бузеп 1 ега 1 1 ВМД, выделенный в Индии в 1986 г, обладаларгининдегидролазной активностью, замедленно ферментировал глицерин и трегалозу, в первые сутки ферментировалмальтозу - относится к биовару 1 Ь,П р и м е р 7. Штамм Я, бузепега 1 1 М1141, выделенный в Наманганской областив 1987 г, обладал аргининдегидролазной активностью, не ферментировал глицерин имальтозу и замедленно ферментировал трегалозу - относится к биовару с.Использование способа позволяет повысить точность этиологического диагноза.Кроме того, способ прост в осуществлении, нетребует использования дефици гных реактивов,доступен для практических микробиологов,Формула изобретенияСпособ идентификации Яп 9 е 11 абузептег 1 а 1 1 для постановки этиологического диагноза путем определения биохимической активности исследуемой культуры вотношении индола, дульцита, рамнозы, ксилозы, сорбита и арабинозы, о т л и ч а ю щ ий с я тем, что, с целью повышения точностиэтиологического диагноза, дополнительноопределяют биохимическую активность вотношении аргинина и при отсутствии разложения аргинина культуру идентифицируют как Яп 9 еа бузеп 1 ега 1 биовар 1, а приТрегалоза Мальтоза Глицерин Тест П изнак+ +, -Таблица 2 П р и м е ч а н и я. "+" - положительная реакция в течение 1 сут. "(+)" - замедленная положительная реакция в течение 2 - 3 сут. "-" - отрицательная реакция в течение 3 сут наблюдения Составитель Г. СмирноваТехред М;Моргентал Корректор Т.Малец Редактор Н,Рогулич Заказ 3382 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж, Раушская наб 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул. Гагарина, 101 наличии разложения аргинина - биовар П, далее определяют биохимическую активность в отношении мальтозы, трегалозы и глицерина путем инкубирования культуры втечение 1 - 3 сут и при сбраживании мальто зы и трегалозы и окислении глицерина в течение первых суток инкубирования культуру относят к подбиовару а, а при отсутствии биохимической активности в течение трех суток инкубирования - к подбиовару с,