Способ определения содержанияазота b биологических материалах

Сова СоеетсиинСоциалистическихРеспублик ОП ИСАНЙЕ ИЗОБРЕТЕН ИЯ п 798590 К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ 61) Дополнительное к авт, свил-в М. Кл, а 01 Н 3 Юг 6 01 М 33/4823),Приорн ао делам нззбрзтеннй н открытнйпубликовано 23.01,81. Бюллетень РйДата опубликования описания 23.01 81(72) Авторы изобретения Л, Солнце апунко Всесоюзный научно. исследовательский инс мясной промышленности 1) Заявитель 54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ АЗО В БИОЛОГИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛАХ бретение оптосится кэота в мясопродук вано и кон оле определению сод ах и может быть качества готовых определения содержанияеских, материалах, предусматрзлизацию навески материалаведение смеси реактивоветной, реакции,. калоримет.ственное определение азо. ется длительиь тавляет около Цель изобретения - ускорение определенияПоставленная цель достигается тем, чтопри минерализации дополнительно используюперекись водорода, а в качестве одного иактивов смеси для проведения цветной реции - нитропруссид натрия.Количественное соотношение материной кислоты и перекиси водорода сос э резке ала, сертаил яет 1:2 испол ьзо пр трпродуктов.Известен способазота в биологичривающяй минесерной кислотой, вдля проведениярироваиие и количета 11.Однако этот способ явл(процесс минерзлизации со7 ч) и трудоемким. Для получения смеси реактивов для провадения цветной реакции дополнительно используют щелочной раствор гипохлорита натрия,а нитропруссид натрия смешивзтот с воднымраствором фенола, причем количественное соотношение раствора минерзлизата, растворафенола с нитропруссидом натрия и щелочногораствора гитюхлорита натрия составляет1:5:5.0Способ осуществляется следующим образом.Навеску мясопродукта в количестве 0,5 гпереносят в колбу Кьелъдзля, приливиот10 мл концентрированной серной кислоты иминерализуют при температуре кипения, периодически добавляя 30%-ной перекиси водородав количестве не более 5 мл. Процесс минера.лиэации заканчивается после того, как минарзлизат станет соверщенно бесцветным и прозрзчнъм и состзвляет в среднем 1 ч. Послеохлаждения минерзлизат переносят в мернуюколбу нз 250 мл и разбавляют дистиллирован.ной водой, доводя объем колбы до метки,после этого проводят вторичное водное разведсние разбавленного минерзлизата. Для этогоС 10 250 1.В 510 е СоставительИ. КутуковаТехред М. Рейвес Корректор А Гриценко Редактор Т. Киселева Заказ 10013/53 Тираж 91 ПодписноеВНИИПИ Государспюавго комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Раушская наб., д, 4/5 Филиал ППП Патент", г, Ужгород, ул. Проектная, 4 3 798590мл равзбавленного минерализата переносятв колбу емкостью 100 мл и доводят ееобъем дистиллированной водой до метки.Впробирку емкостью 20 - 25 мл вносят 1 млвторично разбавленного минерализата, затем3последовательно добавляют 5 мл реактива,содержащего, 10 г фенола и 0,05 г нитропруссида натрия в 1 мл дистиллированной водыи 5 мл реактива, содержащего 5 г едкогопатра и 0,042 г гипохлорита натрия в 1 мпдистиллированной воды, и перемешивают содер.жимое пробирки. Развитие синей окраски происходит при комнатной температуре, Максимуминтенсивности окраски достигается через30 мин. После прошествия 30 мин измеряютоптическую плотность окрашенного в синийцвет раствора спектрофотометрически наСФ - 4 А по длине волны 625 нм или капориметрически на ФЭКМ при помощи светофильтра с максимумом пропускания при вы20шеуказанной длине волны (красный светофильтр У 9) против воды в кювете прибора.Контрольный раствор готовят одновременнос опытным, заменяя минерализат соответствующим количеством воды и добавляя к ней2реактивы цвещой реакции. Измерение контрольного раствора производят также в отношенииводы, при расчете из величины оптическойплотности раствора вычитают величину опти.ческой плотности контрольного раствора.Стабильность окраски цветных растворов30сохраняется в течение 60 мин, и по полученнойпри измерении величине оптической плотностипо капибровочному графику находят концентрацию азота в количестве раствора, взятомна цветную реакщпо,,ИДля построения калибровочного графика используют стандартный раствор сернокислогоаммония, в 1 мл которого содержится 0,1 мгазота, Расчет производят по формуле:40 где Х - количество азота в исследуемойпробе, %;С - концентрация амта, найденная покалибровочному графику в соответствии с полученной оптическойплотностью, мкг/мл; ф250 - объем минерализата после перво.го разведения, мл;5 - объем разбавленного минерализатадля вторичного разведения, мл;100 - объем минерализата после вторич.ного разведения, мл;1 - объем раствора, взятый для проведения цветной реакции, мл;6 - навеека пробы, г;10 - множитель для перевода г в мгк100 - . множитель дпя перевода в проценты.Предлагаемое изобретение позволяет сократить время определения азота с 8 - .9 ч до 2,6 ч, т.е. приблизительно в 3 - 3,5 раза. Формула изобретения 1, Способ определения содержания азота вбиологических материалах, предусматривающийминерализацию навески материала серной кис.лотой, введение смеси реактивов для проведения цветной реакции, калориметрированиеи количественное определение азота, о тл и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью ускорения определения, при минерализации до.полнительно используют перекись водорода,а в качестве одного из реактивов смеси дляпровецения цветной реакции - нитропруссиднатрия.2. Способ по п. 1, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что количественное соотношениематериала, серной кислоты и перекиси водородасоставляет 1:20:10.3. Способ по п. 1, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, для получения смеси реактивовдля проведения цветной реакции дополнительноиспользуют щелочной раствор гипохлорита натрия, а нитропруссид натрия смешивают с вод.ным раствором фенола, причем количественноесоотношение раствора минералиэата, растворафенола с нитропруссидом натрия и щелочногораствора гипохлорита натрия составляет1:5:5,Источники информации,принятые во внимание при экспертизе1. Балаховский С. Д. и др, Методы хими.ческого анализа крови. М., Медгиз, 1953,с. 320-321.