Способ дифференциации вирулентных и вакцинных штаммов вируса гриппа

Номер патента: 1430403

Опубликовано: 15.10.1988

Авторы: Дмитриева, Исаенко, Машукова, Царева, Юрченко

МПК: C12N 5/00

Метки: вируса, гриппа, изучения, используемый, качестве, клеток, культивируемых, мини-свиньи, почки, репродукции, тест-системы, штамм

...через 8, третийчерез 6 сут. Ввиду увеличения скорости роста к пятому пассажу клеткипересевают через 3-4 сут. Коэффициентрассева 1/3, В дальнейшем клетки культивируют в монослое с применениемсреды Игла МЕМ, содержащей 107. сывороткикрупного рогатого скота,нативной илиобработанной полиэтиленгликолем.Клетки снимают со стекла смесью 0,027-ного версена (1/2-2/3) и 0,257-ногораствора трипсина (1/2-1/3) беэ центрифугирования, дважды обмыв монослой прогретой до 36,5 С смесью ипроинкубировав в течение 5-10 мин.Далее клетки ресуспендируют в свежей среде и рассевают в сосуды длякультивирования с концентрацией100 тыс. кл. в 1 мл. Пересевы осуществляют через 3-5 сут с кратностьюрассева 1:4-1:5,Полученная линия перевинаемых клеток ПСМ имеет следующие...

Номер патента: 803479

Опубликовано: 15.12.1983

Авторы: Закусило, Фучижи, Христофоров

МПК: C12N 7/00

Метки: вируса, гриппа, дефектных, интерферирующих, частиц

...раство.ра, Элюаты снимают с интервалом в30 или б 0 мин до значительного снижения их титров гемагглютинина(0-134), Для предотвращения приростав используемый физиологический раствор и в пробирки для элюатов добавляют смесь антибиотиков.Проверка элюатов.У полученных элюатов кроме гемагглютинирующей активности проверяют инфекционность на куриных эмбрионах или на хорионаллантоисных оболочках куриного эмбриона (ХАО) . Инкубацию куриных эмбрионоь и ХАО проводят при температуре 35,5 С в тео,чение 48 ч,П р и м е р 1, Для выделениядефектных интерферирующих частиц(ДИЧ) берут вирус А/Гонконг/1/б 8,НЗ 2-2 с титром гемагглютинина1:128. После его накопления на куриных эмбрионах и замораживания100 мл вирусосодержащей аллантоисной жидкости адсорбируют...

Номер патента: 1337407

Опубликовано: 15.09.1987

Авторы: Горбушина, Гудков, Игнатьева, Поезжалова

МПК: C12N 7/00

Метки: вирусов, гриппа, клеток, культуре, репродукции, среда

...- 2,0 50 - 100 0,5 - 1,0 До 1 литра. Таблица 1 Гидролизат Пептон, /,Хлориды, 7 СтепеньГидролизат лактальбумина (57-ный концентрат) 0481 Гидролизаткуриных эмбрионов длямикробиологическихцелей 17010,0 300,030,0 1,3 Т 0.2 0.3000,566 Предлагаемый гидролизат тушек куриныхэмбрионов 380+87 э 5 Оф 53+От 3 ОэбО 06200,200 195 + 36,6 Таблица 2Аминокислотный состав ГЛА и ГКЭ одинаковой концентрации Е по отношению к про- тотипу Аминокислоты, г/л Гидролизат Гидролизатлактальтушек куриных эмббумина(предлагаемый) 0,082 0.,021 400 Аспарагиноваякислота 250 0,048 0,120 греонин би(три)дистиллированную воду, о л и ч а ю щ а я с я тем, что, с целью упрощения среды с сохранением стабильности высоких титров вирусов,она дополнительно содержит 0,257,-ый раствор...

Номер патента: 1613489

Опубликовано: 15.12.1990

Авторы: Голубев, Князева

МПК: C12N 7/00

Метки: антигенов, вируса, гриппа, нейраминидазных, птиц

...а зли в ают п о пр обир кам в объеме 5, 0-1, О мп и пр огревают в водяном ультратермостате 30 мин в температурном режиме 54-58 С, (пред"арительно устанавливают для каждого штамма в отдельности, до полного устранения геммаглютинации) . Затем пробы охлаждают водопроводной водой в течение 3-5 мин и определяют титр гемагглютинации с 5 Е-ным раствором эритроцитов петуха в капельной реак- . ции гемагглютинации. 11 ри отсутствии ге;д гглютинации в прогретом вируссод ржащем материале определяют нейра.гппцззную активность. Для этого к 0,2 мл прогретой вируссодержащей жидкости добавляют 0,2 мл фосфатно-со;:свого буфера и 0,2 мл овомуцина ио ььгержпвают при 37,0-37,5 С в течение 16-18 ч. В охлажденных до комнатной г мпературы пробах определяют...

Номер патента: 1635140

Опубликовано: 15.03.1991

Авторы: Зонова, Мохова, Смирнов, Торопова

МПК: G01N 33/53

Метки: вирусом, гриппа, организма, сенсибилизации

...по .пури. Возможно грименение в качестве антигена гриппозной инактивированной вакцины Гринтьл метод изготовления вирусного материала гарантирует его чистоту, стандаргость, стерильность и возмокность дпигепьносо ранения, Степень очистки вирусного материала по белку - не менее 98;4Антигенный материала цо оынеуказанной технологии получают из штаммов вируса гриппа А(РВ)8/34 (Н 1 М 1); А(пиес 59/79 К (Н 1 И 1); А(Чили)1/83/В 2 (Н 1 М 2); А(Ленинград) 385/808 (НЗГ 2), А(слиппины)59/1 (НЗИ 2); Х(НЗМ 2), А(Миссисипи)1/85 (НЗМ 2), а также из вируса болезни Ньюкасл (вакцинный штамм Н) и вируса парагриппа 1 типа Сендай Е,П р и м е р 1. Добровольца (серопогический М 97) вакцинируют вирусом гриппа А(Новошахтинск)3/86/15 (Н 1 М 1) кандидао...