Дигидрохлориды 9-замещенных 2(1-адамантил)имидазо (1, 2 ) бензимидазолов, обладающие иммунодепрессивным действием

ции в концентрированной соляной кислоте,Соединения формулы 1 получают свысокими выходами и выделяют обычными методами, Строение синтезированных соединений подтверждают даннымиИК-спектров и элементного анализа,П р и м е р :1, Дигидрохлорид2 (1-адамантил)-9-диэтиламиноэтил 10имидазо(1,2-а)бензимидазола (1,а),Смесь 4,9 г (10 ммоль) гидробромида 3-(1-адамантилкарбонилметил)1 диэтиламиноэтил 2 иминобензимидазолина и 150 мл конц,соляной кислоты 15кипятят в течение 6 8 ч, следя запротеканием реакции с помощью тонкослойной хроматогрфии. Затем реакционную массу охлаждают и подщелачиваютаммиаком до рН 9 10 Выделивашееся 20масло экстрагируют хлороформом, Хлороформ упаривают, а остаток растворяют в ацетоне. К ацетоновому раствору прибавляют спирт, насьпценный хлористым водородом до рН 2,3, Выпавший 25осадок дихлоргидрата отфильтровывают,промывают ацетоном, эфиром Выход4,15 г (90%), Белоснежные кристаллыс:т,пл, 258-259 С (разл из спирта,в запл, капилляре), В ИК-спектре основания (в хлороформе) наблюдаютсяполосы поглощения при 1500, 1530,1593, 1622 см(С=С, С=И), характер,ные для этого гетероцикла,Найдено, %: С 64,5; Н 8,0;35Б 12,3; С 1 15,1С Н.6 ИС 1.Вычислено, %: С 64,8; Н 7,8;И 12,1; С 1 15,3,П р и м е р :2 Дихлоргидрат 402 (1 адамантил) 9 морфолиноэтилимидазо(1,2 а)бензимидазола (1,б).Смесь 5 г (л 10 ммоль) гидробромида3-(1 адамантилкарбонил)2-имино-морфолиноэтилбензимидазолина и 45150 мл конц,соляной кислоты кипятятб 8 ч, следя за реакцией с помощьютонкослойной хроматографии, Затем реакционную массу охлаждают, подщелачивают аммиаком до рН 9 10, выделившееся масло экстрагируют хлороформом,Хлорофоом упаривают, а остаток кристаллизуют из петролейного эфира, Бес"цветные кристаллы с:т,пл, 126,512.Св Кристаллы растворяют в ацетоне и к полученному раствору прибавляют спирт, насьпценный хлористым водородом до рН 2.3, Осадок дихлоргидрата отфильтровывают, промывают аце тоном. Выход 4,31 г (91%) Белоснежоные кристаллы с т,пл, 257-258,5 С(разл., из спирта, в запл, капилляре).В ИК-спектре основания (в хлороформе) наблюдаются характерные полосыпри 1500, 1530, 1593, 1622 см(С=С, С=11).Найдено, %: С 63,0; Н 7,4;Ы 11,6; С 1 14,3.С, Н,10 С 1.Вычислено, %: С 62,9; Н 7,2;Б 11,; С 1 14;8,Биологическую активность заявляемых соединений определяют по их способности влиять на иммунную системуорганизма животных.Опыты проводят на белых мышахсамцах весом 20-22:г, Исследуемыесоединения Формулы 1 вводит внутрибрюшинно по 50 мг/кг в день ежедневно в течение 3 дней, Соединение 1,аиспользуют в виде раствора в 0,95%ном растворе хлористого натрия, асоединение 1,б в 2%-ном растворекрахмала.Контрольным животным аналогичнымобразом вводят соответствующий объемрастворителя, Через сутки после последней инъекции соединений животныхиммунизируют эталонным антигеномэритроцитами барана (по 0,5 мл 5%взвеси внутрибрюшинно). На 5-й деньпосле иммунизации животных забивают,собирают кровь и выделяют селезенки,Селезенки взвешивают, гомогенизируюти известным методом Заалберга определяют количество антигенсвязывающихили розеткообразующих клеток (РОК)среди 1 О мононуклеарных клеток селезенки. Результаты обрабатывают статистически с использованием "111 критерия Стъюдента, В сыворотке кровиопределяют титры антител (гемагглютининов) к эритроцитам барана в микротитраторе "Такачи" (ВНР) общепринятым методом, В каждой группе по 10мьппей, Титры антител выражают в видеиндекса депрессии (ИД): отношениесредних титров антител, выраженных в1 оя в опыте, к средним титрам антител - 1 оя в контроле, Величина ИДменее 0,7 свидетельствует о достоверной иммунодепрессииРезультаты экспериментов приведены в табл, 1 и:2, В табл,1 представлены данные влияния соединения Х,ана иммунный ответ у мышей к эритроцитам барана В табл 2 представленыДоза,мг/кгх 3 Острая тры гемагглю"нинов, ИД естК ам ичностьг/кгЛДу) ентроль (О, 95хлористого натДигидрохлоридмантил)-9-диэтэтилимидазо -(1имида зол аКонтроль (0,95хлористого натЦиклофосфан рзФ ия)+9,6 4(490-640) . 0,1 1,0 0,6 3,8+0,4 57,4+13 8,6+2,3а а 5 114 данные влияния соединения 1 б на им мунный ответ мышей к эритроцитам барана, Как видно из таблиц, предлагаемые соединения значительно угнетают как гуморальный, так и клеточный иммунитет, Индекс депрессии (ИД) для гемагглютининов составляет 0,2 и 0 1 соответственно, Количество ро- Э3 зеткообразующих клеток на 10 ядро- содержащих клеток селезенки при применении соединения 1,а снижено от 64+9,6 в контроле до 4+О;4, При введении соединения 1,б наблюдается снижение количества РОК от 64+9,6 в контроле до -3,8+0,4 При изучении острой токсичности соединений установлено, что ЛДо для соединений 1,а составляет 224 (180 270), а для соединения 1,б564 (490-640).Для сравнения по той же схеме испытывают эталонный иммунопрессантцитостатик циклофосфан, когорый на шел широкое применение в клинике, Циклофосфан вводят внутрибрюшинно в дозе 50 мг/кг ежедневно в течение 1 аименование соединени Контроль (2% крахмал) Дигидрохлорид 2 (1-адамантил) 9 морфблиноэтил амидазо(1,2-а)бензимидазола(онтроль (физ р-р) Циклофосфан 3039 б3 дней, а через сутки после последней инъекции препарата мышей иммунизируют эритроцитами барана соответствующим образом, На 5 й день пос 5ле иммунизации животных забивают ив сыворотке крови определяют титрыантител, а в селезенке - количестворозеткообразующих клеток в ответ наантиген - эритроциты барана,Как видно из таблиц, иммунодепрессивный индекс для циклофосфана составляет 0,6, а количество РОК в селезенке -8,6+2,3 (в контроле количество РОК = 57,4+13,2). ЛДо для циклофосфана при однократном внутрибрюшинном введении мышам равна 200 мг/кг,Таким образом, новые соединениягицрохлориды 9 замещенных 2 (1 ада20 мантил)имидазо(1,2 а)бензимидазолаобладают мощным иммунодепрессивнымдействием, более выраженным, чем уэталонного иммунодепрессанта циклофосфана, и менее токсичны, Эти свой25 ства заявляемых соединений могут бытьиспользованы при трансплантации органов и тканей, а также при леченииаутоиммунных заболеваний,Таблица 1