Способ определения катехоламинов в крови

СОЮЗ СОВЕТСНИХСОЦИАЛИСТ ИЧЕСНИХРЕСПУБЛИН 9) (И) ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССРПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИИ ОПИСАНИ Н АВТОРСКОМУ Н/вТЕЛЬСТВУ енк Айейа 1 ей ой Ье ипру,а рЬу(21) (22) (46) (72) (53) (56) ве Оо Г 1 пог 1 лпйЕц Саес Бсооп 600082/28-143.06.837.04.86. Бюл. У 13.И.Мардарь и Д.П.Кл16-0.88.8 (088,8)а 1 с 1 с В Омвап СЬ.,о 1 оса 1 Йеесгдрйоасепсе веСЬой. Асеа1965, 2, 21-23.ег 0.8., Езйипайдоп1 го 1 авдпез хп от 1 пе.1959, 27, 122. 4 С 01 И 1/30, А 61 В 10/О(54)(57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КАТЕХОЛАМИНОВ В КРОВИ путем приготовлениямазков, их фиксации с последующимокрашиванием и определением содержания катехоламинов по интенсивности окрашивания, о т л и ч а ю щ и й -с я тем, что, с целью повышенияточности способа ври определении катехоламинов преимущественно в эритроцитах, фиксацию проводят в 2 Х-номрастворе бихромата калия при 36-38 Св темноте, а в качестве красителяиспользуют 10-203-нцй раствор азотнокислого серебра, при этом окрашивание проводят в течение 5-10 мин.1 1223078Изобретение относится к медицине,а точнее гистологии, и может бытьиспользовано как в научных, так и вдиагностических целях в кардиологии,эндокринологии. 5Целью изобретения является повышение точности способа при определении катехоламинов преимущественно вэритроцитах за счет использованияфиксатора бихромата калия и красителя азотнокислого серебра.Способ осуществляют следующимобразом,Утром, натощак производят заборкапли крови из пальца, готовят мазок на чистом предметном стекле исразу же фиксируют в 2 -ном раствоОре бихромата калия при 36-38 С, втемноте, в течение 2 ч. Затем препараты промывают водой, 5-10 мин ок ррашивают 10-20%-ным раствором азотнокислого серебра, промывают, подкрашивают 1 мин. 1 .-ным раствором эозина, промывают, обезвоживают спиртом,просветляют ксилолом, заключают, исследуют под микроскопом в эритроцитах темные глыбки, которые представляют включения катехоламинов,Интенсивность реакции на катехоламины оценивают путем подсчета количества эритроцитов с включениями катехоламинов и по содержанию этихвключений.П р и м е р 1, У здорового человека 42 лет М., утром, натощак обычным способом получают каплю крови изпальца, производят мазок на чистомпердметном стекле и тут же фиксируют 2%-ным раствором бихромата калия при 37 С. После 2 "часовой фиксации в термостате, в темноте, мазок промывают, окрашивают 10%-нымазотнокислым серебром в течение5 мин, снова промывают, подкрашивают 1 -ным водным раствором эозина,промывают, просушивают спиртом, заключают в канадский бальзам. Изучаютпрепарат под микроскопом (Об.80,ок. 15), наблюдают: темные глыбки в97 эритроцитов, глыбки выглядят ввиде мелкой и средней зернистости,единичных крупных палочек расположенных по всей цитоплазме эритроцитов,П р и м е р 2. Больной 3 36 лет, жалуется на приступообразные головные боли, дрожание тела, повышение артериального давления, которое плохо снижается гипотензивными препаратами. Похудел, болеет 4 года. У больного производят забор крови из пальца, готовят мазок, фиксируют в 2 .-ном растворе бихромата калия при 36 С 2 ч, фиксируют в темноте, промывают и окрашивают 20 -ным азотно- кислым серебром 10 мин. Далее как в примере 1. При изучении мазка крови устанавливают наличие включений в эритроцитах в виде мелкой зернистости, палочек и стопок. Включения ,содержатся во всех эритроцитах. На основании субъективных и объективных данных, анализа крови на катехоламины цитохимическим и флюорометрическим методами у больного диагностируют феохромоцитому - опухоль левого надпочечника, которую удаляют хирургическим путем,П р и м е р 3. Больная Э., 5 блет, жалуется на боли в области сердца, слабость, одышку, головныеболи. Болеет 8 лет. У больной буруткровь из пальца, готовят мазок и ЗО обрабатывают как описано в примере 2,но при 38 С и концентрации азотнокислого серебра 15 . При микроскопиимазка крови больной установлено отсутствие включений катехоламинов в15% эритроцитов, в остальных 853эритроцитов включгния выявлялись ввиде мелкой и крупной зернистости,10 клеток от 85%, имеющих включения, заполнены мелкими глыбками и 40 выглядят темными клетками. Частьэритроцитов содержит венчик миелиноподобных, нитчатых структур. С помощью электрокардиограммы у больнойдиагностируют ишемическую болезнь 45 сердца, ишемию задней стенки левогожелудочкаБольной назначают терапию,включающую в-адреноблокатор-анаприлин, После 7-дневного лечения производят повторный анализ крови накатехоламины и устанавливают восстановление содержания катехоламинов во всех эритроцитах в большомколичестве. ти аж 778 Подписное ВНИИПИ Заказ 1703/44 Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4