Способ получения цитохрома с
Похожие патенты | МПК / Метки | Текст | Заявка | Код ссылки
Номер патента: 1242523
Авторы: Гуссейнов, Кондрасенко, Трубачев, Филиппова
Текст
СОЮЗ СОВЕТСЕВСОЦИАЛИСТИЧЕСНРЕСПУБЛИК А 6,С 12 Р 1/06// (С 12С 12 К 1:05) ОСУДАРСТВЕННЫЙ НО ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕН ЕТ СССРОТКРЫТИИ ЕТЕН СВИДЕТЕЛЬСТ 25и СО АН ССО.А.Гуссей пова К.Н. 1.Васгер. 298-305, НИЯ ЦИТОХРОМА С сы Асай 8 епез м ступенчатым ПИСАНИЕ ИЗО(56) Рап 8 Р,Я., Вцгг 1 зг 1 о 1 оду, 1968, 96, 11 2 (54)(5) СПОСОБ ПОЛУЧЕпутем обработки биомас епгерйцз с последующи фракционированием полученного экстракта сульфатом аммония до 75 и 1002-ного насыщения и очисткой целевогс продукта ионообменной хроматографией на ДЭАЭ-целлюлозе и КМ-целлюлозе, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения выхода целевого продукта, биомассу А 1 сайдепев епггерйцз штамм Е - 1 подвергают автолизу при 20-40 С в течение 6-24 чУ а перед хроматографией проводят гель-фильтрацию на сефадексе С 50.Составитель Г. СмирноваТехред О,Сопко Корректор Е.СиРохман Редактор В.Петраш Тираж 490 ПодписноеВНИИПИ Государственного комитета СССР.по делам изобретений и открытий1.13035, Москва, Ж, Раушская наб., д,4/5г Заказ 3668/26.1 роизводственно-полиграфическое предприятие, г.ужгород, ул. Проектная,4 124252Изобретение относится к микробиологической промьппленности и касается получения цитохрома С из микроор" ганизмов.Цель изобретения - повышение вы - хода целевого продукта.П р и м е р . Биомассу А 1 са 118 е.пез епгорЬцз, полученную на полупромьппленной установке, сепарируют до концентрации сухого вещества О 80 г/л и выдерживают при 20-40 С в течение 6-24 ч при постоянном перемешивании. Полученную суспензиюцентрифугируют. К экстракту приэнергичном перемешивании постелен но добавляют сульфат аммония до75%-ного насьпцения. Осадок отделяют центрифугированием и отбрасывают, К жидкой фазе, которая содержитцитохром С, добавляют сульфат аммония до полного насыщения. Осадок, полученный в результате центрифугирования, суспендируют в 6 мл0,005 М фосфатного буфера рН 7,5, содержащего 0,1 М НаС 1, и наносят 25 на колонку с сефадексом С 50 .(3 Х 100 см), предварительно уравновешенную тем же буфером. При гель- фильтрации элюат выходит пятью пиками. Цитохром С находится во. фракциях второго пика,.которые собирают, диализируют против 0,005 М фосфатного буфера рН 7,5 и наносят на колонку с ДЭАЗ-целлюлозой ( 2,5 х х 30 см), уравновешенную тем же буфером. Цитохром С не сорбируется на35 ДЭАЗ-целлюлозе и выходит с фронтом, растворителя. Фракции, содержащие цитохром С, собирают и наносят на колонку с КМ-.целлюлозой (2,5 х 30 см),3 2уравновешенную тем же. буфером. Цитохром С адсорбируется на целлюлозе. Колонку промывают 500 мл 0,005 М фосфатного буфера рН 7,5. Сорбировавшиеся белки элюируют градиентом ИаС 1 от 0 до 0,02 М в том же буфере. Цитохром С элюируется при содержании ЯаСЬ 0,07-0,1 М.Фракции, содержащие цитохром С, диализуют против буфера, не содержащего БаСЬ, и концентрируют рехро-. матографией на колонке (2 х 20 см ) с КМ-целлюлозой. Элюируют цитохром Сьминимальным объемом 0,005 М фосфатного буфера рН 7,5, содержащего 01 М НаС 1. Элюат диализуют и лиофильно сушат. Выход 300 мг из 1 кг биомассы (на сухой вес).П р и м е р 2.Биомассу А 1 саЙ 8 епез епСгор 1 шз 21, лиофильно высу- . шенную, диспергируют в воде до концентрации 50 г/л, добавляют толуол (002-1%) и выдерживают 24 ч при постоянном перемешивании. Осадок отделяют центрифугированием и супернатант фракционируют сульфатом аммония, как в примере 1. П р и м е р 3. Биомассу А 1 саЙ 8 епез ептгорЬцз 2-1, лиофильно вы" сушенную, диспергируют в воде до концентрации 100 г/л и далее осуществляют способ по примеру 1.Выход целевого продукта 250-350 мг из 1 кг биомассы (на сухой вес).Чистота получаемого продукта 92-98%.По сравнению с известным способом увеличивается выход цитохрома С с 3% от суммарного содержания в исходном Материале до 27%.
