Способ определения репарационной способности радиопротекторов

СОЮЗ СОВЕТСКИХСОЦИАЛИСТИЧЕСКИХРЕСПУБЛИК 3552 А 19 51)5 6 01 Й 33/ ЯД ИСА ЗОБРЕТЕН АВТОРСКО ВИДЕТЕЛЬСТВ к разль изошение тигаетпрельзуют ой киса ДНК дезок- нцент 5-0,0 ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ РЕПАРАЦИ, ОННОЙ СПОСОБНОСТИ РАДИОПРОТЕКТОРОВ(57) Изобретение относится к радиационной химии и может быть использовано в молекулярной радиобиологии для отбора соединений, способных репарировать углеводную часть ДНК на радикальной стадии от радиаИзобретение относится к радиационной химии и может быть использовано в молекулярной радиобиологии для отбора соединений,в том числе радиопротекторов, способных репарировать углеводную часть ДНК на радикальной стадии радиационных повреждений, приводящих к разрывам полинуклеотидных цепей,Цель изобретения - упрощение и повышение чувствительности способа,Указанная цель достигается тем, что в способе определения репарационной способности радиопроетекторов (т.е, способности восстанавливать первоначальную структуру поврежденной молекулы), включающем облучение растворов компонента ДНК и смеси его с радиопротектором, добавление реагента к облученным растворам для спектрофотометрического определения продуктов облучения и оценку эффекта репарации по уменьшению оптической плотционных повреждений, приводящих рывам полинуклеотидных цепей. Це бретения - упрощение и повы чувствительности способа, Цель дос ся тем, что в качестве реагента для о ления продуктов облучения испо 0,6 о-ный раствор 2-тиобарбитуров лоты (ТБК), а в качестве компонент используют 10-2 10 моль дм 2 си-Д-рибозу, причем соотношение ко раций-дезо кси-Д-рибоз ы радиопротектора составляет 1:(0,00 соответственно. 1 ил. ности раствора в присутствии радиопротектора, в качестве продуктов облучения измеряют ТБК-активные продукты, а в качестве компонента ДНК используют 101-2 10 моль дм 2-дезокси-Д-рибозу, причем соот- О ношение концентраций 2-дезоксирибозы и О радиопротектора составляет 1:(0,005-0,05) (г) соответственно. (ЛП р и м е р. Для оценки репарационных (Л свойств протектора (цистеина) в отсутствие кислорода водные растворы смесей дезоксирибозы (ДР) (2 10 моль/л) и-цистеина (5 10 -1 10 моль/л), насыщенные адго- Г ном или й 20, облучают гамма-квантами Со в дозах 100-200 г.Анализ продуктов радиолиза ДР проводят следующим образом.1 мл раствора дезоксирибозы, облучен- ного гамма-квантами Со, в дозах 100-200 г, смешивают с 2 мл раствора тиобарбитуровой кислоты(ТБК) (0,6 О. рН 2). Смесь нагре1693552 ме того, имеет более высокую чувствительность, чем известный способ. Формула изобретения 4 г оставитель А.Донцовехред М,Моргентал Корректор Т.Пали Редактор М,Бланар Заказ 4076 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ ССС 113035, Москва, Ж, Раушская иаб., 4/5оизводственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 1 вают в течение 20 мин на кипящей водяной бане, охлаждают до комнатной температуры. Определяют оптическую плотность розового пигмента на спектрофотометре при 532 нм относительно контроля - прогретой 5 смеси ТБК с необлученным раствором дезоксирибозы. Используя молярный коэффициент экстинкции, равный 1,45 10 л моль см, рассчитывают концентрацию продуктов раДиолиза ДР и их радиационно-химический 10 выход 6, молекул/100 эВ).На чертеже приведена зависимость относительного радиационно-химического выхода (6/60) продукта радиолиза ДР от концентрации цистеина ЦИС 1/2). 15С ростом концентрации цистеина выход продуктов радиолиза ДР уменьшается, Иэ Экспериментальных зависимостей определяют концентрацию цистеина (Цис 12), при которой за счет репарации выход продуктов 20 радиолиэа ДР уменьшается в два раза, т.е. ЬЗр/Ск=0,5.Предлагаемый способ для реализации требует меньшее количество реактивов, времени, концентрации протектора и, кро Способ определения репарационной способности радиопротекторов, включающий облучение растворов компонента ДНК и смеси его с радиопротектором, добавление реагента к облученным растворам для спектрофотометрического определения продуктов облучения и оценку эффекта репарации по уменьшению оптической плотности раствора в присутствии радиопротектора, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью упрощения и повышения чувствительности способа, в качестве продуктов облучения используют ТБК-активные продукты, а в качестве компонента ДНК используют 10 -2 102 моль дм з 2-дезокси-Д-рибозу, причем соотношение концентраций 2-дезокси-Д-рибозы и радиопротектора составляет 1:(0,005-0,05 соответственно.