Способ исследования взаимодействия лейкоцитов и тромбоцитов

зобретение относится к медицине жет быть использовано в гематологии,Цель зобретен оба и по упроспе и я являет щение е щение спос вь го ц -фичности.Способ осуществляют следующим разом.Богатую лейкоцитами и тромбоцитами плаэму получают из стабилизированной 3,8 Е-ным раствором цитрата натрия венозной крови путем отстаивания в течение 30 мин при комнатной температуре.Плазму отделяют от эритроцитов и разливают в две центрифужные пробирки, одну из которых центрифугируют в течение 1 мин при 380 я для осаждения лейкоцитов, Белейкоцитарный надосадок богатый тромбоцитами переносят в отдельную пробирку. Эритроциты, оставшиеся после отстаивания крови, трижды отмывают 0,857-ным раствором хлорида натрия, полученную таким образом суспенэию отмытых зрит обГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯПРИ ГКНТ СССР(54) СПОСОБ ИССЛЕДОСТВИЯ ЛЕЙКОЦИТОВ И г(57) Изобретение относится к медицине и может быть использовано в гематологии. Целью изобретения является упрощение и повышение специфичности способа исследования взаимодействия лейкоцитов и тромбоцитов. Способ заключается в определении времени образования клеточных агрегатов путем индукции взаимодействия лейкоцитов и тромбоцитов (в образцах нативной плазмы) гемолиэатом эритроцитов в последовательно увеличивающихся разведениях. роцитов в количестве мл гемолизируют в пробирке, со жащей 1 мп дистиллированной водь ( аточное разведение, обозначаемое как 10 ), Затем из маточного разведения, используя 0,857.-ный раствор хлорида натрия, готовят рабочие разведения;10 , 10 , 10 и т, д. Готовят две центрифужные пробирки: в одну из них наливают 0,2 мп плазмы, содержащей только тромбоциты без лейкоцитов (контроль), в другую - 0,2 мл плазмы, богатой лейкоцитами и тромбоцитами (опыт).Пробирку с опытным обраэцом плазмы (с лейкоцитами) и пробирку с гемолизатом в разведении 10прогревают в микротермостате при 37 фС в течение 1 мин, Затем 0,05 мл гемолизата добавляют в пробирку с исследуемой плазмой и тотчас включают секундомер. Определяют время появления первых видимых глазом в проходящем свете клеточных агрегатов (в ниде мелких 1 крошек"). Повторяют исследо1499234 3ванне с контрольным образцом плазмы (без лейкоцитов) и тем же разведением гемолизата. Лналогично проводят исследовайия с другими разведениями гемолизата эритроцитов (ГЭ). Обычно5 используют два разведения. "1 О и 10 исследования с промежуточными разведениями в целях экономии плазмы можно не проводить. По полученным результатам определяют разницу во времени агрегацпи ЛВЛ в опытном (с лейкоцитами) и контрольном (без лейкоцитов) образцах ппазмы, которая характеризует степень взаимодействия лейкоцитов и тромбоцитов.П р и м е р, Вольная М,Л. 52 лет, страдающая хроническим мижтлейкозом Клинические проявления тромбогеморрагпческого характера отсутствуют. 20 Показатели коагуляционного гемостаза без каких-либо отклонений от нормы. Агрегация.тромбоцитов (14 и 16 с на разведениях 10 и 10 " соответствепно) также в пределах поря. Одна ко исследование вэаимодействия лейкоцитов с тромбоцитами выявило выраженную активацию этого процесса; йВА 4составил 4,5 и 28 с на разведениях ГЭ 1 О и 10 соответственно (время смешанноклеточной лейкоцитарно-тромбоцитарной агрегации составило на разведении ГЭ 10 9,5 с и 1018 с принорме 11,0+О,б с и 39,01,7 с соответственно). Таким образом, была выявлена повышенная степень тромбогенного риска (предтромботическое состояние) и с профилактической целью больной были .назначены дезагреганты. Формул а из обретенияСпо со 6 и сследо в ания вз аимодействия лейкоцитов и тромбоцитов путем определения времени образования клеточных агрегатов после добавления индукторов агрегации, о т л и ч а ющ и й с я тем, что, с целью повышения специфичности и упрощения способа, в качестве индуктора взаимодей - ствия лейкоцитов и тромбоцитов используют гемолизат эритроцитов в последовательно увеличивающихся разведениях, а исследование проводят в образцах нативной ппазмы,Составитель А.Чирков Техред И. Ходанич Корректор М.Максимишинец Редактор И.Горная Заказ 4684/42 Тираж 789 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 13035, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г,ужгород, ул. Гагарина,101