Способ получения рнк-полимеразы
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Номер патента: 734262
Авторы: Гайнуллина, Лежнев, Панкратов
Текст
Союз Советских Социалистических Республик(22) Заявлено 1601.78 (21) 2570757/28-13с присоединением заявки Мо(23) ПриоритетОпубликовано 150580. Ьюллетень Мо 18Дата опубликования описания 150580 С 12 О 13/10 Государствениыйфкомитет СССР по делам изобретений и открытий(71) Заявитель Институт биологической физики АН СССР(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РНК-ПОЛИМЕРАЗЫИзобретение относится к микробио. логической промышленности, а именно к способу получения РНК-полимеразы.Известен способ получения РНК-полимеразы путем глубинного культивирования бактерий Евс)зег 1 сп 1 а со 11 на питательной среде, содержащей глюкозу в качестве источника углерода, а также источники азота, фосфора и минеральные соли, с последующим выделением целевого продукта (1),Недостатками известного способа являются невысокий выход и низкая активность РНК-полимеразы.Цель изобретения - повышение выхода и активности фермента.Указанная цель достигается тем, что бактерии культивируют на питательной среде прн исходной концентрации глюкозы 0,35-0,5 г/л до полного ее потребления, выдерживают в течение 20-80 мин, после чего в культуральную жидкость добавляют глюкозу в количестве 0,5-3,5 г/л.После полного потребления лимитирующего компонента происходит генерация микроорганизмов. Импульсная добавка избытка глюкозы вызывает активное деление клеток, Рост клеток непрерывно контролируют, Во время наиболее интенсивного роста клетокпроцесс останавливают, понижая температуру и прекращая подачу кислорода. При этом получают культуруклеток, большая часть которых находится в одинакоаом Физиологическомсостоянии и обладает высокой РНК-полимеразной активностью.П р и м е р. Бактерии Е. сое 1выращивают на питательной среде следующего состава, г/л: КНР 04- 3;ИаНРО 412 Н О - 15; Мз 04 - 0,2;ННт С 1 - 1; глюкоза - О, 45. Исходная,койцентрация клеток в среде - 1 х 15 к 10 вкл/мп. Культивирование ведут притемпературе 37 С, рН7,0. Аэрациюосуществляют барботировкой газас одновременным перемешиванием среды и распылением жидкости. С помощью 2 О кислородного датчика следят за отсутствием лимита по растворенномукислороду. В момент исчерпания глюкозы в среде концентрация клеток составляет 3 10 кл/мл. Через 35 мин 25 после полного потребления источника углерода в среду добавляют 0,5 г/лглюкозы, Рост клеток контролируют непрерывно при помощи проточной кюветы,Когда концентрация клеток достигает ЗО 5 108 кл/мл, прекращают псздачу кисло734262 1 О Формула изобретения Составитель Т. МелентьеваРедактор Н. Потапова Техред А,Щепанская Корректор Г,РешетникПодписное Заказ 2007/35 . Тираж 522ЦНИИПИ Государственного комитета СССРпо делам изобретений и открытий113035, Москва, М, Раушская наб., д, 4/5 Филиал ППП Патентф, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 рода и быстро понижают температуру среды до +бС, продувая охлажденный до -40 ОС азот Клетки отделяют центрифугированием и выделяют РНК - полимеразу известным методом. Выход фермента 12 мг/мл, активность 15000 ед/мг белка.Предлагаемый способ позволяет получить РНК-полимеразу с хорошим выходом и высокой активностью. Способ получения РНК-полимераэыпутем глубинного культивированиябактерий Евсйег 1 сй 1 а со 11 нау 1питательной среде, содержащей глюкозув качестве источника углерода, азота. а также источники фосфора й минеральные соли с последующим выделениемцелевого продукта, о т л и ч а ющ и й с я тем, что, с целью повышения выхода и активности фермента,бактерии культивируют иа питательнойсреде при исходной концентрации глюкозы 0,35-0,5 г/л до полного ее потребления, выдерживают в течение 2080 мнн, после чего добавляют в культуральную жидкость глюкозу в количестве 0,5-3,5 г/л. Источники информации,принятые во внимание при экспертизе,.1 Вея СЬатЬейео РМесай ьбзсбев опРьоонсйес "Асб РоЯугьегаье 1 готт ЕзсЬе сМа соб В" "ВоспетМеу ", 9М 26, И 70,
СмотретьЗаявка
2570757, 16.01.1978
ИНСТИТУТ БИОЛОГИЧЕСКОЙ ФИЗИКИ АН СССР
ПАНКРАТОВ ВЯЧЕСЛАВ ПЕТРОВИЧ, ЛЕЖНЕВ ЭНРИК ИВАНОВИЧ, ГАЙНУЛЛИНА СУРАЙЯ МЕЛИКОВНА
МПК / Метки
МПК: C12D 13/10
Метки: рнк-полимеразы
Опубликовано: 15.05.1980
Код ссылки
<a href="https://patents.su/2-734262-sposob-polucheniya-rnk-polimerazy.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ получения рнк-полимеразы</a>
Предыдущий патент: Способ выделения рибонуклеазы
Следующий патент: Штамм вниигенетика-6, продуцирующий глюкоамилазу
Случайный патент: Машина для регенерирования и уплотнения асфальтобетонных покрытий