Способ цитологического определения активности клеток

Номер патента: 1499149

Автор: Эренпрейса

ZIP архив

Текст

ечатки гепатоци ок асцидной геовят мазки-отп ени и из кле Зайдела, Маз тов п ают в одс атомь приго-. мазки, 1-3 мин временно рованные е 10 мин, Одно ают свежефикси е фиксируют в стве фиксатораэтанол, Лале ече авли тече торь ют абсо- промываНС 1 в рим В каче лютный ют в в течени мывают е мазк оде, выдерживают в 1 н е 1 мин при 60 С, пов в воде, ацетатном бу орно .пр ере 0,1 М ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМПРИ ГКНТ СССР ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТ(71) Латвийский научно-исстельский институт эксперими клинической медицины(56) Колесникова Л.И. Снязэтидия бромида ядрами регеи крысы. - Цитоло9-1035. менно к онкологии.Целью изобретения являетс очности способа,об осуществляют следующим 801499149(54) СПОСОБ ЦИТОЛОГИЧЕСКОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ КЛЕТОК(57) Изобретение относится к областимедицины, а именно к онкологии. Способ предназначается для полученияболее точной оценки флуоресценцииядер клеток опухоли. Способ осуществляют приготовлением мазков-отпечатков из клеток гепатомы, тимуса, После фиксации мазки обрабатывают в двухрежимах, при подсушивании в течение7 - 1 О мин и беэ подсушивания, При окрашивании акридиновым оранжевым в зависимости от режима обработки у акти"вированных клеток интенсивность флуоресценции выше, что позволяет вьщелить эту популяцию клеток, Цельюизобретения является повьппение точ(рН 4,1 в течение 5 мин).и окрашива ют акридиновым оранжевым, приготовленным на ацетатном буфере в коицен рации 10 М. При исследовании мазко флюоресценцию возбуждают ультрафиол товым светом с длиной волны 360 нм, Изучают спектр флюоресценции каждог ядра, Интенсивность флуоресценции интеркалирования при 530 нм определяю на максимуме по высоте вертикали от базисной прямой до точки пересечени кривой спектра при данной длине вол ны. Зависимость интенсивности флуоресценции ядер (усл. ед,) от подсушивания мазка следунчая, Гепатоциты подсушенные имеют интенсивность флу оресценции 60+4, неподсушенные1499149 Составитель Л. СтебаеваТехред Л.Сердюкова Корректор Т. Палий Редактор О. Юрковецкая Заказ 4680/38 Тираж 789 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 11303 5, Москва, Ж, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-издательский комбинат Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,10 35913. Клетки гепатомы подсушенные имеют интенсивность флуоресценции 164+13, неподсушенные - 867, Следовательно, неактивированные гепатоциты не меняют свою флуоресценцию в зависимости от подсушивания, тогда как активированные, т.е. клетки гепатомы, резко увеличивают свою флуоресценцию. Аналогичные результаты получены при стимуляции тимоцитов фитогемагглютинином,П р и м е р. Из тимоцитов готовят мазки-отпечатки. Далее мазки обрабатывают предложенным способом. фиксацию проводят в течение 5 мин. При флуоресценции определяют следующую активность клеток. Контроль без фитогемагглютинина. Подсушенные мазки дают флуоресценцию 1,7+0,6, неподсушенные - 1,6+0,6. При стимуляции клеток флуоресценция равна у подсушенных 3,4, неподсушенных - 1,6. Стимулированные клетки фитогемагглютинином при подсушивании значительно усиливают флуоресценцию. Предложенный способ позволяет поинтенсивности флуоресценции в мазках-отпечатках; обработанных в двухрежимах (подсушивание и без него),более точно определить активированное состояние клеток, особенно важно это в онкологии при определениихарактера роста опухоли.1 ОФормула изобретения Способ цитологического определения активности клеток путем приго товления мазков, их фиксации, окрашивании ДНК акридиновым оранжевыми определении активности клеток пофлюоресценции ядер при длине волны530 нм, о т л и ч а ю щ и й с я 20 тем, что, с целью повышения точностиспособа, определение активности клеток ведут параллельно на двух мазках, причем один мазок перед фиксацией сушат при комнатной температурев течение 7-10 мин, а активностьклеток определяют по разнице активности в двух мазках,

Смотреть

Заявка

4147728, 17.11.1986

ЛАТВИЙСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ И КЛИНИЧЕСКОЙ МЕДИЦИНЫ

ЭРЕНПРЕЙСА ЕКАТЕРИНА АРОНОВНА

МПК / Метки

МПК: A61B 10/00, G01N 33/48

Метки: активности, клеток, цитологического

Опубликовано: 07.08.1989

Код ссылки

<a href="https://patents.su/2-1499149-sposob-citologicheskogo-opredeleniya-aktivnosti-kletok.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ цитологического определения активности клеток</a>

Похожие патенты