Способ определения содержания азота в биологических материалах

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИН в 1511 601 ы зз м ъвз, МСАНИ БРЕТ ова, Э, С. Олей.В. Храпунковавательский ин. тоды хи 953, с, 320 Нф 798590,ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ ВТОРСКОМУ СВЩЕТЕЛ(56) 1, Балаховский С, Д. идр. Ммического анализа крови. Медгиз,321.2. Авторское свидетельство СССРкл. 6 01 й 33/12, 1979,(54) (57) 1, СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ АЗОТА В БИОЛОГИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛАХ, предусматривающий минерализацию навески материала серной кислотой и перекисью водорода, введение смеси реактивов для прове.,801026053 А дения цветной реакции, содержащей нитропруссид натрия, колориметрирование и количествен-., ное определение азота, о т л и ч а ю щ и й . с я тем, что, с целью ускорения процесса, при минерализации одновременно с серной кнс. лотой и перекисью водорода используют суль. фат калия, а для проведения цветной реакции в смесь дополнительно вводят щелочной раствор сэлицнлата натрия с сегпетовой солью и гипохлорит натрия.2, Способ по п. 1, о т л и ч а" ю щ н й с я тем, что количественное соотношение материала, серной кислоты, перекиси водорода и сульфата калия составляет 1;20:10:2,З.Способно п.1,отлича ющийся тем, что количественное соотношение минервли. зата, щелочного раствора салицнлата натрия с сегнетовой солью и нитропруссидом натрия, а также гипохлорита натрия составляет 0,5:47: :2,5.1026053 1Изобретение относится к способам определения содержания азота в мясопродуктах и может быть использовано при контроле качестваготовых продуктов в мясной промышленностии потребкооперации, 5Известен способ определения азота в крови,предусматривающий фенолгипохлоритный методколориметрического определения малых количеств аммиака 1).Этот способ определения содержания азота 10является длительным (процесс минерализациисоставляет около 7 ч) и трудоемким вследствие использования специального оборудованиядля перегонки аммиака.Известен также способ определения содержания азота в биологических материалах, предус.матривающий минерализацию навески матерна.ла серной кислотой и перекисью водорода, вве.,цение смеси реактивов для проведения цветной реакции, содержащей нитропруссид натрия, 20колоримегрирование и количественное определение азота 12),Однако известный способ определения содержания азота также является длительным (продолжительность 2,6 ч).25Цель изобретения - ускорение процесса,Поставленная цель достигается тем, что со.гласно способу определения содержания азотав биологических материалах, предусматривающему минералиэацию навески материала серной30кислотой и перекисью водорода, введение сме.си реактивов для проведения цветной реакции,содержащей нитропруссид натрия, колориметри.рование и количественное определение азота,при минерализации одновременно с серной кислотой и перекисью водорода используют сульфат калия, а для проведения цветной реакциив смесь дополнительно вводят щелочной растворсалицилата натрия с сегнетовой солью и гипохлорит натрия.40 При этом коЛичественное соотношение материала, серной кислотыперекиси водорода и сульфата калия составляет 1:20;10:2.Кроме того, количественное соотношение минерализата, щелочного раствора салицилата 45 натрия с сегнетовой солью и нитропруссидом натрия, а также гипохлорита натрия составля ет 0,5:47:2,5. При получении смеси реактивов для проведения цветной реакции используют раствор гипохлорита натрия, а нитропруссид натрия смешивают с щелочным раствором салицилата натрия и сегнетовой соли, при этом количественное соотношение раствора минерализата, щелочно. 55 го раствора салицилата натрия с сегнетовой солью и нитропруссидом натрия и раствора гипохлорита натрия составляет 0,5:47:2,5. 2Длительность предлагаемого способа 2 ч.П р и м е рНавеску мясопродукта вколичестве 0,5 г переносят в колбу Кьельдаля,приливают 10 мл концентрированной сернойкислоты, добавляют 1 г сульфата калия и ми.нерализуют при температуре кипения, периодически добавляя 30%-ную перекись водородав количестве не более 5 мл. Процесс минера.лизации заканчивается после того, как минерализат станет совершенно бесцветным и прозрач-ным, и составляет в среднем 1 ч, После охлаждения минерализат переносят в мерную колбуна 250 мл и разбавляют дистиллированной водой, доводя объем до метки,В стакан или плоскодонную колбу емкостью100 мл вносят 0,5 мл разбавленного минерали.эата, затем добавляют 47 мл реактива, дляприготовления которого смешивают 50 мл щелочного раствора салицилата натрия с сегнетовой солью и нитропруссидом натрия прирН (12,6, постепенно добавляя дистиллированнуюводу в количестве 410 мл и 20 мл 2 н, гидроокиси натрия. Затем приливают 2,5 мл реактива, содер.жащего гипохлорит натрия 0,125%-ной кон.центрации, и перемешивают содержимое колбы.Максимум интенсивности окраски достига.ется через 30 мин, после чего измеряют опти.ческую плотность на спектрофотометре СФ - 4 Апри длине волны 655 нм или на фотозлектро.колориметре ФЭКМ (красный светофильтрУ 9), Измерения проводят против воды в кювете прибора.Контрольный раствор готовят одновременнос опытным, заменяя минерализат соответствую.щим количеством воды.Стабильность окраски цветных растворовсохраняется в течение 2 ч,Концентрацию азота находят по калибровоч.ному графику согласно величине оптическойплотности концентрации испытуемого раствора,Для построения калибровочного графика испзльзуют стандартный раствор сернокислогоаммония, в 1 мл которого содержится 0,1 мгазота.Расчет производят- по формуле с250- 10 У; -- 100 (%),где х - количество азота в исследуемои про.бе, %;--- концентрация азота, найденная пос100калибровочному графику в соответствии с полученной оптической плот.ностью (мг на 100 мл);250 - обьем минералиэата после первогоразведения, мл;1026053 Составитель И. КутуковаТехред Т.Маточка Корректор С, Шекмар Редактор А, Курах Заказ 4550/36 Тираж 873 ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж - 35, Раушская наб., д, 45Подни снос филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул, Проектная, 4 3.е - навеска пробы, г;100 - множитель для перевода в проценты.Длительность предлагаемого способа опреде. ленин содержания азота в биологических материалах составляет 2 ч,4Использование предлагаемого способа позволяет сократить время определения содержанияазота с 2,6 до 2 ч, т.е. приблизительно в0,8 раза, а также повьппает безопасность 5 работы.