Способ выделения jersinia реsтis

)5 С 12 0 1/04ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ( р С) (Л ОЧ офилактике чуаратов, 1972. с. ие относится к микробиолоть использовано при диагноествляют следующим об Изобретегии и может бстике чумы. Способ осущ зом.С исследуем на питательную тивный агент(аг тибиотик фосф 50-100 мкг/мл,ых образцов делают посев среду. включающую селекар Хопингера рй 7,2) и аномицин в концентрации Чашки с посевами инкубиобретения является упрощеение чувствительности спосоЦельщ.изние и повышба,К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВ(56) Руководство по профилактике чумы./Под редН.И,Николаева. Саратов, 1972, с. 160.: Тезисы 10 научной конференции противочумных учреждений Средней Азии и Казахстана, Алма-Ата, 1979., вып. 1. с, 68-70,Вестник микробиологии. эпидемиологии и паразитологии, Саратов, 1938, т. 17, вып. 1-2, с, 20 - 28.Вестник микробиологии, эпидемиологии и паразитологии, Саратов, 1938, т. 17, вып. 3-4, с. 201-214.Известия Иркутского государственного научно-исследовательского противочумного института Сибири и Дальнего Востока, 1954, вып. 2, с, 11-12.Франклин Т., Сноу Дж. Биохимия антимикробного действия. Пер, с англ. М.: Мир, 1984, с, 50-51.Руководство по прмы,/ред. Н.И.Николаев, С122.(54) СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ УЕВЗйА РЕЯТЯ(57) Использование: медицина, микробиология, а именно выделение возбудителя из кантаминированного патологического материала и объектов внешней среды. Сущность изобретения: с исследуемых образцов делают посев на питательную среду - агар Хоттингера рН 7,2, содержащую селективный агент - фосфомицин - в концентрации 50- 100 мкг/мл, Чашки с посевами инкубируют в термостате при 28 С в течение 24-48 ч и проводят учет роста бактерий. Питательная среда с фосфомицином подавляет рост микробов рода Е. со, Рго 1 ецз чц 9 агз, Яатопеа турЫацгца не ингибирует роста как типичных, так и деФектных по плазмидам рЕга/Тох, рРзтштаммов Уегзиа резтз.1 табл.1730155 Выделение Уегз пса резОз из смешанных культур на агаре с различными концентрациями фосфомицинаруют в термостате при 28 С, Учет результатов производят через 24 - 48 ч,П р и м е р 1. Готовят бактериальную взвесь штамма вульгарного протея 19 в 0,9 о,-ном растворе хлористого натрия кон центрацией 10 м.к,/мл и смешивают с7взвесью культуры штамма чумного микроба 231 концентрацией 10 м.к./мл в одной пробирке в обьемным соотношениях 1:1, Затем смесь в количестве 0,2 мл высевэют на пла стинки агара, содержащего фосфомицин в концентрации 25, 50, 100 и 200 мкг/мл. Посевы инкубируют в термостате 24-48 ч. На чашках с 25 мкг/мл фосфомицина наблюдается рост изолированных колоний чумного 15 микроба и единичных изолированных колоний вульгарного протея. На чашках с 50, 100 и 200 мкгlмл фосфомицина роста вульгарного протея не отмечается, На среде, содержащей 200 мкг/мл фосфомицина, 20 количество колоний возбудителя чумы снижается (см. табл,).П р и м е р 2. Бактериальную взвесь штамма кишечной палочки Кв 0,9-ном растворе хлористого натрия концентрацией 25 10 м,к./мл смешивают с взвесью культуры штамма чумного микроба 231 концентрацией 10 м.к./мл в соотношении 1:1. Затем смесь по 0,2 мл высевают на пластинки агара Хоттингера рН 7,2 с фосфомицином в 30 концентрации 25, 50, 100 и 200 мкг/мл. Через 24-48 ч на чашках с 25 мкг/мл при 28 С наблюдается рост изолированных колоний чумного микроба и единичных изолированных колоний кишечной палочки. На чашках 35 с 50, 100 и 200 мкг/мл фосфомицина роста кишечной палочки не отмечается, На чашках с 200 мкг/мл фосфомицина число колоний возбудителя чумы снижается (см. табл.).П р и м е р 3. Бактериальную взвесь 40 штамма брюшнотифозных бактерий ГУ 24 в 0,9%-ном растворе хлористого натрия концентрацией 10 м.к./мл смешивают с взвесью культуры штамма чумного микроба 231 концентрацией 10 м,к./мл в объемном соотношении 1:1, Затем смесь по 0,2 мл высевают на пластинки агара рН 7,2 с фосфомицином в концентрации 25, 100 и 200. мкг/мл. Через 24-48 ч на засеянных чашках при 28 С с 25 мкг/мл фосфомицинэ наблюдался рост изолированных колоний чумного микроба и единичных изолированных колоний сальмонелл. На чашках с 50, 100 и 200 мкг/мл фосфомицина роста сальмонелл не отмечалось. На среде, содержащей 200 мкг/мл фосфомицина, количество колоний возбудителя чумыснижается (см. табл.).Установлено, что оптимальным количе-. ством фосфомицина в среде являетсяконцентрация 50-100 мкг/мл.Предлагаемый способ по своей чувствительности превосходит известный способ выделения чумного микроба, так как не ингибирует роста как типичных, так и дефектных по собственным плазмидам (рЕга/Тох, рРз 1 1) штаммов чумного микроба. Кроме того, он позволяет выделять возбудитель чумы при посеве единичных клеток и одновременно подавлять рост его антагонистов при больших посевных дозах. Способ может быть использован для выделения возбудителя чумы иэ органов загнивших животных, содержимого кишечника и объектов внешней среды.Формула изобретения Способ выделения Уегзпа резбз путем посева исследуемых образцов на питательную среду, включающую селективный агент, инкубирование посевов при 28 С и учет результатов через 24 - 48 ч, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью упрощения и повышения чувствительности способа, в качестве селективного агента используют антибиотик фосфомицин в количестве 50-100 мкг/мл среды.