Способ получения 6-аминопенициллановой

о л ап 409 ЕТЕ Н Союз Советских Социалистических Республик;впс, т пагентас 1 13/06 явлено ЗО.Х.1968 ( 1279808/31- риоритет 31,Х,1967,679557, СШ Государственныи комите Совета Министров СССР по делам изобретений УДК 615.779,932(088.8 973. Бюллетень4 описания 17,71.19 публиковано ЗО.Х ата опубликован н открытии вторзобретсни Иностранецон Харви Вейнерые Штаты Америки)транная фирма- Майерз Компаниные Штаты Америки) Мильявнтсль Бристол Соединен ПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 6-АМИНОП ЕН И ЦИЛЛА НОВОЙ КИСЛОТЫовышение ние дли веденный без бенз6-АПК. е 6-аминопеницил Изобретение относится к области медицины, в частности к производству антибиотиков.Известен способ получения 6-аминопенициллановой кислоты, заключающийся в том, что раствор пенициллина, например пепициллгна Ч, икубируют с культурой Югеротттусев сачепди 1 ае прп температуре 25 - 60 С и рН 6,0 - 11,0 в течение 2 - 24 час с последующим выделением целевого продукта.Целью изобретения является пвыхода целевого продукта и сокращетельности процесса его получения.Достигается это тем, что ферментативное расщепление пенициллина осуществляют в присутствии гидразида, например бензгидразида, взятого в количестве 0,5 - 2,0 моля на 1 доль субстрата.П р и м е р 1. Приготовление клеток Ягер птусез сачепди 1 ае для гидролиза амидазы.Культуру Ягер 1 гпусез саспсц 1 ае А,Т.С.С.21138 засевают в сосуд с питательной средой, содержащей (%): сахарозы 2,5, фармамедиа 1,5, кукурузной муки 1,0, сульфата аммония 0,3, карбоната кальция 0,2. Культуру выращивают в течение 24 - -48 час. Затем 1 л выращенной культуры г. саетсае засевают в 9 - О л среды, содержащей (5 о); нутрисой 3,0, фармамедпа 0,5, хлорстого атрия 0,5, ка 1)боната кальция 0,3, цсрелозы 5,0, сахарозы 2,0. Культуру выращивают в течение 4 - 5 днеи,мицелий собирают фильтрованием пли центрифугированием, промывают и затем используют для энзпматического гидролнза пенициллина.5 П р н м е р 2. Получение 6-аминопенициллановой кислоты из 25 о-ного пенициллина Ч.Промытый мицелпй, отфильтрованный из600 тл культуральной жидкости, полученной по примеру 1, суспендируют в 1 л дистиллиро. о ванной воды, рН доводят до 7 и добавляют20 г пенициллина калия и 10 г 1%-ного бензгидразида. Температуру суспензии поддерживают на уровне 35 С. Добавлением гидроокиси натрия сохраняют первоначальное значение 15 рН (7). Пробы берут периодически и определяют хроматографических способом, Макси.мальный выход 6 - АПК получают между 2 - 4 час; он составляет 905 о и более.П р и м е р 3. Полученпс 6-ампнопеницил.лановой кислоты из пенициллина т.Промытый мпцслий, полученный из 500 лтлкульгуральнй жидкости псп собу, описанному в примере 1, суспспдируо вл дистнл.лированной воды, р 1.1 доводят до 7, добавляют 20 г пенициллина и 20 г 2%-ного бензидра.зпда. Выход 6-АПК составляет около 32%, по.лучекпых примерно за 2 - 6 час.Тот же самый опыт, прогидразида, дает 107 о выходазо Пример 4. Попучени409427 Предмет изобретения Составитель С. Щеиева Текрец Г. Васильева Корректор Е, Зимина Редактор Н. Спиридонова Заказ 1771 Изд, М 1838 Тираж 456 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5Загорская типография 3лановой кислоты из пенициллина С 1 при использовании Езс 11 ег 1 сЫа со 11 и 1%-ного бензгидразида.Берут 500 мл густой суспензии клеток Е. со 11 АТСС 11105 в фосфатном буферном растворе, рН 7.5 доводят до 8,5 раствором карбоната натрия. Добавляют 1 мг% лизозима, 0,5% дезоксихолата натрия, 0,01 моля этилен-диаминтетраацетата натрия и 0,4/о толуола, Далее суспензию выдерживают при температуре 37 С в течение 2 час, чтобы вызвать лизис бактериальных клеток, после чего рН доводят опять до 7,5 при помощи НС 1. Остаточные клетки, не охваченные действием лизиса, и другие нерастворимые остатки отделяют центрифугнрованием. Жидкий экстракт разбавляют дистиллированной водой до 1 л, добавляют 20 г пенициллина 6 калия и 1 О г 1/о-ного бензгидразида. Температуру поддерживают около 37 С. Максимальный выход б-АПК - 90% и более, получеиный за 1 - 2 час. Феноксиацетилбензгидразид был выделен и опознан,П р и м е р 5. Получение б-аминопенициллановой кислоты из 8%-ного пенициллина Ъ.Промытый мицелий, полученный из 500 мл культуральной жидкости по способу, описанному в примере 1, суспендируют в 1 л дистиллированной воды, рН доводят до 8,2. Затем добавляют 80 г пенициллина Ч калия и 30 г 3%-ного бензгидразида. Температуру поддеркивают на уровне 40 С при перемешивании,Пробы периодически отбирают и анализируют хроматографическнм способом. Максимальный выход 6-АПК получают в течение 4 - 6 час, он составляет 75/о,4Пример б. Получение 6-аминопенициллановой кислоты из пенициллина Ч и 2%-ного4-метилбензгидразида.Опыт проводят как в примере 5, с той раз 5 ницей, что 30 г бензгидразида заменяют 20 г4-метилбензгидразида. Выход 6-АПК - 51%,Затем вместо 80 г пенициллина 7 и 30 гбензгидразида (см. пример 5) используют120 г пенициллина Ч и 20 г 4-метилбензгидра 10 зида. Выход 6-АПК 35/о.П р и м е р 7. Получение 6-аминопепициллановой кислоты из пенициллина Ъ и 2/а-ногосалицилгидразида.Опыт проводят как в примере 5 с тем ис 15 ключением, что 80 г пенициллина Ч и 30 гбензгидразида, использованных в этом приме.ре, заменяют 120 г пенициллина Ч и 20 г 2%-ного сачицилгидразида. Получают 51/в 6-АПК,20 Способ получения 6-аминопенициллановойкислоты путем ферментативного расщепления пенициллина в водной среде при комнатной температуре или при нагревании при рН 6,0 -- 11,0 в течение 2 - 24 час с последующим выде лснием целевого продукта, отличающийся тем,что, с целью повышения выхода целевого продукта и сокращения длительности процесса, расщепление осуществляют в присутствии гидразида, например бензгидразида, взятого в 85 количестве 0,5 - 2,0 моля на 1 моль субстрата.