Способ фильтрации растворов или суспензий микроорганизмов иили белков

Союз Соаетекия Соцмалмстическня Республик(51) М Гкудврствее 9 немтет Севвтв Мистров СССР вв делам изобретенй и ет 1 ит(23) Приорите 5.37 88.8 та опубликования описания 13,09.7(У 2) Авторы изобретения Ленинградский ордена Ленина политехнический институт им. М, И. Калинина) Заявите 4) СПОСОБ ФИЛЬТРАЦИИ РАСТВОРОВ ИЛИ СУСПЕНЗИЙ МИКРООРГАНИЗМОВ И ИЛИ БЕЛКОВации теряется худшается од 15шение .егоЦельюпотерь цв более обрете является умен кта и получени евого прод нородпом в ль достигае ствляют ч орого обра иными оди о .ледуюши ий разброс трах состаиде.тся тем, что фильтра ерез материал, систе зована бомбардиров ородиыми тяжелыми м травлением их тревор по размерам в ьляют 1-2",э,цию осуще ма пор кот кой ускоре ионами с п ков. Средг таких фильотс 0,6 Изобретение относится к медицинскойпромышленности, касается получения биологических препаратов и может быть использовано в технологических схемах очистки,"терилизации, концентрирования растворов,содержащих вирусы, бактерии и белки.Известен способ фильтрации растворовили суспензий, например, микроорганизмовзаключающийся в том, что исходный материал пропускают через пористую мембрану, гОнапример, типа Миллипор,Од"ако в процессе фильтчасть целевого продукта и унородность препарата. 2Использование такого материала позвг= ляет увеличить удельную скорость процесса фильтрации за счет воэможности подбора наиболее оптимального соотношения раэме ров пор мембран и размеров фильтрующего объекта, Размер пор монет составлять от четверти до четь 1 рех размеров фильтруемого объекта. Материалом для мембран могут служить синтетические и природные полимеры. В зависимости от материала мембраны фильтр может быть стерилизовав любым иэ известнъгх методов.П р и м е р г., Очистка и концентрирование вируса бешенства.Вирус бешенства обычным образом выращивают в культуре ткани почек сирий ского хомчка и смывают 100 мл питатель. ного раствора Эрла, Исходный титр и со держание белка в суспензия, составлпгот соответственно 3,3 11 Р 50/0,03 и 5,8 Д ОЭ . Суспензию после осветления2 отаиванием пропускают под давлениематм через лавсансвый фильтр с по ристостью 1,7" ,и сречним размером пор 630 А Ф 2 Ъ в течение 30 мин, Фильтрат520778 отбрасывают, а с фильтра собирают 7 мл суспензии с титром 5,11 3 50/0,03 и концентрацией белка 5,921 р 03 .Ко вечный продукт имеет следующие характеристики по сравнению с препаратом, попу ченным известным образом с использова нием фильтров . Миллипор (средний размер псо 150 А 1 10%; пористость 88%) (см. таблицу).П р и м е р 2. Стерилизация белковых растворов.Гомогенизированный встряхиванием 0,5%-ный лактальбумин на растворе Эрла (содержание белка 5 мг/мл) фильтруют через лавсановые фильтры (размер пор от 1000 А1% до 25 000 А3%; пориотость от 1 до 25%) под давлением 1,5 атм в течение 10-60 мин. Эти же препараты фильтруют через фильтры Миллипор в таких же условиях.Собирают. 990 мл раствора при содержании белка 5 мг /мл, т. е. без потерь целевого продукта. Контроль стерильности препаратов проводят с помощью посевов с дальнейшим пересевом на бактериальные питательные среды,Все препараты до и после фильтрации проходят микроскопный контроль. авсановый 10 8 у 3 О,ОЗ 100,0 ы растворов или суов и/или белковз пористую мем щ и й с я тем; ия потерь целевог зована одными аение их треков. , Малютина овая, Ко Составитель ко ТехГед О. Лор ктор Н 41 Подписное го комитета Совета М елам изобретений и от Ж-З 5, Раушская наб., д кз 2589/47 Тираж ЦНИИ ПИ Государственн по 113035, Мо:ква, истровытий4/5 жгород, ул. Проектная филиал ППГ Пате, г. Формула изСпособ фильтрациипензий микроорганизмопутем прэпускайия черебрану, о т л и ч а ючто, с целью уменьлен 5 10 25Препараты свободны от бактериальноймикрофлоры, а также от вирусов (гриппаи бешежтва), если средний размер лавсановых фильтров составляет 20008000 А. Удельная скорость фильтрации30-100 мл/мин см; ь Р 1 атм. Прнгиспользовании известного способа с применением фильтров Миллипор эффект стерилизации достигают при размере пор2200 4500 А. Удельная скорость фильтрагции составляет 2-10 мл/мин см; Ь Р1 атм,П р и м е р 3. Концентрирование вируса гриппа.120 мл аллантоисной культуры вирусагриппа (штамм В/Гонконг) с титром1-1024, предварительно очищенной путемадсорбции - элюции на эритроцитах, фильтруют через лавсановый фильтр (среднийоразмер пор 1000 А + 2%р пористость 3%)под давлением в течение 60 мин. Фильтрат(титр вируса 1: 16) отбрасывают, а сфильтра собирают 10 мл суспензии с титром 1:8192. Удельная скорость фильтраации составляет 0,05 мл/мин см; Ь Ратм,В результате происходит концентрированиевируса гриппа и 6 раз при сохранении100 О/ ной вирусной активности. продукта и получения его в более о ном виде, фильтрацию осуществляют )материал, система пор которого обра бомбардировкой ускоренными одно тяжелыми ионами с последующим тра