Способ получения d-рибозы: . i „ii i iiu -lt; у-. ••: ц”. jaij i ilr-i

, Союз Советских Социалистицеских Республик Зависимое от авт. свидетельстваЗаявлено 31.11.1964 ( 891621/23-4) с присоединением заявкихл. 12 о,ПК С 08 Ь Государственный комитет по делам изобретений и открытий СССРПриоритет пуоликовапо 07,711.1965. Бюллетень14 К 547.455.522.022.2 (088.8) та опубликования описания 13 Х 111.96 Авторыизобретения Т. В, Б, М, Почиковская, 3. П. Сапожникова, М, А Л, П, Козлова сударственный институт прикладной химииВ лосов аявител И БОЗЬ 1 ОБ ПОЛУЧЕ час ение во акционную смесь ост мнатной температур смеси добавляют по ляют на 20Затем в теаплям 14 йгисная гругггга50 1Известен способ получения Р-рибозы, фиксированно меченной тритием, заключающийся в том, что Р-рибоно-у-лактон восстанавливают борогидридом лития, меченным тритием, в растворе пиридина. Для очистки разбавленный неактивным носителем продукт выделяют из реакционной смеси трехкратной перекристаллизацией из смеси метанола и 2-пропанола,С целью повышения чистоты целевого продукта, предложен способ получения Р-рибозы, фиксированно меченной тритием, заключающийся в том, что Р-рибоно-у-лактон восстанавливают борогидридом натрия, меченным тритием, в растворе сухого тетрагидрофурана. Для очистки разбавленный неактивным носителем продукт выделяют из реакционной смеси добавлением к раствору анилина и серно- кислого натрия, Образующуюся при этом комплексную соль а-анилин-гх 1-Р-рибопиранозида-Т с сернокислым натрием подвергают гидролизу.П р и м е р 1. Реакцию восстановления проводят в закрытой пробирке в атмосфере чистого азота. Выделившийся в процессе реакции тритий сжигают над окисью меди при 270 С до образования Т.О. К 0,0877 г (90,4 мкюри) борогидрида натрия-Т добавляют раствор Р-рибоно-у-лактона (0,5003 г) в сухом тетрагидрофуране (30 м,г),при ко е, ччаса к к млды.5 Реакционную массу упаривают досуха в вакууме при 35 - 40 С, Сухой остаток растворяют в воде, водный раствор обрабатывают смолами КУи ЭДЭГ 1 в статических условияхдо отсутствия натрия и кислоты. Полученный10 нейтральный раствор очищают углем, фильтруют и фильтрат упаривают в вакууме (35 --40 С) до сиропа.Выход чистого сухого сиропа 0,320 г (63%в пересчете на лактон). В этом количестве си 15 ропа найдено 78,5 мг Р-рибозы-Т (по анализ ), Д = - 15,5. Выход Р-рибозы-Т15,5 О, от теоретического в пересчете на лактон.20 По"ле анализа водный раствор Р-рибозы-Т снова высушивают до сиропа, как указано выше. Получают 0,270 г сиропа, содержащего 68,иг рибозы (10,5 мг рибозы израсходовано на анализ).25 К сиропу (0,270 г) добавляют водный раствор, содержащий неактивную Р-рибозу. (0,932 г). Чистый прозрачный водный раствор,содержащий синтетический сироп (0,270 г) инеактивную рибозу (0,932 г) снова упариваютЗО до сухого сиропа (1,3 г),Заказ 887/3 Тираж б 75 Формат бум. бОК 901/з Объем О,б изд. л. Цена 5 коп. ЦНИИПИ Гочударстсениого комитета по делам изобретений и открытий СССР Москва, Центр, пр. Серова, д. 4Типография, пр. Сапунова, 2 Сухой сироп растворяют в кипящем (абсолютном) метаноле (1,0 мл). К полученной смеси добавляют 1 мл изопропанола и заправку Р-рибсзы, Смесь оставляют на льду на 5 - 6 суток, Через сутки к смеси добавляют еше 1 мл изопропанола,Получают 0,770 г (77 о/ в пересчете на взятую рибозу) кристаллического продукта.Анализ кристаллов: содержание основного вещества 81,5,; азо = - 19,35 (в воде); удельная активность 4,72 якюри/г,Очистка кристаллов О-рибозы-Т,На очистку берут 0,610 ,иг Р-рибозы-Т, 0,75 мл метанола и 1,5 лл изопропанола.Получают 0,430 г кристаллов (70,5 о 4 в пересчете на взятую рибозу).Анализ кристаллов: содержание основного вещества 88,5 Я,; з 2 о = - 19,85, удельная активность 4,65 мкюри/г,Приведенные данные показывают, что очистка Р-рибозы-Т перекристаллизацией не является эффективньгм методом, так как содержание основного вещества в кристаллах остается низким (88,5 Я,) и увеличивается после дополнительной очистки лишь на 7 ЯПример 2. К 0,0807 г (83,4 мкюри) ВаВН 4 Т добавляют раствор 0,501 г Р-рибоно-у-лактона в 30 мл тетрагидрофурана,Получают 0,260 г чистого сиропа, содержащего 80,0 мг Р-рибозы-Т, ао= - 19,8, Выход Р-рибозы-Т 15,85 оуо от теоретического в пересчете на лактон.После анализа получают 0,190 г сиропа, содержащего 58,5 мг рибозы. Носитель (неактивная рибоза) 0,877 г, Всего рибозы 0,936 г. Из нее выделяют 2,75 г комплексной солиаанилин-И-Р-рибопиранозида-Т с сернокислым натрием. Разложением комплексной соли получают 1,07 г а-анилин-Х-Р-рибофуранозида-Т. Гидролизом последнего выделяют 0,570 г Р-рибозы-Т (в виде сиропа), Кристаллизацией сиропа в условиях описанных выше получают 0,330 г Р-рибозы-Т в виде кристаллического продукта.Анализ кристаллов: содержание основноговещества 98,5 о/,; а",; = - 23,6; удельная активность 2,95 икюри.Перекристаллизацией Р-рибозы-Т качество продукта не изменяется,15 Таким образом, выделение Р-рибозы-Т через комплеконую соль а-анилин-К-Р-рибопиранозида-Т с сернокислым натрием позволяет получать продукт, не требующий дополнительной очистки, пригодный для синтеза 2 О фиксированно меченных нуклеозидов и нук.леотидов. Способ получения Р-рибозы, фиксированно меченной тритием, восстановлением Р-рибоно-у-лактона с помощью комплексных гидридов металлов в среде органического растворителя с последующим выделением целевого продукта, отличаюцийся тем, что, с целью повышения чистоты продукта, в качестве комплексного гидрида металла используют борогидрид натрия, меченный тритием, в полученный раствор добавляют анилин и сернокис лый натрий и образующуюся при этом комплексную соль а-анилин-Ы-Р-рибопиранозида-Т с сернокислым натрием подвергают гид. рол изу.