СмотретьЗаявка
3575412, 24.01.1983
ИНСТИТУТ БИОФИЗИКИ СО АН СССР
КОНДРАСЕНКО АЛЕКСАНДР ВАСИЛЬЕВИЧ, ГУССЕЙНОВ ОЛЕГ АЛАДДИНОВИЧ, ТРУБАЧЕВ ИВАН НИКОЛАЕВИЧ, ФИЛИППОВА ВАЛЕНТИНА КУПРИЯНОВНА
МПК / Метки
МПК: C12P 1/06
Метки: цитохрома
Опубликовано: 07.07.1986
Код ссылки
<a href="https://patents.su/2-1242523-sposob-polucheniya-citokhroma-s.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентов СССР">Способ получения цитохрома с</a>
Способ получения пищевого белкового продукта из биомассы микроорганизмов
Номер патента: 791257
Опубликовано: 23.12.1980
МПК: C12D 13/06
Метки: белкового, биомассы, микроорганизмов, пищевого, продукта
...аммиака и клеточной массы размешивают30 мин при 20 ОС. Для разделения твердой и жидкой фаз смесь фильтруют итвердый остаток промывают один раз300 мл метанола, повторно фильтруюти затем оба Фильтрата объединяют,Раствор имеет коричневый цвет и содержит липиды загруженного исходного вещества.Далее метанол и аммиак удаляютпутем вакуумной дистилляции 1100 торр400 С). Остаток, составляющий9,5 вес.Ъ загруженного клеточногоматериала, имеет темнокоричневыйцвет и представляет собой плохо пахнущую пасту, состоящую из свободныхжирных кислот, глицерина, фосфолипидов и вторичных метаболитов.Полученный в процессе фильтрациитвердый остаток экстрагированной клеточной массы сушат в вакууме(100 торр) при 40 ОС 5 часов и получают 90 г обезжиренной...
Способ получения белковых продуктов из биомассы дрожжей
Номер патента: 379616
Опубликовано: 01.01.1973
Автор: Авторы
МПК: A23J 1/18
Метки: белковых, биомассы, дрожжей, продуктов
...ет ьиз ретспня 5 уктов взве.ьелью печт 10 тематуре4%,Изобретение относится к получению белкового продукта из микробной биомассы. Данный продукт может быть использован для обогащения пищевых продуктов, например пище. вых концентратов, консервов, колбасных и хлебобулочных изделий, белком и витамином.Известны способы получения белковых продуктов из биомассы дрожжей путем сушки ее во взвешенном состоянии.Цель изобретения - улучшение коысист егьпии полученного продукта, повышение его биологической ценности и уменьшение потерь прн сушке.Это достигается тсм, что в биомассу перед сушкой вводят солодовые ростки в количестве 8 - 10% по сухому весу от сухого веса дрожжей Сушку осуществляют при температуре 140 - 170 С до остаточной влажности 2 -...
