Способ проведения твердофазного иммуноферментного анализа бруцеллеза

)5 60 3 54 ОСУДАРСТВЕННЬПО ИЗОБРЕТЕНИЯПРИ ГКНТ СССР ОМИТЕТОТКРЫТИЯ ЗС)Б Оп И Т КОМУ С В ТЕЛЬСТВУ Из раторн дофазн (ТИФА ной сер заболе инфекц обретение относитсяых исследований, в чаому иммунофермен, предназначенномуалогической диагносваний, в том числеий (например, бруце к технике лабостности к твертному анализу для лабораторики различных особо опасных ллеза, чумы и шение чувс римером, ь чисто вымыволокна сорисахаридныйорбент (нить)езанятые анировали нейтывороточный ия Волокно с разрезали на(54) СПОСОБ ПРОВНОГО ИММУНОФЗА БРУЦЕЛЛЕЗА.Леви и Т.А,Шимко 4371612,82.ог М 1 сгоЫо 11987, 138,ЕДЕНИЯ ТВЕРДОФАЗРМ Е НТН ОГО АНАЛ И )Цель изобретения - ительности анализа. Способ иллюстрируется и П р и м е р, На поверхност того полиакрилонитрильного бировали бруцеллезный пол антиген, Для этого иммунос опускали в раствор антигена. Н тигеном участки волокна блок ральными белком (бычий с альбумин). После высушиван адсорбированным антигеном(57) Изобр раторных дофазном (ТИФА), п ной серол заболеван инфекций изобретен сти анали качестве зуются ни локна, ко поверхно свойствам етение относится к технике лабо- исследований, в частности к тверу иммуноферментному анализу редназначенному для лабораторогической диагностики различных ий, в том числе особо опасных (бруцеллеза, чумы и т.п,). Цель ия - повышение чуаствительноза, Это достигается тем, что в твердофазного сорбента испольти из полиакрилонитрильного воторые обладают высокоразвитой стью, хорошими сорбционными и. 1 табл. отрезки по 3 см и каждый из них помещали в лунку 96-луночной иммунологической пластины, изготовленной из нейтрального материала, или использовали полистироловую пластину, участие которой в реакции блокировали предварительной обработкой нейтральным блоком. Пластина при этом использовалась многократно. Далее последовательно проводили все этапы ТИФА, Для промывки отрезков волокна непосредственно в лунках использовали крышку от микротитровальной пластины, в которой сверлили отверстия соответственно лункам пластины, а с прилегающей к пластине стороны заклеивали сплошь пластмассовой оконнной сеткой от насекомых. Такая крышка при плотном поижатии к пластине предотвращала выскальзывания при промывке отрезков волокна иэ лунок, не мешая свободному току промывочной жидкости через зарешеченные отверстия,Сравнение чувсгвительности ТИФА с применением полиакрилонитрильного иммуносорбента в форме ни, и и полистироловогоиммуносорбента в форме плато ИФА -ТИФА"- 1 ТИФ-ПА-ПА -ТИФА-,ТИФ -Г 1 С-П ТИсРйЯС ТИ р и м е ч а н и е. ПС-полистирол, ГА-полиакрилонитрил Составитель Д. ПанковскиТехред Ь 1, Моргентал дактор Н, Козлова Корректор М, Демчи Заказ 4464ВНИИПИ Госуд Тираж Подписноетвеиного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ 113 О 35, Москва, К, Раушская наб., 4/5 роизводственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 Для получения сравнительных данных проводили ТИФА с использованием в качеСтве твердой фазы полиакрилонитрильнога волокна в форме нити и ТИФА с использованием полистироловых пластин, параллельно исследовали на наличие Специфических антител ЗО сывороток крови больных бруцеллезОм людей. Данные свеены в таблицу, из которой следует, что при остоверности результатов левая часть таб, ицы - оценка вероятности различий при г 1 омощи критерия знаков: РО,О 5), ТИФА с использованием в качестве твердой фазы йолиакрилонитрильного волокна в форме иити обладает более высокой чувствительйостью по среднему геометрическому тиру, чем ТИФА с применением полистиролового иммуносорбента. Этот вывод подтверждается и корреляционными, и регрессивными анализами правая часть таблицы).Использование в качестве твердофаз 111 ого иммуносорбента для ТИФА полиакрилонитрильного волокна обеспечивает по Сравнению с существующими иммуносорбентами следующие преимущества: повышает чувствительность ТИФА в 3 раза, дает возможность одномоментно и на предвар 111- тельном этапе сорбировать иммунореактант (антиген, антитело) на большое 5 количество твердофазного сорбента с последующим отсроченным использованием иммуносорбента в ТИФА, что важно при производстве иммуноферментных наборов, позволяет многократно использовать одну и 1 О ту же иммунологическую пластину в качестве резервуара для проведения ТИФА.Формула изобретения Способ проведения твердофазногоиммуноферментного анализа бруцеллеза, 15 предусматривающий адсорбцию бруцеллезного полисахаридного антигена на твердофазный полимерный сорбент, внесение испытуемой сыворотки, инкубирование с иммуноферментным конаюгатом и суб О стратом с последующей количественнойоценкой по связавшемуся с иммуносорбентом ферменту, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения чувствительности анализа, в качестве полимерного сорбента ис пользуют нить из полиакрилнитрила.