Способ получения коэнзима а из дрожжей

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ Союз Советских Социалистических Республик(51)М. Кл.2 С 12 О 13/10 Государственный комитет СССР по делам изобретений и открытий(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КОЭЕНЗИМА А ИЗ ДРОЖЖЕ ЙИзобретение относится к областимикробиологии и касается способовполучения коэяэима А,Известен способ получения коэнзима А из дрожжей путем их суспендиро 5вания с последующим выделением целевого продукта горячей экстракцией,отделением экстракта и его очисткой 111,10Однако известный способ не обеспечивает получение высокоактивногокоэнзима А. Активность коэнзима Асоставляет 30000 ед/кг дрожжей.Целью изобретения является повышение активности коэнзима А, 15Эта цель достигается тем, чтодрожжи суспендируют в растворе, содержащем КН РО , К, НРОи МсБО, 7 Н О,затем суспензию дезйнтегрируютультразвуком, к дезинтеграту добавляют раствор, содержащий 1,412,75 вес.% смеси аденозин-триФосФата (АТФ), пантотената кальция ициотеина при их соотношении 1: (0,7-1,7): (0,3-0,4) и 5,5-6,5 вес,Ъ 25глюкозы, далее полученную суспензиюдезинтеграта инкубируют и экстрагируют целевой продукт,Способ иллюстрируется следнощимипримерами. 30 П р и м е р 1, В качестве исходного сырья используют биомассу хлебопекарных дрожжей Басспаговусез сегеч 1- з 1 ае, Активность коэнзима 18500 ед/кгбиомассы дрожжей.20 г данной биомассы суспендируютв 100 мл водного раствора, содержа -щего 2,7 г КН, РО, 3,5 г КНРО и 0,3 гМЧБО 47 Н О.Полученную суспенэию дезинтегрируют на ультразвуковом дезинтеграторе при силе тока О, 4 А, частотеультразвуковой волны 20 кгц,рН 6,5-7,0 и температуре +5 +2 С втечение 15 мин получают 110 мл дезинтеграта, содержащего клеточные оболочки, органеллы, отдельные клетки.К дезинтеграту добавляют 6,5 гглюкозы, 1,5 г пантотената кальция,0,85 г АТФ, 0,4 г цистеина. Реак -ционную смесь инкубируют анаэробнопри 37+2 С и рН 6,5-7,0 2 4 час,после чего коэнзим А экстрагируют,подогревая реакционную смесь до95+2 С и выдерживают при этой температуре 5 мин.Реакционную смесь разделяют центрифугированием,Активность коэнзима А составляет172000 ед/кг дрожжей.7 20011 Формула изобретения Составитель С. Дубовицкая Техред М.Петко Корректор В.Братяга редактор Н.Вирпо Заказ 10161/18 Тиран 522 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, ЖРаушская наб., д. 4/5Филиал ППП Патент, г, ужгород, ул. Проектная, 4 П р и м е р 2. В качестве исход ного сырья применяют спиртовые дрожжи Яассйагощусев сегеч 1 э 1 ае Актив - ность коэнзима А 27000 ед/кг биомассы дрожжей. 20 г данной биомассы суспендируютв 100 мл водного раствора, содержащего 2,7 г КН РО 4, 3,5 г К НРОи0,3 г МЯЯО 4 7 Н о.Полученйую суспензию дезинтегрируют на ультразвуковом деэинтеграторе МЯЕпри силе тока 0,.4 А, частоте ультразвуковой волны 20 кГц,рН 6,5-7,0 и температуре +5 +2 С втечение 5 мин. Получают 100 мл дезинтеграта, содержащего клеточныеоболочки, органеллы, отдельныеклетки.К дезинтегратору добавляют 6 гглюкозы, 1,02 пантотената кальция,0,8 г АТФ и 0,3 цистеина. Реакционную смесь инкубируют анаэробно нри37+2 С и рН 6,5-7,0 24 час, послечего коэнзим А экстрагируют, подогревая реакционную смесь до 95 + 2 С,и выдерживают при этой температуре5 мин.Реакционную смесь разделяют центрифугированием,Активность коэнзима А составляет) 84000 ед/кг дрожжей. Использование изобретения позволит получить высокоактивный коэнзим А.Способ получения коэнзима А издрожжей путем их суспендирования споследующим выделением целевогопродукта горячей экстракцией, отделением экстракта и его очисткой,о т л и ч а ю щ и й с я тем, что,с целью повышения активности коэнзима А дрожжи суспендируют в растворе, содержащем КН РО 4, КНРО 4 иМдЯ 04 7 НО, затем суспензйю дезннтегрируют ультразвуком,к дезинтеграту добавляют раствор, содержащий1.,4-2,75 вес,В смеси аденозин-ив-трифосфата, пантотената кальция20 и цистеина при их соотношении1;(0,7- 1,7): (0,3-0, 4) и 5,56,5 вес,Ъ глюкозы, далее полученнуюсуспензию дезинтеграта инкубируюти экстрагируют целевой продукт.25 Источники информации,принятые во внимание при. экспертизе1. МеЖойэ 1 п Епгушо 1, 1957,чо 1.111, р,907, Асад, Ргеэв М, У