Способ получения модифицированной панкреатической рибонуклеазы
Номер патента: 540873
Опубликовано: 30.12.1976
МПК: C07G 7/00
Метки: модифицированной, панкреатической, рибонуклеазы
...перемешивают и добавляют 2 мл 0,2 М трис-НС 1-буфера (рН 8,5). Смесь перемешивают 3 час и оставляют на ночь. Связывание проводят при 20"С. Аналогичным образом проводят связывание при 0"С. Связанные препараты отмывают от несвязанных холодной водой.Количество связанной рибонуклеазы по отношению к рибонуклеазе, взятой в реакцию, составляет для целлюлозы 40 - 50%.Пример 2.А, Активация водорастворимой матрицы.1 г полиглюкина смешивают с 200 мг хлористого Х- (,и-нитробензилоксиметил) -пиридиния, растворенного в 2 мл 0,7/о-ного раствора С 1-1 зСООВ 1 а, высушивают в эксикаторе и прогревают 30 мин при 1 ОО - 110"С. Растворяют в воде и осаждают спиртом. Затем восстанавливают гидросульфитом натрия (30 мин при 50 - 60 С). Йиализуют против...
Способ выделения цитохрома c из биомассы дрожжей
Номер патента: 1706211
Опубликовано: 27.02.1996
Авторы: Вдовина, Ковалева, Козлов, Молчанова, Темина
МПК: C12N 9/02
Метки: биомассы, выделения, дрожжей, цитохрома
...буферным раствором рН 6,8 - 7,3,При добавлении окислителя менее 1 мгна 100 мг цитохрома С наблюдается неполная сорбция на ионообменнике, а добавление более 1,5 мг экономическинецелесообразно (см. табл,) и ведет к нежелательной сорбции сопутствующих белков.Таким образом, добавление окислителяв белковый раствор, содержащий цитохромС, перед хроматографической очисткой позволяет снизить потери на стадии сорбциицитохрома С, а применение ионообменойсмолы КБТ в качестве сорбента в данномспособе позволяет ускорить процесс хроматографической очистки за счет повышенияскорости сорбции и снизить потери эа счетповышения степени десорбции цитохромаС,П р и м е р 1. Дрожжи РснагпегпЬгапа 1 асепз штамм 8 КМ Увыращивают на минеральной среде...
Способ получения ферментов из биомассы bacillus амylоliquеfасiеns штамм вкпм в-3188
Номер патента: 1661211
Опубликовано: 07.07.1991
Авторы: Бойков, Малыгин, Мацкова, Назаренко, Чикаев
МПК: C12N 9/14
Метки: bacillus, амylоliquеfасiеns, биомассы, в-3188, вкпм, ферментов, штамм
...АТР и инкубируют в течение 16 ч при 10 С. Затем проводят повторную рестрикцию эндонуклеазой Вагп Н 1. Продукты каждой из этих реакций анализируют электрофорезом в 1 о -ном агарозном геле. Каквидно из электрофореграммы, полученный препарат эндонуклеазы Вагп Н 1 обеспечивает полную рестрикцию ДНК фага 1 с образованием фрагментов ожидаемой длины.После добавления ДНК-лигазы происходитполная сшивка рестриктов. Повторная рестрикция продукта лигазной реакции приводят к образованию характерных фрагментов рестрикции. Данный тест показывает, чтопрепарат Вагп Н 1 свободен от примесей экзонуклеаз, фосфатаз и неспецифических эндонуклеаз.П р и м е р 2. Свойства экзонуклеазыВ.аву 1 оИрце 1 ас 1 епз,В данном примере приведены доказательства того, что...
Предыдущий патент: Способ определения фибринолитической активности препарата стрептокиназы
Следующий патент: Штамм 17-5, используемый для получения ингибитора трипсина
Случайный патент: Способ переработки кровельных материалов