Способ очистки -аспарагиназы от пирогенов

Номер патента: 443514

Авторы: Аренс, Бауер, Вагнер, Ирион, Кауфманн, Рауенбуш

ZIP архив

Текст

(11), 443 БИ Союз СоветсиинСоциалистицесиинРеспублик 1) 3 аш (22) За нылй ОГ паент еио 18.12.68 (211290 соединением заявки 1389 16/28-13 68/231)МК с 07 т/О осуда рственный комитетСовета Мнннстров СССРоо делам нзооретеннйн открытнй 7157.7о 17 18 иоритет 06.С 4 68 Г 09,11.68 ковано 15.0974а опубликования 32) Г 1 )ыРОпубл(45) а Иностранцыто Вагнер, Клаус Бауер, Вильфрид Кауфманн Эрих енбуш, Алыоред Аренс и Эккар Ирион (ФРГ 2) Авторы изобрет 71) Заявите Иностранная йирм "Байер АГ" ФРГ( 5) СПОСОБ ОтИ(."1)(И Изобретение относитсЯ к фер ментной промышленности и представляет собой способ Очистки- аспарагиназы,Известен способ очистки. - 5 аспарагинаэы от пирогенов с помощью хроматографии на диэтиламенс этилц 8 ллюлозеПредлагается способ, согласно которому ,.(. -аспарагиназу очищают а от пирогейов тем, что фермент в присутствии аминокислоты, в частности глицина, и низшего алифатического спирта, предпочтительно метанола, при рН между 7,0 и 9,2 15 нагревают до 40-61 С, отделяют оса; дившиеся примеси из раствора, а затем проводят осаждение при рН 4,5 - 5,5 при помощи раствора поли этиленгликоля. 20,Для осуществления этого способа добавляют к раствору-аспаагиназы 10 об. метанола и околовес.М глипина. устанавливают зна чение рН 8-9. Целесообразно выдержать раствор затем в т 8 чение А-ь дней при температуре 50 ОС, После удаления осадившихся примесей при оН 5,5 проводят осаждение целевого продукта при помощи полиэтилеигли- КОЛЯ.Получаемый материал - концентрированная, свободная от пирогенов или содержащая лишь незначительные количества пирогенсваспарагиназа.П р и м 8 р 1. 1 о 0 г Ж -асаарагиназы с удельной активностью 100 и на 1 мг растворяют в 1 л воды, Добавляют 100 мл метанола и 40 г глицина и устанавливают рН раствора 8 9. Раствор выдерживают В теоЧЕНИЕ с)0 Ч Прк тЕМПЕратурЕ +50 Ст ОсажДаЮЩИЙСЯ ПРИ ЭТОМ ПРО- теин удаляют в течение 20 мин посредством центрифугирования при 6000 об,мин. Выделенный центрифугированием прозрачный материал доводят при помощи 2 н. НСС до рН 5.2 и осаждают путем фракционироСоставитель Й. якобсхРедактор Б )(орхнсх Техред Й ЙОгтстт 1 Ос Корректор Д,4 дттдЧ. Изд. %О Заказ ираж 5 д Подписное 1111111111 1 осударствениого комитета Совеа Министров СССР по делам изобретений и открытий Москва, 113035, Раушская наб., 4 11 нднрнитне Иатенг, Москва, Г 59, Бережковская иаб., 24 5 тЧО 1 ВВния при помощи 50-ного раствора полиэтиленГликожь Образовавшийся посла добавления йдблизительно 200 мл аолиэтиленгликоля осадок удаляют путем дентриФугирования, промывают ацетоном и сушат. Ньаод приблизительно ЗЗ Г с удельной активностью 200-235 на 1 мг материалаеП р и м е р 2. Работают ана логично примеру 1, но добавляют 200 мл метанола.П р и м е р 3. Работают аналОгично прмеру 1, но к раствору добавляют 100 мл зтанола.ПРЕДМЕТ ИЗОБРЕТЕНИЯСпособ очистки К -аспарагиназы от пирогенов, отличающийся тем, что, с целью повышения активности и 2 О ЧИСТОТЦаСПЗРЗГИНЗЭЫ в :1 ЩП 4 И раствор ,р аспарагинадц нагревают В РИУВИИ ЗМИНОКИСЛОТЦа ПРЕД- почтительно гликина, и низшего алифатического спирта, предпочтительно метанола, при температуре 40-61 С при значении рн 7,0-9,2 с последующим удалением осадившйхся примесей из раствора известным способом и осаждением -аспарагиназц при рБ 4,5-5,5 при помощи раствора полиЭТИЛЕНГЛИКОЛЯеПриоритет по признакам06,04,68 - освждение рмента в интервале указанных значений рН те 0 а ф09.11. 68 - осаждение фермента полизтиленгликолем в присутствии аминокислоты и низшего алифатического спирта.

Смотреть

Заявка

1389868, 18.12.1968

БАЙЕР АГ

ВАГНЕР ОТТО, БАУЕР КЛАУС, КАУФМАНН ВИЛЬФРИД, РАУЕНБУШ ЭРИХ, АРЕНС АЛЬФРЕД, ИРИОН ЭККАРТ

МПК / Метки

МПК: C07G 7/02

Метки: аспарагиназы, пирогенов

Опубликовано: 15.09.1974

Код ссылки

<a href="https://patents.su/2-443514-sposob-ochistki-asparaginazy-ot-pirogenov.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ очистки -аспарагиназы от пирогенов</a>

Похожие патенты