Способ получения фосфолипидов из микроорганизмов

ОЮЗ СОВЕТСКИХОЦИАЛИСТИЧЕСНИХЕСПУБЛИН 0 4 С 12 И 1/О С 1221;О 2 И 1/Об,с ь- ка 1 Ф 14но-исслчистых довательбиопре 77., 226 1963 ОСфОЛИ- ключаюедвариГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИИ ТОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТ(71) Всесоюзный научский институт особопаратов(54) (57) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯПИДОВ ИЗ МИКРООРГАНИЗМОВ,щий получение биомассы, п,ЯО 1224335 тельную обработку ее трихлоруксусной кислотой, экстракцию с исползованием метанола и хлороформа вчестве экстрагента, отделение из полученного экстракта целевого продукта и промывку его водным растворомсолей, о т л и ч а ю щ и й с я тем,что, с целью повышения выхода,улучпения качества фосфолипидов и сокращения времени процесса, хлороформи метанол берут в виде смеси при ихсоотношении (О,5:1)-(2:1), экстракцию ведут при комнатной температуре,а экстракт перед отделением целевого продукта нейтрализуют едким кали.1224335 2раствора гидроокиси калия и продолжают перемешивание. в течение 3 мин.Затем центрифугируют, верхнюю Фазудекантируют и высушивают в токе бэста,получая "неочищенную", форму препарата, а затем промывают водным солевымраствором в течение 1 мин.Продолжительность процесса 2,5 ч,выход 21,7 мг/г. Получсн препарат10 чистьп, без белковых примесей.П р и м е р 2. Способ осуществляется, как в примере 1, но обработкеподвергают биомассу бактерии Вассалагошусез сегечыхае, а соотношение15 хлороформа и метанола составляет0,5: 1, продолжительность процесса2,3 ч, выход 21,51 мг/г.Получен препарат чистый, без белковых примесей.20 Сравнительные данные представленыв табл, 1. Таблица4 т При 25 меР Выход Качеств продук- продукт та,мг/г есса,р 7 Чистый,без белковыхпримесей 2,3 о же Проттип,45 Белковыепримеси одукта и ег хлороформа в табл, 2. лица 2 Приме 0,1: 0,5: Чистый 6,37 18,5 То же 8,54 5 Примеси 0:1 4,21 То 10,Изобретение относится к биотехнологии и касается способов получения Фосфолипидов микробиологическим путем.Целью изобретения является повышение выхода, улучшение качества Фосфолипидов и сокращение времени процесса.Согласно данному способу обработка едким кали создает оптимальные условия вьделения скрытых" фосфолипидов, например, входящих в состав полисахаридов, в которых они связаны с другими компонентами, в частности с сахаридными остатками, прочными ковалецтцыми связями, це разрываемыми хлороформом и метанолом. В силу этого выделяется часть продукта, це вьделяемого известными способами. 1 акая обработка приводит к увеличе" цию степени денатурации примесей, це затрагивал Фосфолипиды, что позволяет повысить качество продукта.Способ осуществляется следующим образом.Биомассу микроорганизмов обрабатывают,трцхлоруксусной кислотой (ТХУ) до 5-87. конечной концентрации, К суспецзии прибавляют свежеприготовлеццую смесь хлороформа и метанола при соотношении (0,5: 1) -(2:1), интенсивно перемешивают в течение 3-5 мин при комнатной температуре и в перемешцваемую смесь медленно в течение 1-2 мин добавляют водный раствор гид роокиси едкого кали до состояния нейтрализации смеси в объеме, соответствующем 1/5 объема смеси, центриФигируют для разделения смеси на две Фазы (4000 д, 10 миц), отбирают 4 нижний хлороформовый слой, содержащий фосфолипиды, получая "неочищенную" форму препарата, затем хлороформовый слой промывают равным объемом водного солевого раствора в течение 4 1"2 мцн и высушивают его в токе азота.П р и м е р 1. Биомассу бактерий Езс 1 ег 1 с 1 йа со 1 х Ив количестве 8,9 г равномерно распределяют в восьми центрифужных стаканах по 5 100 мл. В каждый стакан приливают по 0,2 мл 57.-ного раствора ТХУ. Перемешивают в течение 2 мин и вливают в цее 30 мл свежеприготовлецной смеси хлороформа и метанола 2:1 продолжают 5 перемешивать в течение 4 мин при комнатной температуре, после чего добавляют в течение 1,5 мин 6 мл водного Зависимость. выхода п качества от соотношения и метанола представленаТ а бч лороформ:мета- Выход, , Качествол мг/г1224335 вышается возможно белковых Составитель Е.Буданцева:ТехредН.Бонкало Корректор Л. Патай Редактор Н, Швыдкая Заказ 1893/25 Тираж 490 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретеня и открытий113035, Иосква, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 При использовании предлагаемогоспособа сокращается время процессапо сравнению с известным в 20 раз, по 4выход в 14 раз, кроме того,получение ФосФолипидов безпримесей.