Способ получения водорастворимых физиологически активных полимеров

лг . ОП ИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ Союз СоветскихСоциалистическихРеспубликосударстееннын комнтетСовета Инннстроа СССРоо делам нзабретеннйи открытий(72) Авторы изобретены Институт высокомолекулярных соединений АН СС Ленинградский научно-исследовательский институантибиотиков 71) Заяв 54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВОДОРАСТВОРИМЫХ ФИЗИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ПОЛИМЕРОВИзобретение относится к химии высокомолекулярных соединений, к синтезу полимерных физиологически активных веществ,обладающих ферментативной активностью,которые могут быть использованы в медицине и технике.Известен способ получения водорастворимых полимеров путем реакции полимеров, содержащих вльдегидные группы, си-аминобензолсульфоавннилндамн 1 . . 10Однако полимеры, полученные по указанному способу, обладают лишь антимикРобной антикварностью.Цепь изобретения состоит в разработкеспособа получения физиологически активных водорастворимых полимеров на основесополимеров Ы-виниппирропидона с акролеином, обладающих ферментативной активностью,Поставленная цель достигается путем 20присоединения физиологически активногоагента - протеопитического фермента террилитина - к сопопимерам К -винилпирролидона с акролеином азометиновой связьюс последующим ее восстановлением до С-Ясвязи, а непрореагировавших впьдегидныхгрупп сополимера до спиртовых ЯаЬН 4,Процесс проводят в водном буферном растворе при рН 8-10,5 в течение 30-60 минопри 15-25 С. Модифицированный полимерпосле очистки диализом против воды очищают с помощью гепевой хроматографии и выделяют лиофильной сушкой,П р и м е р 1. 0,05 г сополимеравинилпирролидона с вкролеином с 0,15 дп(г,содержащего 25 мол.% альдегидныхгрупп, растворяют в 1 мл дистилированной воды, затем добавляют при перемешивании в 1 мл 0,1 м фосфатного буфера (рН8,0), содержащего 0,01 г ферментногопрепарата терропитина с удельной протеопитической активностью 2,5 ПА/мг,Реакционную смесь выдерживают при,комнатной температуре в течение 1 час,добавляют 0,2 г ЗаВК, в 1 мл 0,1 мфосфатного буфера. Через 30 мин реакционную смесь наносят на колонку дпя фракционирования размером 160 см, заполненную гелем сафадакса Г. Собираютфракцию с объемом удерживания 16 мл,522198 Составитель А. ПереверзеваРедактор О. Кузнецова Техред О, Луговая Корректор С. Болдижар Заказ 3727/321 Тираж 630 ПодписноеЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССРпо депаи Изобретений и открытий113035, Москва, Ж, Рвушсквя наб., д, 4/5 Филиал ППП "Патентф, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 полимер выделяют лиофильной сушкой. Выход 0,012 г с общей активностью 5 ПА, что составляет 20% от теоретического.П р и м е р 2. По методу, описанному в примере 1, из 202,6 г недиапизо- ванного террипитина, содержащего 14% белка, с удельной активностью 29,5 ПА/мг, растворенного в 2,85 мп фосфвтного буфера с рН и ионной силой 1,5 М, и0,143 г сополимера виниппирропидонас акролеином получают 0,17 0 г модифицированного1 О полимера с общей активностью 835 ПА, составляющей 99% от исходной.П р и м е р 3. По методу, описанному в примере 1, из 0,67 г сополимера винилпирропидона с акропеином с Ч 0,12 дп/г и 0,135 г (337, 5 ПА) диапизованного и высушенного террипитина с удельной активностью 2,5 ПА/мг в боратном буфере (рН 10.2) с последующим восстановлением 0,313 г НаЪН и очисткойдиализом получают 0.085 г 94%) попимерного производного рипитина с общей активностью 330,8 ПА, что составляет 98% от исходной.Применение предлагаемого способа позволяет получать водорастворимые полимеры, обдвдающие протеопитической активностью, которые могут быть использованы в медицине при лечении ожогов, воспалительных очагов, а также в качестве тромбопитических средств и в технике дпя гидропиза белков, Использование высокомолекулярного террипитина в специальных мембранных реакциях позволит более эффективно проводить гидропитические процессы. Полимеры, полу 36 ченные по предлагаемому способу, характеризуются высокими ферментативными свойствами, активность составляет 98-99% от активности исходного фермента, и имеют спедующие преимущества перед нативным ферментом:более низкий коэффициент диффузии 5,9 10 см/сек по сравнению с 14, 6 10 см/сек для нативного террилитина, что замедляет его диффузию через мембраны тканей и аппаратов;большую термическую стабильность, чем нативный террипитин. Формула изобретения Способ получения водорастворимых физиологически активных полимеров путем взаимодействия сопопимеров Я - винилпирропидона и акропеина с физиологически активным агентом в растворе, о т п ич а ю щ и й с я тем, что, с целью получения полимеров, обладающих ферментативной активностью, в качестве физиологически активного агента используют протеолитический фермент террипитин и взаимодействие проводят в водном растворе при рН 8-10,5 с последующей обработкой полимера Яа ВН в тех же условиях. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе: 1. Авторское свидетельство СССР332103, кп. С 08 1 27/06, 1972 г.